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葛根素通过调控NF-κB通路减轻高糖诱导的RSC96细胞炎症反应 被引量：12
1
作者 涂世伟 吴太鼎 +3 位作者 李欣 郑思 王佳音 陈龙菊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2164-2171,共8页
目的:探讨葛根素(Pue)对高糖(HG)条件下大鼠施万细胞系RSC96炎症损伤的作用。方法:将RSC96细胞随机分为4组:对照(Con)组、HG组、Pue预处理(HG+Pue)组和核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)预处理(HG+PDTC)组。CCK-8法... 目的:探讨葛根素(Pue)对高糖(HG)条件下大鼠施万细胞系RSC96炎症损伤的作用。方法:将RSC96细胞随机分为4组:对照(Con)组、HG组、Pue预处理(HG+Pue)组和核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)预处理(HG+PDTC)组。CCK-8法检测细胞活力;Western blot检测凋亡相关分子caspase-3和cleved caspase-3的蛋白水平以确定HG造模的葡萄糖浓度及Pue的最佳作用浓度;ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的含量;Western blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白水平;免疫荧光观察NF-κB共定位情况。结果:成功构建体外RSC96细胞HG损伤模型。CCK-8实验结果显示,与Con组相比,HG组的RSC96细胞活力显著降低(P<0.05);经Pue预处理15 min,细胞活力显著提高(P<0.05)。Western blot结果显示,与Con组相比,HG组NF-κB p65、p-NF-κB p65、caspase-3、cleaved caspase-3、IL-1β和TNF-α的蛋白水平均显著升高(P<0.05);经Pue或PDTC预处理15 min,上述蛋白水平均显著下降(P<0.05)。ELISA结果显示,HG组IL-1β和IL-6含量均高于Con组(P<0.05);与HG组相比,HG+Pue组和HG+PDTC组IL-1β和IL-6含量均显著降低(P<0.05)。免疫荧光结果显示,与Con组相比,HG组NF-κB共定位系数较高(P<0.05);与HG组相比,HG+Pue组及HG+PDTC组的共定位系数显著降低(P<0.05)。结论:Pue可减轻HG诱导的RSC96细胞炎症,其机制可能与NF-κB信号通路被抑制有关。 展开更多
关键词 葛根素 施万细胞 糖尿病周围神经病变 炎症 NF-ΚB信号通路
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继发性肺结核致病机制的再认识及索状因子在其中的作用 被引量：5
2
作者 刘镇铭 艾沁悦 +3 位作者 耿雪薇 黄胜 王嘉军 石廷玉 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期452-461,共10页
原发性结核与继发性结核是两个完全不同的致病过程,目前对原发性结核的致病机制有了较清楚认识,而对继发性结核致病机制的认识并不完全清楚。本文总结了广泛接受的继发感染致病机制存在的问题及产生的原因,以及致病机制新的认识和索状... 原发性结核与继发性结核是两个完全不同的致病过程,目前对原发性结核的致病机制有了较清楚认识,而对继发性结核致病机制的认识并不完全清楚。本文总结了广泛接受的继发感染致病机制存在的问题及产生的原因,以及致病机制新的认识和索状因子在其中的作用,希望促进对结核分枝杆菌继发感染致病机制的理解,为疫苗研发和药物开发提供新的认识。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 原发感染 继发性感染 索状因子 肺结核
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KDM5C通过Hippo-YAP1通路调控人宫颈癌发生的初步机制 被引量：5
3
作者 刘绪 张欣冉 +6 位作者 李堂华 周威 梁荷淼 高文珍 张娟 苗林 陈晓华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1023-1033,共11页
目的探讨组蛋白去甲基化酶5C(KDM5C)通过Hippo-YAP1通路调控人宫颈癌发生的分子机制。方法采用稳转过表达KDM5C蛋白的CaSki细胞系,应用转录组测序(RNA-Seq)技术进行全转录组测序分析差异表达基因,并对差异基因进行GO分析、KEGG分析和蛋... 目的探讨组蛋白去甲基化酶5C(KDM5C)通过Hippo-YAP1通路调控人宫颈癌发生的分子机制。方法采用稳转过表达KDM5C蛋白的CaSki细胞系,应用转录组测序(RNA-Seq)技术进行全转录组测序分析差异表达基因,并对差异基因进行GO分析、KEGG分析和蛋白互作网络分析。随后用siRNA敲低KDM5C基因,并通过RT-qPCR和Western blotting等反向验证关键受调控基因Yes相关蛋白1(YAP1)的表达变化。对过表达KDM5C蛋白的CaSki细胞系通过染色质免疫共沉淀测序(ChIP-Seq)技术和ChIP-qPCR方法分析KDM5C蛋白对YAP1基因启动子区间甲基化状态的影响。结果RNA-Seq分析显示,过表达KDM5C蛋白导致356个mRNA表达明显上调和335个mRNA表达明显下调(P<0.05);GO富集分析显示,KDM5C蛋白主要参与机体各种生物发育过程;KEGG富集分析显示,KDM5C蛋白主要参与黏着斑连接、甾类激素生物合成、Hippo-YAP1信号通路、FoxO信号通路、凋亡和感染等过程。RT-qPCR分析结果显示,敲低基因KDM5C可上调YAP1基因的表达;Western blotting结果也显示,降低KDM5C蛋白的表达可同时上调YAP1和磷酸化YAP1的表达水平(P<0.05)。ChIP-Seq分析显示,过表达KDM5C蛋白可明显升高YAP1基因启动子区间的H3K4me1水平、并降低H3K4me3水平(P<0.05),ChIP-qPCR分析也验证了这种表达变化(P<0.05)。结论KDM5C蛋白可调控宫颈肿瘤细胞YAP1基因启动子的组蛋白H3K4me1/me3甲基化水平,进而影响YAP1基因的转录。YAP1蛋白作为Hippo-YAP1通路的核心因子,其表达改变直接影响细胞的黏附、增殖和凋亡等过程,进而参与宫颈癌的发生发展。 展开更多
关键词 宫颈癌 组蛋白去甲基化酶5C 转录组测序 染色质免疫共沉淀测序 Hippo-YAP1通路
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