目的研究血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]对糖脂毒性(GLT)孵育的小鼠胰岛素瘤细胞系MIN6β细胞自噬及磷酸化Akt(p-Akt)表达的影响。方法将细胞分为四组:(1)对照组(CON)(2)高糖高脂组(HGHF)(3)Ang(1-7)干预组(4)A779干预组,细胞接种于含15%胎...目的研究血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]对糖脂毒性(GLT)孵育的小鼠胰岛素瘤细胞系MIN6β细胞自噬及磷酸化Akt(p-Akt)表达的影响。方法将细胞分为四组:(1)对照组(CON)(2)高糖高脂组(HGHF)(3)Ang(1-7)干预组(4)A779干预组,细胞接种于含15%胎牛血清及1%链-青霉素溶液的高糖DMEM培养基,置于饱和湿度、37℃、5%CO2培养箱中培养,按上述分组处理后干预12 h。Western-Blot检测自噬相关蛋白Beclin 1和p62以及p-Akt的表达,DAPI染色荧光显微镜下观察细胞凋亡,Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测MIN6细胞的凋亡率。结果与CON相比,HGHF组p62及Beclin1蛋白的表达水平均明显增加(p62:1.79±0.57 vs. 1.0,P=0.024;Beclin1:1.53±0.06 vs. 1.0,P=0.000),p-Akt的表达显著降低(0.38±0.06 vs. 1.0,P=0.000),凋亡率明显升高(48.37±8.99 vs. 4.80±0.30,P=0.000);与HGHF相比,Ang(1-7)干预组p62及Beclin1的表达均下降(p62:0.85±0.12 vs. 1.79±0.57,P=0.011;Beclin1:0.90±0.16 vs. 1.53±0.06,P=0.000),p-Akt的表达升高(0.66±0.07 vs. 0.38±0.06,P=0.001),凋亡率下降(20.63±6.35 vs. 48.37±8.99,P=0.001);与Ang(1-7)干预组相比,A779干预组p62及Beclin的表达均增加(p62:1.55±0.38 vs. 0.85±0.12,P=0.002;Beclin1:1.28±0.09 vs. 0.90±0.16,P=0.039),p-Akt的表达降低(0.41±0.10 vs. 0.66±0.07,P=0.003),凋亡率明显升高(33.43±6.15 vs. 20.63±6.35,P=0.038)。结论 GLT通过减少p-Akt的表达诱导胰岛β细胞自噬和凋亡,Ang(1-7)可介导Akt活化抑制GLT诱导的β细胞自噬,减少GLT诱导的β细胞凋亡。展开更多
文摘目的研究血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]对糖脂毒性(GLT)孵育的小鼠胰岛素瘤细胞系MIN6β细胞自噬及磷酸化Akt(p-Akt)表达的影响。方法将细胞分为四组:(1)对照组(CON)(2)高糖高脂组(HGHF)(3)Ang(1-7)干预组(4)A779干预组,细胞接种于含15%胎牛血清及1%链-青霉素溶液的高糖DMEM培养基,置于饱和湿度、37℃、5%CO2培养箱中培养,按上述分组处理后干预12 h。Western-Blot检测自噬相关蛋白Beclin 1和p62以及p-Akt的表达,DAPI染色荧光显微镜下观察细胞凋亡,Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测MIN6细胞的凋亡率。结果与CON相比,HGHF组p62及Beclin1蛋白的表达水平均明显增加(p62:1.79±0.57 vs. 1.0,P=0.024;Beclin1:1.53±0.06 vs. 1.0,P=0.000),p-Akt的表达显著降低(0.38±0.06 vs. 1.0,P=0.000),凋亡率明显升高(48.37±8.99 vs. 4.80±0.30,P=0.000);与HGHF相比,Ang(1-7)干预组p62及Beclin1的表达均下降(p62:0.85±0.12 vs. 1.79±0.57,P=0.011;Beclin1:0.90±0.16 vs. 1.53±0.06,P=0.000),p-Akt的表达升高(0.66±0.07 vs. 0.38±0.06,P=0.001),凋亡率下降(20.63±6.35 vs. 48.37±8.99,P=0.001);与Ang(1-7)干预组相比,A779干预组p62及Beclin的表达均增加(p62:1.55±0.38 vs. 0.85±0.12,P=0.002;Beclin1:1.28±0.09 vs. 0.90±0.16,P=0.039),p-Akt的表达降低(0.41±0.10 vs. 0.66±0.07,P=0.003),凋亡率明显升高(33.43±6.15 vs. 20.63±6.35,P=0.038)。结论 GLT通过减少p-Akt的表达诱导胰岛β细胞自噬和凋亡,Ang(1-7)可介导Akt活化抑制GLT诱导的β细胞自噬,减少GLT诱导的β细胞凋亡。
