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体外合成EGFP的mRNA转染人脐带间充质干细胞的稳定性研究被引量：2: 1; 作者王小莉胡培 +2 位作者刘志祥袁雅红李东升《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1094-1097,共4页; 目的鉴定人脐带间充质干细胞(hUCMSC),通过体外修饰增加体外合成mRNA转染hUCMSC的稳定性。方法流式细胞仪检测hUCMSC免疫表型,油红O和碱性磷酸酶染色分别进行成脂、成骨分化鉴定。体外合成EGFP的mRNA经polyA尾、帽子结构及碱基等方面的... 展开更多; 关键词 MRNA 修饰人脐带间充质干细胞稳定性; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用体外合成的mRNA编辑间充质干细胞对神经胶质瘤DBTRG细胞杀伤作用: 2; 作者付红霞马志鹏 +1 位作者储承科郭兴荣《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期535-539,547,共6页; 目的探讨利用体外合成抑癌基因TRAIL-、PTEN-m RNA编辑的间充质干细胞(MSCs)对DBTRG细胞杀伤作用。方法利用体外反转录方法合成TRAIL-、PTEN-m RNA,转染MSC后用westernblotting方法检测TARIL及PTEN蛋白的表达情况,利用transwell共培养... 展开更多; 关键词合成mRNA 间充质干细胞抑癌基因 DBTRG神经胶质瘤基因治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

ANGPTL8调控糖代谢作用机制研究被引量：4: 3; 作者马石楠李忠耀郭兴荣《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期200-206,共7页; 探讨ANGPTL8在胰岛素作用下对人肝细胞糖代谢影响及可能的作用机制。利用尾静脉水动力转染证实在小鼠肝脏过表达ANGPTL8可提高进食期糖耐受;在Hep G2细胞中利用q PCR检测进食的主要调控因素胰岛素、葡萄糖等对ANGPTL8表达影响,发现单独... 展开更多; 关键词 ANGPTL8 糖耐受 PI3K/AKT信号通路糖原合成; 在线阅读下载PDF 职称材料

TALEN介导的CXCR4敲除肝癌细胞株的建立被引量：1: 4; 作者张文美丁妍 +3 位作者郭兴荣李东升赵万红王小莉《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期225-228,共4页; 通过TALEN打靶建立CXCR4的细胞株,旨在研究CXCR4对肝癌的影响。选用肝癌细胞株Hep G2,采用转录激活样效应物核酸酶(TALEN)干扰细胞中CXCR4的表达。构建的CXCR4 TALEN质粒转入Hep G2细胞,通过T7E1酶切确定打靶效率为40%,并通过测序筛选出... 展开更多; 关键词 TALEN CXCR4 肝癌基因打靶; 在线阅读下载PDF 职称材料

hPdx1和△-hPdx1蛋白表达系统的构建及功能鉴定: 5; 作者王小莉梁清乐李东升《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期120-124,共5页; 经鉴定成功构建了hPdx1和△-hPdx1蛋白表达系统,IPTG诱导蛋白表达后Western blot检测在37.2-52.3 kD之间出现了与两种目的蛋白理论分子量相符的蛋白条带。诱导后破碎菌体上清液,经分离纯化最终得到的目的蛋白纯度可达到95%以上。纯化的... 展开更多; 关键词构建蛋白表达鉴定 hPdx1 △-hPdx1; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名体外合成EGFP的mRNA转染人脐带间充质干细胞的稳定性研究被引量：2: 1; 作者王小莉胡培刘志祥袁雅红李东升; 机构湖北医药学院附属太和医院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室武汉大学中南医院湖北医药学院附属太和医院检验科; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1094-1097,共4页; 基金国家自然科学基金(81070614) 湖北医药学院自然科学研究启动基金(2011QDZR-26); 文摘目的鉴定人脐带间充质干细胞(hUCMSC),通过体外修饰增加体外合成mRNA转染hUCMSC的稳定性。方法流式细胞仪检测hUCMSC免疫表型,油红O和碱性磷酸酶染色分别进行成脂、成骨分化鉴定。体外合成EGFP的mRNA经polyA尾、帽子结构及碱基等方面的修饰转染hUCMSC,流式检测荧光强度。Trypan blue染色观察mRNA转染对细胞活性的影响。结果 hUCMSC高表达CD29、CD44、CD105,低表达CD34、CD45、HLA-DR,且向成脂、成骨方向分化。通过一系列修饰体外合成EGFP的修饰mRNA稳定性更好,且mRNA转染与DNA相比对细胞毒性更小。结论体外合成的mRNA经一系列的修饰后稳定性大大提高,可进入hUCMSC翻译成蛋白。; 关键词 MRNA 修饰人脐带间充质干细胞稳定性; Keywords mRNA modification human umbilical cord mesenchymal stem cells stability; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用体外合成的mRNA编辑间充质干细胞对神经胶质瘤DBTRG细胞杀伤作用: 2; 作者付红霞马志鹏储承科郭兴荣; 机构十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)检验科湖北医药学院附属太和医院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室; 出处《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期535-539,547,共6页; 基金国家自然科学基金应急管理项目(编号:81641028) 国家自然科学基金青年项目(编号:81700769) +2 种基金湖北省科技重大专项(编号:2016ACA157); 文摘目的探讨利用体外合成抑癌基因TRAIL-、PTEN-m RNA编辑的间充质干细胞(MSCs)对DBTRG细胞杀伤作用。方法利用体外反转录方法合成TRAIL-、PTEN-m RNA,转染MSC后用westernblotting方法检测TARIL及PTEN蛋白的表达情况,利用transwell共培养方法观察m RNA编辑的MSCs对DBTRG的迁移趋向性作用,利用荧光显微镜和活体成像仪检测在间接共培养条件下TRAIL-、PTEN-m RNA编辑的MSCs对DBTRG-LUC细胞的杀伤作用。结果体外合成的m RNA均能在MSCs中正确表达TRAIL、PTEN蛋白;与对照组对比两种m RNA编辑的MSCs对DBTRG细胞的趋向性均明显增强;TRAIL-、PTEN-m RNA编辑的MSCs培养上清(CM)均能显著抑制DBTRG细胞生长,并且TRAIL和PTEN共表达组存在着协同作用。结论利用体外合成抑癌基因m RNA的方法研究MSCs介导的双基因靶向对神经胶质瘤的杀伤作用,为今后临床利用人工合成的多基因m RNA靶向治疗肿瘤提供全新思路。; 关键词合成mRNA 间充质干细胞抑癌基因 DBTRG神经胶质瘤基因治疗; Keywords synthesized mRNAs mesenchymal stem cells anticancer gene glioma cells DBTRG gene therapy; 分类号 R739.4 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ANGPTL8调控糖代谢作用机制研究被引量：4: 3; 作者马石楠李忠耀郭兴荣; 机构湖北医药学院附属太和医院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室湖北医药学院生物医学工程学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期200-206,共7页; 基金国家自然科学基金应急管理项目(81641028) 湖北省自然科学基金面上项目(2016CFB408) +1 种基金湖北医药学院博士启动金项目(2016QDJR02); 文摘探讨ANGPTL8在胰岛素作用下对人肝细胞糖代谢影响及可能的作用机制。利用尾静脉水动力转染证实在小鼠肝脏过表达ANGPTL8可提高进食期糖耐受;在Hep G2细胞中利用q PCR检测进食的主要调控因素胰岛素、葡萄糖等对ANGPTL8表达影响,发现单独的葡萄糖或胰岛素对ANGPTL8表达影响不明显,而葡萄糖和胰岛素组合可显著促进ANGPTL8表达;利用Western blotting分析在ANGPTL8敲除(ANGPTL8-/-)和ANGPTL8稳定过表达(ANGPTL8++)的Hep G2细胞中胰岛素介导PI3K/AKT信号通路蛋白及其蛋白磷酸化表达差异,结果显示ANGPTL8可上调胰岛素介导的AKT信号通路中AKT、GSK-3β、Fox O1蛋白磷酸化;PAS染色分析ANGPTL8可促进胰岛素介导的糖原合成。; 关键词 ANGPTL8 糖耐受 PI3K/AKT信号通路糖原合成; Keywords ANGPTL8 glucose tolerance PI3K/AKT signaling pathway glycogen synthesis; 分类号 R587.1 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TALEN介导的CXCR4敲除肝癌细胞株的建立被引量：1: 4; 作者张文美丁妍郭兴荣李东升赵万红王小莉; 机构湖北医药学院附属太和医院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室湖北医药学院生物医学工程学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期225-228,共4页; 基金湖北医药学院自然科学研究启动金(2011QDZR-26) 国家级大学生创新创业训练计划项目(201410929004); 文摘通过TALEN打靶建立CXCR4的细胞株,旨在研究CXCR4对肝癌的影响。选用肝癌细胞株Hep G2,采用转录激活样效应物核酸酶(TALEN)干扰细胞中CXCR4的表达。构建的CXCR4 TALEN质粒转入Hep G2细胞,通过T7E1酶切确定打靶效率为40%,并通过测序筛选出了CXCR4敲除的单克隆细胞,免疫荧光和Western blot进一步证实CXCR4基因表达显著下调。; 关键词 TALEN CXCR4 肝癌基因打靶; Keywords TALEN CXCR4 hepatocellular carcinoma cell gene target; 分类号 R73-3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hPdx1和△-hPdx1蛋白表达系统的构建及功能鉴定: 5; 作者王小莉梁清乐李东升; 机构湖北医药学院附属太和医院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期120-124,共5页; 基金国家自然科学基金项目(81070614); 文摘经鉴定成功构建了hPdx1和△-hPdx1蛋白表达系统,IPTG诱导蛋白表达后Western blot检测在37.2-52.3 kD之间出现了与两种目的蛋白理论分子量相符的蛋白条带。诱导后破碎菌体上清液,经分离纯化最终得到的目的蛋白纯度可达到95%以上。纯化的蛋白加入人胚胎干细胞培养基中1 h后通过细胞免疫荧光检测发现,hPdx1蛋白可进入细胞而△-hPdx1不能进入细胞,表明表达得到的蛋白具有生物活性。; 关键词构建蛋白表达鉴定 hPdx1 △-hPdx1; Keywords Construction Expression Identification hPdxl △-hPdxl; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	体外合成EGFP的mRNA转染人脐带间充质干细胞的稳定性研究	王小莉胡培刘志祥袁雅红李东升	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	利用体外合成的mRNA编辑间充质干细胞对神经胶质瘤DBTRG细胞杀伤作用	付红霞马志鹏储承科郭兴荣	《实用医学杂志》 CAS 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	ANGPTL8调控糖代谢作用机制研究	马石楠李忠耀郭兴荣	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2017	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	TALEN介导的CXCR4敲除肝癌细胞株的建立	张文美丁妍郭兴荣李东升赵万红王小莉	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	hPdx1和△-hPdx1蛋白表达系统的构建及功能鉴定	王小莉梁清乐李东升	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料