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蟑螂浓核病毒(pfDNV)非结构基因启动子的活性研究
被引量：
2
1
作者
杨波
董小敏
+5 位作者
蔡大威
刘志刚
胡征
汪浩勇
张珈敏
胡远扬
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期486-491,共6页
为了研究蟑螂Periplanetafuliginosa浓核病毒(pfDNV)非结构基因转录调控的机制,用PCR的方法从蟑螂浓核病毒基因组DNA中扩增了非结构蛋白基因ns3翻译起始密码子上游325bp的启动子序列;并进一步以其作为模板,利用聚合酶链式反应技术,得到...
为了研究蟑螂Periplanetafuliginosa浓核病毒(pfDNV)非结构基因转录调控的机制,用PCR的方法从蟑螂浓核病毒基因组DNA中扩增了非结构蛋白基因ns3翻译起始密码子上游325bp的启动子序列;并进一步以其作为模板,利用聚合酶链式反应技术,得到6个不同长度的启动子片段和两个定点突变体片段,构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒,在脂质体介导下转染多种昆虫细胞,体外分析了该启动子的活性。结果表明:该325bp DNA片段在Sf9,S2,Tn368及Ld652细胞中均具有较高的启动子活性;其转录起始基序CAGT对维持该启动子的基本转录活性而言是必需的,而TATA盒对此则是非必需的,但它的存在可显著提高启动子的转录活性。同时,我们还发现,病毒非结构蛋白NS1对该启动子具有反式激活作用,并且这种激活作用的大小取决于NS1蛋白在细胞中的浓度。
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关键词
蟑螂浓核病毒
启动子
反式激活
昆虫细胞
表达载体
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职称材料
题名
蟑螂浓核病毒(pfDNV)非结构基因启动子的活性研究
被引量：
2
1
作者
杨波
董小敏
蔡大威
刘志刚
胡征
汪浩勇
张珈敏
胡远扬
机构
湖北工业大学生物技术系
武汉
大学
病毒学国家重点实验室
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期486-491,共6页
基金
湖北工业大学博士科研启动基金
文摘
为了研究蟑螂Periplanetafuliginosa浓核病毒(pfDNV)非结构基因转录调控的机制,用PCR的方法从蟑螂浓核病毒基因组DNA中扩增了非结构蛋白基因ns3翻译起始密码子上游325bp的启动子序列;并进一步以其作为模板,利用聚合酶链式反应技术,得到6个不同长度的启动子片段和两个定点突变体片段,构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒,在脂质体介导下转染多种昆虫细胞,体外分析了该启动子的活性。结果表明:该325bp DNA片段在Sf9,S2,Tn368及Ld652细胞中均具有较高的启动子活性;其转录起始基序CAGT对维持该启动子的基本转录活性而言是必需的,而TATA盒对此则是非必需的,但它的存在可显著提高启动子的转录活性。同时,我们还发现,病毒非结构蛋白NS1对该启动子具有反式激活作用,并且这种激活作用的大小取决于NS1蛋白在细胞中的浓度。
关键词
蟑螂浓核病毒
启动子
反式激活
昆虫细胞
表达载体
Keywords
Periplaneta fuliginosa densovirus （PfDNV）
promoter
transactivation
insect cells
expression vector
分类号
Q965.9 [生物学—昆虫学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蟑螂浓核病毒(pfDNV)非结构基因启动子的活性研究
杨波
董小敏
蔡大威
刘志刚
胡征
汪浩勇
张珈敏
胡远扬
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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