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STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响
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作者 王新平 王林宽 +1 位作者 胡鹏超 石义华 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第9期1670-1681,共12页
目的探究STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响。方法以人骨肉瘤细胞系HOS及其顺铂耐药细胞系HOS/DDP为实验对象,顺铂(0.5、1、2、4、8、16、32 mg/L)、铁死亡激动剂Erastin(Era)(2μmol/L)和铁死亡抑制剂F... 目的探究STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响。方法以人骨肉瘤细胞系HOS及其顺铂耐药细胞系HOS/DDP为实验对象,顺铂(0.5、1、2、4、8、16、32 mg/L)、铁死亡激动剂Erastin(Era)(2μmol/L)和铁死亡抑制剂Ferrostain-1(Fer1)(10μmol/L)单独或联合处理。使用CCK-8法和细胞克隆形成实验测定不同处理组细胞活力与增殖能力;细胞划痕实验测定细胞的迁移能力;采用试剂盒测定细胞活性氧(ROS)、细胞内亚铁离子含量、细胞内线粒体的膜电位和功能状态、丙二醛(MDA)水平和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测铁死亡相关基因的mRNA表达水平;通过Western blot检测各组谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、磷酸化信号传导子及转录激活子3(p-STAT3)及信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白的表达。结果顺铂单独处理后HOS细胞活力、线粒体膜电位及GSH/GSSG比值下降(P<0.01),ROS水平、亚铁离子水平及MDA含量升高(P<0.01),GPX4(P<0.01)和SLC7A11蛋白及p-STAT3水平下降(P<0.05);联合铁死亡抑制剂Fer1处理可逆转上述结果(P<0.05)。在HOS/DDP细胞中,铁死亡抑制基因GPX4、FTH1、SLC7A11和AIFM2较HOS细胞高(P<0.05),而铁死亡促进基因ACSL4、PTGS2则较HOS细胞低(P<0.05),顺铂单独处理引起的细胞活力及线粒体膜电位下降程度、ROS、亚铁离子及MDA水平的升高程度均低于HOS细胞,SLC7A11蛋白含量变化不明显;但联合铁死亡激动剂Era处理后,HOS/DDP细胞的活力、线粒体膜电位、GSH/GSSG比值均下降(P<0.05),且p-STAT3、GPX4及SLC7A11的蛋白水平也降低(P<0.05)。结论激活由p-STAT3参与调控的铁死亡过程可以增强HOS/DDP对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 人骨肉瘤细胞 铁死亡 顺铂 耐药 STAT3蛋白 p-STAT3蛋白
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石蒜碱通过YAP1/TRFC通路促进骨肉瘤细胞铁死亡并增强顺铂敏感性
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作者 王林宽 王新平 +3 位作者 易开君 黎智勇 赵琦 石义华 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期882-894,共13页
目的:探讨石蒜碱(lycorine,Lyc)联合顺铂(cisplatin,Cis)对人骨肉瘤细胞的顺铂治疗的增敏效果,并探讨其作用机制。方法:利用人骨肉瘤细胞MG63、HOS和顺铂耐药细胞HOS/DDP,通过CCK8实验分别检测Lyc、顺铂单独或联合用药对细胞活力的影响... 目的:探讨石蒜碱(lycorine,Lyc)联合顺铂(cisplatin,Cis)对人骨肉瘤细胞的顺铂治疗的增敏效果,并探讨其作用机制。方法:利用人骨肉瘤细胞MG63、HOS和顺铂耐药细胞HOS/DDP,通过CCK8实验分别检测Lyc、顺铂单独或联合用药对细胞活力的影响;集落形成实验检测药物对细胞增殖能力的影响;划痕实验检测药物对细胞迁移能力的影响;活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测细胞ROS水平的改变;谷胱甘肽(gultathione,GSH)/氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)试剂盒测定细胞内GSH水平的变化;线粒体膜电位探针JC-1检测药物对线粒体功能的影响;FerrOrange亚铁离子荧光探针检测细胞内亚铁离子含量的改变;采用丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒测定细胞内MDA含量的变化;RT-qPCR检测药物对铁死亡关键基因表达水平的影响;Western blot检测Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)、脂酰辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA sythetase long-chain family member 4,ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)和转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)的蛋白表达水平的改变。结果:Lyc与顺铂均能抑制人骨肉瘤细胞的增殖,与单独顺铂处理相比,Lyc联合顺铂处理后MG63、HOS及HOS/DDP细胞的活力均显著下降,细胞增殖及迁移能力受到显著抑制;ROS水平显著升高、GSH含量减少,线粒体损伤明显,亚铁离子水平显著增加,MDA含量显著增加;RT-qPCR结果显示,Lyc联合顺铂较顺铂单独处理能更显著下调铁死亡促进基因的表达,并上调铁死亡抑制基因的表达(P<0.05);Western blot结果显示Lyc联合顺铂处理后GPX4的蛋白表达略下降,YAP1、TRFC、ACSL4及HO-1表达均显著升高(P<0.05)。结论:Lyc通过增加YAP1/TRFC通路介导的铁死亡,提高MG63、HOS及HOS/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 石蒜碱 骨肉瘤 顺铂 耐药性 铁死亡
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血清淀粉样蛋白A对骨肉瘤细胞侵袭、迁移能力以及MAPK信号通路的影响 被引量:10
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作者 张光耀 庄正陵 杨进波 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2011-2016,共6页
目的:探讨沉默血清淀粉样蛋白A(SAA)的表达对骨肉瘤细胞活力、凋亡、转移能力以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法:通过小干扰RNA(siRNA)特异性沉默SAA在骨肉瘤U2OS细胞中的表达,实验分为空白对照组、阴性对照组和实验组... 目的:探讨沉默血清淀粉样蛋白A(SAA)的表达对骨肉瘤细胞活力、凋亡、转移能力以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法:通过小干扰RNA(siRNA)特异性沉默SAA在骨肉瘤U2OS细胞中的表达,实验分为空白对照组、阴性对照组和实验组,阴性对照组和实验组分别转染阴性对照siRNA和SAA-siRNA,空白对照组不做任何处理。MTT法观察细胞的活力变化,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞的凋亡率,Transwell小室法分析细胞迁移和侵袭能力的变化,Western blot检测细胞中SAA、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的蛋白水平。结果:SAA-siRNA可显著降低SAA在骨肉瘤U2OS细胞中的表达(P <0. 05);与空白对照组相比,SAA-siRNA组细胞的活力显著降低(P <0. 05),凋亡率显著升高(P <0. 05),侵袭和迁移能力显著降低(P <0. 05)。SAA-siRNA组细胞中p-p38 MAPK和p-JNK的蛋白水平显著低于对照组(P <0. 05),而总JNK和p38蛋白表达量的差异无统计学显著性。结论:沉默SAA的表达可抑制骨肉瘤细胞活力,诱导其凋亡,降低细胞的转移能力,其作用可能与调控MAPK信号通路的活性有关。 展开更多
关键词 血清淀粉样蛋白A 骨肉瘤 细胞凋亡 侵袭 MAPK信号通路
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临床和MRI影像组学及深度学习联合模型预测初发前列腺癌骨转移 被引量:10
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作者 宋鑫洋 张甜 +3 位作者 王洋洋 胡翔宇 沈天赐 杨峰 《中国介入影像与治疗学》 北大核心 2023年第4期212-217,共6页
目的基于临床、MRI影像组学及深度学习(DL)构建联合模型,评估其预测初发前列腺癌(PCa)骨转移(BM)的价值。方法回顾性分析286例经病理证实的初发PCa,根据患者来源将其分为训练集(53例BM、121例无BM)和测试集(29例BM、83例无BM)。采用单... 目的基于临床、MRI影像组学及深度学习(DL)构建联合模型,评估其预测初发前列腺癌(PCa)骨转移(BM)的价值。方法回顾性分析286例经病理证实的初发PCa,根据患者来源将其分为训练集(53例BM、121例无BM)和测试集(29例BM、83例无BM)。采用单因素分析及多因素logistic回归分析筛选初发PCa BM的临床独立风险因素,构建临床模型;基于MR T2WI和弥散加权成像(DWI)提取并筛选最佳影像组学特征,构建影像组学标签评分(Rad-score),以最佳DL特征建立DL标签评分(DL-score),进而构建影像组学-DL模型;最后基于临床独立风险因素、Rad-score及DL-score构建联合模型。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估各模型预测初发PCa BM的效能,以决策曲线分析(DCA)对比其临床获益。结果血清前列腺特异抗原(PSA)(OR=1.003,P<0.01)及国际泌尿病理学会(ISUP)评分(OR=3.023,P=0.01)为初发PCa BM的临床独立风险因素;以之构建的临床模型预测训练集及测试集初发PCa BM的AUC分别为0.79及0.81。以影像组学-DL模型及联合模型预测训练集和测试集初发PCa BM的AUC分别为0.90、0.93及0.92、0.95,联合模型在训练集(Z=3.12、P<0.01,Z=1.76、P=0.04)和测试集的AUC(Z=2.89、P<0.01,Z=2.23、P=0.03)均高于临床模型及影像组学-DL模型。DCA显示,阈值取0.10~0.78时,联合模型的临床获益高于临床模型及影像组学-DL模型。结论临床和MRI影像组学及DL联合模型可有效预测初发PCa BM。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 肿瘤转移 深度学习 影像组学
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