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慢性牙周炎患者血清E-selectin的水平及其S128R基因多态性的研究 被引量:4
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作者 罗志晓 柴红波 +3 位作者 夏凌云 江玲 王晓勋 冷卫东 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期394-397,共4页
目的:探讨中国汉族人群中E-选择素第4外显子S128R基因多态性与慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)的相关性,以及CP对血清E选择素水平的影响。方法:采用病例-对照研究方法,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测C... 目的:探讨中国汉族人群中E-选择素第4外显子S128R基因多态性与慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)的相关性,以及CP对血清E选择素水平的影响。方法:采用病例-对照研究方法,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测CP患者和健康对照者的E-选择素第4外显子S128R的基因型和等位基因分布,同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CP患者和对照者血清E-selectin水平。结果:基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡。E-selectin基因型SS、SR频率在对照组与CP组分别为93.7%、6.3%和83.9%、16.1%,等位基因S、R频率在对照组和CP组分别为96.9%、3.1%和92.0%、7.97%。基因型频率和等位基因频率在CP组和对照组间的差异均有显著性(P<0.05),CP患者血清E-selectin水平显著高于对照组(P<0.01)。结论:E-选择素第4外显子S128R基因多态性与CP有相关性,R等位基因可能是CP患者易感性的遗传标志之一。CP患者血清E-selectin水平明显升高。 展开更多
关键词 E-选择素 慢性牙周炎 基因多态性
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脐带血血浆对包皮成纤维细胞生长影响的实验研究
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作者 丁妍 卢智勇 +4 位作者 袁雅红 梦淑艳 冯静波 李东升 曾毅 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第5期548-551,共4页
目的探讨人脐带血血浆(HUP)能否维持人包皮成纤维细胞(HFF)的生长。方法将脐血浆经盐析、透析等处理后,按10%体积成分培养HFF,并与同样浓度的胎牛血清(FBS)进行比较,观察细胞的贴壁速度、生长曲线、细胞周期及增殖能力。结果 HFF在含10%... 目的探讨人脐带血血浆(HUP)能否维持人包皮成纤维细胞(HFF)的生长。方法将脐血浆经盐析、透析等处理后,按10%体积成分培养HFF,并与同样浓度的胎牛血清(FBS)进行比较,观察细胞的贴壁速度、生长曲线、细胞周期及增殖能力。结果 HFF在含10%HUP的培养液中能长期生长,其生长生长形态、细胞增殖能力及特征都与在含同体积FBS的培养液中无显著差异。结论人HUP能维持HFF的长期生长。 展开更多
关键词 脐血 包皮成纤维细胞 胎牛血清
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督脉电针对脊髓损伤大鼠生长相关蛋白43表达的影响 被引量:10
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作者 李兵奎 曾彬 +5 位作者 常巍 王达义 杨琪 王晓勋 余连军 刘涛 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2014年第1期27-29,共3页
目的研究督脉电针对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白43(GAP-43)基因及蛋白表达的影响。方法利用多中心急性脊髓损伤打击器建立Sprague-Dawley大鼠T11脊髓损伤模型,造模成功后分为对照组(A组,n=18)和督脉电针组(B组,n=18)。造模后1周,B组接... 目的研究督脉电针对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白43(GAP-43)基因及蛋白表达的影响。方法利用多中心急性脊髓损伤打击器建立Sprague-Dawley大鼠T11脊髓损伤模型,造模成功后分为对照组(A组,n=18)和督脉电针组(B组,n=18)。造模后1周,B组接受督脉电针治疗每天1次。两组大鼠于造模后1、2、4、8周行BBB后肢运动功能评分;造模后2、4、8周,采用RT-PCR检测GAP-43 mRNA表达,采用免疫组化染色检测GAP-43蛋白表达。结果造模后,与A组比较,B组BBB评分明显升高(P<0.01),GAP-43 mRNA相对表达量明显升高(P<0.01),GAP-43蛋白阳性表达明显增强(P<0.01)。结论督脉电针可促进脊髓损伤大鼠GAP-43表达。 展开更多
关键词 脊髓损伤 督脉电针 生长相关蛋白43
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STAT3介导了血小板源性生长因子BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞Pim-1表达 被引量:5
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作者 孙晓东 王燕 +1 位作者 王汉琴 黄铁柱 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期804-809,共6页
目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达Pim-1及Pim-1对VSMCs增殖的影响,探讨STAT3信号分子在这一过程中的作用,为血管重建性疾病(VRD)的研究提供实验依据。方法:不同浓度PDGF-BB作用不同时... 目的:观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达Pim-1及Pim-1对VSMCs增殖的影响,探讨STAT3信号分子在这一过程中的作用,为血管重建性疾病(VRD)的研究提供实验依据。方法:不同浓度PDGF-BB作用不同时间刺激体外培养的VSMCs,用细胞计数法检测增殖;用re-al-time RT-PCR检测Pim-1 mRNA表达水平;Western blotting检测STAT3的活性变化;用放线菌素D(actinomycinD)、AG490(JAK特异性抑制剂)及siRNA沉默Pim-1和STAT3进行干预。结果:PDGF-BB(20μg/L)作用VSMCs24 h,可以诱导细胞增殖,Pim-1沉默抑制了这一过程;正常未经处理的VSMCs Pim-1 mRNA表达量较低,不同浓度PDGF-BB(10μg/L~50μg/L)作用VSMCs 1 h,Pim-1 mRNA表达明显增加,其中以20μg/L最显著;用PDGF-BB(20μg/L)作用VSMCs不同时间(0.5 h~4 h),可显著上调Pim-1 mRNA表达,以0.5 h最显著。用actinomycin D及AG490预处理后Pim-1 mRNA表达随之降低。PDGF-BB可激活VSMCs中磷酸化STAT3水平,AG490和转染STAT3-siRNA可抑制STAT3的磷酸化以及相应的Pim-1 mRNA表达。结论:PDGF-BB可通过Pim-1调节VSMCs增殖;STAT3可能参与了PDGF-BB诱导的VSMCs Pim-1表达。 展开更多
关键词 Pim-1蛋白 STAT3转录因子 血管平滑肌细胞 RNA干扰 血小板源性生长因子BB
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小鼠IL-2基因的RT-PCR克隆 被引量:1
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作者 唐微 景冬梅 +3 位作者 董兰 李莉 王娜 曾海 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第14期3367-3369,共3页
根据GenBank中小鼠的IL-2 cDNA序列设计引物,从小鼠肝脏组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出小鼠的IL-2基因。结果表明,克隆出了IL-2基因,获得了与预期大小相一致的850 bp的DNA片段,为研究其组成、结构和利用基因工程生产该药物打下... 根据GenBank中小鼠的IL-2 cDNA序列设计引物,从小鼠肝脏组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出小鼠的IL-2基因。结果表明,克隆出了IL-2基因,获得了与预期大小相一致的850 bp的DNA片段,为研究其组成、结构和利用基因工程生产该药物打下基础。 展开更多
关键词 小鼠 白细胞介素2(IL-2)基因 反转录
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利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株
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作者 王小莉 余庆 +3 位作者 袁雅红 腾智平 李东升 曾毅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期53-57,共5页
利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株,为进一步研究TRIM5α基因的功能奠定基础。构建针对TRIM5α打靶基因的TALEN,通过点突变的方法获得包含TRIM5α第7个外显子中打靶位点1 211-1 224的基因序列并构建点突变donor载体。将打靶... 利用TALEN技术建立恒河猴TRIM5α基因突变细胞株,为进一步研究TRIM5α基因的功能奠定基础。构建针对TRIM5α打靶基因的TALEN,通过点突变的方法获得包含TRIM5α第7个外显子中打靶位点1 211-1 224的基因序列并构建点突变donor载体。将打靶TRIM5α基因的TALEN质粒和donor质粒电转入恒河猴肾细胞(LLC-MK2)中,无限稀释法获得单克隆细胞系,通过抽提基因组DNA,再利用PCR技术扩增目标序列并测序筛选出TRIM5α碱基缺失(1 215-1 216)和点突变(1 213-1 215,1 217)的细胞系。通过共转TALEN质粒和点突变的donor质粒筛选获得了TRIM5α基因敲除和TRIM5α基因点突变的LLC-MK2细胞系。 展开更多
关键词 TRIM5α TALEN 恒河猴 点突变
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ATG5介导内皮细胞外泌体调控平滑肌细胞增殖 被引量:1
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作者 李征远 胡培 +2 位作者 周琳 单勐也 郭兴荣 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第11期1718-1724,共7页
目的探究ATG5介导人脐静脉内皮细胞外泌体对小鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法利用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注消化法获得原代人脐静脉内皮细胞;利用组织块贴壁法分离原代小鼠胸主动脉平滑肌细胞;利用超速离心法提取内皮细胞外泌体;利用... 目的探究ATG5介导人脐静脉内皮细胞外泌体对小鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法利用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注消化法获得原代人脐静脉内皮细胞;利用组织块贴壁法分离原代小鼠胸主动脉平滑肌细胞;利用超速离心法提取内皮细胞外泌体;利用共聚焦高内涵成像分析仪示踪平滑肌细胞摄取内皮细胞外泌体;利用siRNA干扰内皮细胞ATG5蛋白表达;利用高内涵DPC成像模式分析平滑肌细胞增殖能力。结果成功得到活性好、纯度高的人脐静脉内皮细胞和小鼠胸主动脉平滑肌细胞。超速离心法获得的内皮细胞外泌体经免疫印迹鉴定,呈Hsp70、TSG101、CD9和CD63阳性。高内涵示踪结果显示平滑肌细胞在共培养30 min后开始摄取内皮细胞外泌体,共培养4 h后,平滑肌细胞摄取的外泌体明显增多。高内涵监测结果显示,与对照组比较,ATG5干扰组内皮细胞分泌的外泌体在浓度为200μg/ml时能够明显抑制平滑肌细胞的增殖。结论ATG5可通过介导内皮细胞外泌体调控平滑肌细胞增殖。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 小鼠胸主动脉平滑肌细胞 外泌体 ATG5
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