目的:观察微小核糖核酸-134-5p(mi R-134-5p)转染对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响,验证其可能的分子机制。方法:收集湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心2016年5月至8月收治的8名宫颈癌患者肿瘤组织和相应癌旁组织。利用lipofectamine 2000...目的:观察微小核糖核酸-134-5p(mi R-134-5p)转染对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响,验证其可能的分子机制。方法:收集湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心2016年5月至8月收治的8名宫颈癌患者肿瘤组织和相应癌旁组织。利用lipofectamine 2000将mi R-134-5p mimics转染至宫颈癌Hela和Si Ha细胞。采用MTT法和集落形成实验检测细胞增殖活性;流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡;q RT-PCR检测宫颈癌组织和细胞mi R-134-5p m RNA表达以及宫颈癌细胞EGFR m RNA表达;Western blotting检测宫颈癌细胞EGFR信号通路相关蛋白的表达。结果:宫颈癌组织mi R-134-5p m RNA表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。和转染mi R-NC的Hela和Si Ha细胞比较,转染mi R-134-5pmimics的宫颈癌Hela和Si Ha细胞mi R-134-5p m RNA表达显著升高;细胞增殖能力显著降低(转染第5天,Hela细胞:1.06±0.13 vs 1.32±0.07;Si Ha细胞:1.12±0.10 vs 1.42±0.12,均P<0.05);形成的集落数减少;G0/G1期细胞比例显著上升,S期和G2/M期细胞比例显著下降;细胞凋亡率显著增加[Hela细胞:(26.53±13.48)%vs(3.25±1.74)%;Si Ha细胞:(30.49±12.04)%vs(5.10±2.86)%,均P<0.05];EGFR m RNA和EGFR蛋白表达显著下调,其中EGFR m RNA,Hela细胞下调58%(P<0.01),Si Ha细胞下调41%(P<0.05);EGFR下游靶蛋白p-AKT、p-ERK1/2和Cyclin D1蛋白及p EGFR蛋白表达显著下调。结论:mi R-134-5p可显著抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,其可能的分子机制是通过抑制EGFR基因的表达,抑制EGFR通路的活化。展开更多
文摘目的:观察微小核糖核酸-134-5p(mi R-134-5p)转染对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响,验证其可能的分子机制。方法:收集湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心2016年5月至8月收治的8名宫颈癌患者肿瘤组织和相应癌旁组织。利用lipofectamine 2000将mi R-134-5p mimics转染至宫颈癌Hela和Si Ha细胞。采用MTT法和集落形成实验检测细胞增殖活性;流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡;q RT-PCR检测宫颈癌组织和细胞mi R-134-5p m RNA表达以及宫颈癌细胞EGFR m RNA表达;Western blotting检测宫颈癌细胞EGFR信号通路相关蛋白的表达。结果:宫颈癌组织mi R-134-5p m RNA表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。和转染mi R-NC的Hela和Si Ha细胞比较,转染mi R-134-5pmimics的宫颈癌Hela和Si Ha细胞mi R-134-5p m RNA表达显著升高;细胞增殖能力显著降低(转染第5天,Hela细胞:1.06±0.13 vs 1.32±0.07;Si Ha细胞:1.12±0.10 vs 1.42±0.12,均P<0.05);形成的集落数减少;G0/G1期细胞比例显著上升,S期和G2/M期细胞比例显著下降;细胞凋亡率显著增加[Hela细胞:(26.53±13.48)%vs(3.25±1.74)%;Si Ha细胞:(30.49±12.04)%vs(5.10±2.86)%,均P<0.05];EGFR m RNA和EGFR蛋白表达显著下调,其中EGFR m RNA,Hela细胞下调58%(P<0.01),Si Ha细胞下调41%(P<0.05);EGFR下游靶蛋白p-AKT、p-ERK1/2和Cyclin D1蛋白及p EGFR蛋白表达显著下调。结论:mi R-134-5p可显著抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,其可能的分子机制是通过抑制EGFR基因的表达,抑制EGFR通路的活化。
