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猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
被引量:
2
1
作者
周丹娜
李文浩
+10 位作者
阮征
刘威
郭锐
杨克礼
段正赢
袁芳艳
刘泽文
陈文杰
孟丽
焦祖武
田永祥
《动物医学进展》
北大核心
2018年第9期1-5,共5页
为建立一种快速、准确检测猪流产衣原体(Chlamydophila abortus,C.abortus)实时荧光定量PCR检测方法,根据C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)的基因序列设计1对引物和1条分子探针(FAM和Dabycl标记),以构建的重组质粒作为标准阳性质粒,通过筛...
为建立一种快速、准确检测猪流产衣原体(Chlamydophila abortus,C.abortus)实时荧光定量PCR检测方法,根据C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)的基因序列设计1对引物和1条分子探针(FAM和Dabycl标记),以构建的重组质粒作为标准阳性质粒,通过筛选和条件优化,建立了猪流产衣原体实时荧光定量PCR诊断方法。重复性、特异性及敏感性试验结果显示,重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.0×10~2拷贝/μL^1.0×10~7拷贝/μL内具有良好的线性关系,其相关系数为0.993 2,扩增效率为94.7%,灵敏度达到1.0拷贝/μL,批间批内变异系数(CV)为0.022%~0.051%,建立的方法可有效区分流产衣原体、猪支原体、猪衣原体、肺炎衣原体及猪蓝耳病毒等病原,具有良好的临床应用前景。
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关键词
猪流产衣原体
实时荧光定量PCR
momp基因
诊断方法
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职称材料
题名
猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
被引量:
2
1
作者
周丹娜
李文浩
阮征
刘威
郭锐
杨克礼
段正赢
袁芳艳
刘泽文
陈文杰
孟丽
焦祖武
田永祥
机构
农业
部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室
湖北省农业科学研究院畜牧兽医研究所
武汉市动物疫病预防控制中心
出处
《动物医学进展》
北大核心
2018年第9期1-5,共5页
基金
"十三五"国家重点研发计划(2016YFD0500906)
湖北省农业科技创新中心项目(2016-620-000-001-026)
文摘
为建立一种快速、准确检测猪流产衣原体(Chlamydophila abortus,C.abortus)实时荧光定量PCR检测方法,根据C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)的基因序列设计1对引物和1条分子探针(FAM和Dabycl标记),以构建的重组质粒作为标准阳性质粒,通过筛选和条件优化,建立了猪流产衣原体实时荧光定量PCR诊断方法。重复性、特异性及敏感性试验结果显示,重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.0×10~2拷贝/μL^1.0×10~7拷贝/μL内具有良好的线性关系,其相关系数为0.993 2,扩增效率为94.7%,灵敏度达到1.0拷贝/μL,批间批内变异系数(CV)为0.022%~0.051%,建立的方法可有效区分流产衣原体、猪支原体、猪衣原体、肺炎衣原体及猪蓝耳病毒等病原,具有良好的临床应用前景。
关键词
猪流产衣原体
实时荧光定量PCR
momp基因
诊断方法
Keywords
pig
Chlamydophila abortus
real-time PCR
momp gene
detection
分类号
S852.67 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
周丹娜
李文浩
阮征
刘威
郭锐
杨克礼
段正赢
袁芳艳
刘泽文
陈文杰
孟丽
焦祖武
田永祥
《动物医学进展》
北大核心
2018
2
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