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大肠杆菌表达几丁质酶对不同底物的酶学性质及其降解产物分析
被引量：
3
1
作者
吕梦圆
石佳仙
+3 位作者
夏祥
林建国
蔡俊
胡瑛
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期26-32,共7页
采用重组大肠杆菌大量表达几丁质酶LICHI18A,经Ni-NTA柱纯化后,对不同底物的酶学性质进行了研究,以Lineweaver-Burk双倒数作图法测定米氏常数,采用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对降解产物进行分析。结果表明,该几丁质酶分子量为54...
采用重组大肠杆菌大量表达几丁质酶LICHI18A,经Ni-NTA柱纯化后,对不同底物的酶学性质进行了研究,以Lineweaver-Burk双倒数作图法测定米氏常数,采用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对降解产物进行分析。结果表明,该几丁质酶分子量为54 k Da,对水溶性壳聚糖的Km和Vmax分别为4.04 mg/m L和222.2μmol/(min·mg);对水溶性壳聚糖的反应最适温度和p H分别为60℃和7.0;对胶体几丁质的Km和Vmax分别为2.913 mg/m L和2.836μmol/(min·mg),反应最适温度和p H分别为40℃和5.0。Ni2+、Mg2+、Ca2+、Zn2+对胶体几丁质的降解有明显的促进作用,但对水溶性壳聚糖的降解没有促进作用,且Ni2+和Zn2+有一定的抑制作用。Tween-80对降解胶体几丁质起一定的促进作用,而不同浓度的SDS有抑制酶活作用,且浓度越高抑制作用越强。TLC和HPLC分析结果表明,该酶降解胶体几丁质的产物主要为几丁二糖和单糖,而水溶性壳聚糖的降解产物较为复杂,主要有单糖、几丁二糖和甲壳寡糖。
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关键词
几丁质酶
大肠杆菌
纯化
酶学性质
酶解产物
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职称材料
回转处理对雨生红球藻细胞结构、光合活性、糖及虾青素代谢的影响研究
2
作者
张玉
胡春香
张德禄
《空间科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期293-301,共9页
通过利用二维回转器模拟微重力,对20 d回转条件下雨生红球藻细胞结构、光合活性、初级糖代谢及次生代谢产物变化情况进行分析,发现回转作用使得藻细胞体积变小,形状变得不规则.超微结构分析显示,回转处理后,藻细胞的淀粉粒变小,类囊体...
通过利用二维回转器模拟微重力,对20 d回转条件下雨生红球藻细胞结构、光合活性、初级糖代谢及次生代谢产物变化情况进行分析,发现回转作用使得藻细胞体积变小,形状变得不规则.超微结构分析显示,回转处理后,藻细胞的淀粉粒变小,类囊体膜结构排列松弛.叶绿素含量在回转前期降低,中后期提高.类胡萝卜素含量及光合系统Ⅱ活性在整个回转过程中均降低.由此得出藻细胞光合活性的下降与叶绿体类囊体膜结构的变化及色素含量下降有关.藻细胞淀粉粒变小、淀粉含量下降与淀粉酶活性的上升有关,说明回转作用通过提高淀粉酶水解活性造成淀粉含量下降.蔗糖和海藻糖的积累在藻细胞对早期回转条件的适应过程中发挥了一定保护作用,同时造成合成此两种糖的单糖底物-葡萄糖和果糖含量下降.在被称作适应期的回转中期,叶绿素、葡萄糖和果糖均出现补偿性合成,而蔗糖和海藻糖的积累相比回转前期出现相应下降.雨生红球藻次生代谢产物虾青素在整个回转过程中均下降,分析认为这是由虾青素的原初合成底物即类胡萝卜素合成的降低所导致.
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关键词
回转器
雨生红球藻
蔗糖
虾青素
糖代谢
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职称材料
题名
大肠杆菌表达几丁质酶对不同底物的酶学性质及其降解产物分析
被引量：
3
1
作者
吕梦圆
石佳仙
夏祥
林建国
蔡俊
胡瑛
机构
湖北工业大学
轻工
学部
生物工程
学院
发酵
工程
教育部
重点
实验室
/
工业
发酵
湖北省
协同
创新
中心
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期26-32,共7页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(31201425)
人事部2011年度留学人员科技活动项目择优资助项目
2013年全国大学生创新创业训练计划项目(201210500030)
文摘
采用重组大肠杆菌大量表达几丁质酶LICHI18A,经Ni-NTA柱纯化后,对不同底物的酶学性质进行了研究,以Lineweaver-Burk双倒数作图法测定米氏常数,采用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对降解产物进行分析。结果表明,该几丁质酶分子量为54 k Da,对水溶性壳聚糖的Km和Vmax分别为4.04 mg/m L和222.2μmol/(min·mg);对水溶性壳聚糖的反应最适温度和p H分别为60℃和7.0;对胶体几丁质的Km和Vmax分别为2.913 mg/m L和2.836μmol/(min·mg),反应最适温度和p H分别为40℃和5.0。Ni2+、Mg2+、Ca2+、Zn2+对胶体几丁质的降解有明显的促进作用,但对水溶性壳聚糖的降解没有促进作用,且Ni2+和Zn2+有一定的抑制作用。Tween-80对降解胶体几丁质起一定的促进作用,而不同浓度的SDS有抑制酶活作用,且浓度越高抑制作用越强。TLC和HPLC分析结果表明,该酶降解胶体几丁质的产物主要为几丁二糖和单糖,而水溶性壳聚糖的降解产物较为复杂,主要有单糖、几丁二糖和甲壳寡糖。
关键词
几丁质酶
大肠杆菌
纯化
酶学性质
酶解产物
Keywords
Chitinase
Escherichia coli
purification
enzymatic properties
hydrolysates
分类号
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
回转处理对雨生红球藻细胞结构、光合活性、糖及虾青素代谢的影响研究
2
作者
张玉
胡春香
张德禄
机构
湖北工业大学轻工学部生物工程学院发酵工程教育部重点实验室工业发酵湖北省协同创新中心
中国科
学院
水生
生物
研究所中国科
学院
藻类
生物
学
重点
实验室
武汉理工
大学
生物
科学与技术系
出处
《空间科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期293-301,共9页
基金
中国科学院战略先导专项(XDA04074002
XDA04020202-16)
载人航天二期项目共同资助
文摘
通过利用二维回转器模拟微重力,对20 d回转条件下雨生红球藻细胞结构、光合活性、初级糖代谢及次生代谢产物变化情况进行分析,发现回转作用使得藻细胞体积变小,形状变得不规则.超微结构分析显示,回转处理后,藻细胞的淀粉粒变小,类囊体膜结构排列松弛.叶绿素含量在回转前期降低,中后期提高.类胡萝卜素含量及光合系统Ⅱ活性在整个回转过程中均降低.由此得出藻细胞光合活性的下降与叶绿体类囊体膜结构的变化及色素含量下降有关.藻细胞淀粉粒变小、淀粉含量下降与淀粉酶活性的上升有关,说明回转作用通过提高淀粉酶水解活性造成淀粉含量下降.蔗糖和海藻糖的积累在藻细胞对早期回转条件的适应过程中发挥了一定保护作用,同时造成合成此两种糖的单糖底物-葡萄糖和果糖含量下降.在被称作适应期的回转中期,叶绿素、葡萄糖和果糖均出现补偿性合成,而蔗糖和海藻糖的积累相比回转前期出现相应下降.雨生红球藻次生代谢产物虾青素在整个回转过程中均下降,分析认为这是由虾青素的原初合成底物即类胡萝卜素合成的降低所导致.
关键词
回转器
雨生红球藻
蔗糖
虾青素
糖代谢
Keywords
Clinorotation, Haematococcus pluvialis, Sucrose, Astaxanthin,Carbohydrate metabolism
分类号
V524.1 [航空宇航科学与技术—人机与环境工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌表达几丁质酶对不同底物的酶学性质及其降解产物分析
吕梦圆
石佳仙
夏祥
林建国
蔡俊
胡瑛
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015
3
在线阅读
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职称材料
2
回转处理对雨生红球藻细胞结构、光合活性、糖及虾青素代谢的影响研究
张玉
胡春香
张德禄
《空间科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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职称材料
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