基于ImageJ的药用植物黄精染色体核型分析

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作者 游磊 朱哲慧 +3 位作者 石宪铭 张泽志 郑兰兰 张勇洪 《湖北农业科学》 2025年第4期24-30,共7页

以药用植物黄精(Polygonatum sibiricum)为例,建立基于开源的图像处理软件ImageJ的植物染色体核型分析方法和工作流程。打开ImageJ软件并加载Stowers插件包和LEVAN插件,将已获取的黄精中期染色体显微图像经过图片预处理、染色体轮廓选... 以药用植物黄精(Polygonatum sibiricum)为例,建立基于开源的图像处理软件ImageJ的植物染色体核型分析方法和工作流程。打开ImageJ软件并加载Stowers插件包和LEVAN插件,将已获取的黄精中期染色体显微图像经过图片预处理、染色体轮廓选定、染色体轮廓分割及去杂、染色体裁切等步骤后,获取染色体形态数据。使用Photoshop软件进行核型图排布,使用Excel软件绘制核型模式图。结果表明,依据Levan核型分类标准,黄精染色体核型公式为2n=24=4m+10sm+10st,核型不对称系数为72.11%,核型属于3B型。该方法提出了针对核型图像中染色体接触或重叠的解决策略,具有开源免费、操作流程清晰、交互准确的优点。 展开更多

关键词 黄精(Polygonatum sibiricum) IMAGEJ 药用植物 染色体 核型分析

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重楼皂苷G通过CIP2A/PP2A信号通路抑制淋巴瘤细胞生长并促进凋亡及自噬的机制研究 被引量：5

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作者 刘雪文 向雨晨 +3 位作者 刘洋洋 司渊 刘莹 郭阳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1767-1772,共6页

为探究一种从延龄草(Trillium tschonoskii Maxim)中提取的活性化合物polyphyllin G(PPG)在人淋巴瘤细胞中的抑制作用及机制,采用CCK-8和细胞计数测定法检测增殖抑制作用,通过流式细胞术和蛋白印迹检测细胞凋亡、自噬及上游机制。结果显... 为探究一种从延龄草(Trillium tschonoskii Maxim)中提取的活性化合物polyphyllin G(PPG)在人淋巴瘤细胞中的抑制作用及机制,采用CCK-8和细胞计数测定法检测增殖抑制作用,通过流式细胞术和蛋白印迹检测细胞凋亡、自噬及上游机制。结果显示,PPG在Raji淋巴瘤细胞系中抑制生长并促进凋亡及自噬。PPG显著下调蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)的表达。PPG增加了CIP2A下游分子蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)的活性,并进而降低了Akt的磷酸化。进一步,PP2A抑制剂冈田酸能够拮抗PPG对细胞增殖的抑制作用及对凋亡、自噬的诱导作用,表明PP2A是PPG通过下调CIP2A诱导细胞凋亡及自噬的关键环节。总之,以上结果表明,PPG可能通过抑制CIP2A/PP2A/Akt信号通路抑制淋巴瘤细胞生长并促进凋亡及自噬。PPG有望成为治疗淋巴瘤的潜在抗癌药物。 展开更多

关键词 淋巴瘤 polyphyllin G CIP2A 凋亡 自噬

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TRPV4原核表达纯化系统的构建及生物信息学分析

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作者 李征远 徐恋恋 +2 位作者 孙建云 郑晓晖 高小康 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第3期137-144,共8页

目的:构建非选择性阳离子通道蛋白TRPV4的原核表达纯化系统,并对其进行生物信息学分析,为与该目标蛋白相关疾病的研究和药物活性成分筛选提供技术支持。方法:将人源TRPV4基因分别克隆至pET-28a(+)、pET-32a、pET-15b、pGEX-5X-1、pEX-4T... 目的:构建非选择性阳离子通道蛋白TRPV4的原核表达纯化系统,并对其进行生物信息学分析,为与该目标蛋白相关疾病的研究和药物活性成分筛选提供技术支持。方法:将人源TRPV4基因分别克隆至pET-28a(+)、pET-32a、pET-15b、pGEX-5X-1、pEX-4T和pGEX-6p-1等6种表达载体,并利用BL21和Rossetta两种大肠杆菌表达宿主构建TRPV4原核表达系统。采用谷胱甘肽亲和层析和镍柱亲和层析法分离纯化目标蛋白。通过生物信息学技术对目标蛋白进行分析,获得其相应的理化性质和结构参数。结果:利用pGEX-6p-1载体和Rossetta构建了GST-TRPV4和GST-TRPV4-6his融合蛋白原核表达系统。诱导表达目标蛋白的IPTG浓度为0.6 mmol/L时,GSTTRPV4融合蛋白有明显表达,IPTG浓度为0.4 mmol/L时,GST-TRPV4-6his融合蛋白有明显表达,表达温度均为18℃。纯化GST-TRPV4-6his融合蛋白时,咪唑溶液在100 mmol/L或200 mmol/L时可以得到完整的GSTTRPV4-6his融合蛋白。结论:本文首次在原核表达系统中成功构建和表达纯化了人源TRPV4离子通道蛋白,并利用生物信息学分析解析了该蛋白的理化性质,为后续高纯度大量表达和进一步研究奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 TRPV4 离子通道蛋白 原核表达 pGEX-6p-1载体 大肠杆菌 生物信息学

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肺炎克雷伯菌CRP蛋白表达与纯化及生物学特征分析 被引量：1

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作者 徐丽 邱雪梅 +3 位作者 骆海龙 杨靖 李蓓 汪静杰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第4期98-102,127,共6页

目的:原核表达获得肺炎克雷伯菌KP1_RS23625基因(crp)编码的CRP蛋白,并解析CRP蛋白具体的生物学功能。方法:首先克隆肺炎克雷伯菌crp基因,并亚克隆至pET-28a(+)质粒构建重组蛋白表达载体;然后体外原核诱导表达、纯化目的蛋白并进行SDS-P... 目的:原核表达获得肺炎克雷伯菌KP1_RS23625基因(crp)编码的CRP蛋白,并解析CRP蛋白具体的生物学功能。方法:首先克隆肺炎克雷伯菌crp基因,并亚克隆至pET-28a(+)质粒构建重组蛋白表达载体;然后体外原核诱导表达、纯化目的蛋白并进行SDS-PAGE电泳分析。进一步通过生物学信息方法分析CRP蛋白的生物学功能:利用ProtParam、Protscale、SignalP4.1 Service、TMHMM Server v.2.0、SOPMA、SWISS-MODEL软件分别分析目的蛋白理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区域、二级与三级结构等一般生物学特征;并借助CDD数据库、Net Phos 3.1 Sever在线软件预测蛋白的功能结构域、磷酸化位点等功能特征;进一步利用ATRING 11.0交互式数据库进行蛋白质交联互作分析。结果:成功构建了重组目的蛋白表达载体pET-28a-crp,并通过原核诱导表达与镍柱亲和吸附法表达、纯化获得CRP目的蛋白;蛋白电泳结果显示CRP蛋白为水溶性蛋白,包括标签蛋白(约4 kDa)的重组目的蛋白分子质量约27 kDa。对CRP蛋白的生物信息学分析结果显示:CRP蛋白大小23.65 kDa、为亲水性蛋白;无跨膜结构域、无信号肽;蛋白二级结构主要由α螺旋与不规则卷曲构成,其中α-螺旋占比40%以上,结构较松散;同时成功构建了三级结构模型;CRP蛋白结构域分析表明含有1个功能结构域,属PRK11753超级家族;修饰位点及蛋白注释分析显示目的蛋白含20个磷酸化位点,与多个蛋白具有交互作用。结论:本研究利用基因工程方法成功获得了较高纯度肺炎克雷伯菌CRP蛋白,并通过生物信息学手段解析了其生物学特征,为肺炎克雷伯菌感染的临床治疗提供理论基础。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 CRP蛋白 转录因子 原核表达 生物信息学

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肺炎克雷伯菌对H2O2氧化胁迫的响应机制研究

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作者 邱雪梅 徐丽 +4 位作者 骆海龙 袁杰 杨靖 李蓓 汪静杰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第21期99-104,共6页

目的:研究宿主肠道氧化条件对肺炎克雷伯菌的影响及该菌响应氧化胁迫的机制。方法:通过体外模拟肠道氧化条件,将肺炎克雷伯菌接种在含不同浓度梯度H_2O_2的液体培养基中进行氧化胁迫处理;测定细菌的生长曲线、检测细菌的关键毒力因子-... 目的:研究宿主肠道氧化条件对肺炎克雷伯菌的影响及该菌响应氧化胁迫的机制。方法:通过体外模拟肠道氧化条件,将肺炎克雷伯菌接种在含不同浓度梯度H_2O_2的液体培养基中进行氧化胁迫处理;测定细菌的生长曲线、检测细菌的关键毒力因子-荚膜与生物膜的生成量。并进一步地利用qRT-PCR荧光定量分析荚膜与生物膜表型相关基因的表达差异。结果:在氧化因子胁迫下,当处于较低浓度范围(<1.56 mmol/L)时,肺炎克雷伯菌早期生长受到抑制作用,中后期逐渐适应胁迫、其生长未受明显影响。此外,肺炎克雷伯菌在氧化胁迫条件下荚膜生成量明显降低,呈剂量依赖效应;但在一定浓度范围氧化因子作用下,其生物膜的形成量增加。分子检测表明荚膜结构基因magA表达量明显下调,生物膜相关基因YbaJ出现显著的上调表达。结论:肺炎克雷伯菌通过上调YbaJ基因的表达促进毒力因子生物膜形成以此响应氧化因子胁迫,本研究可为食源性肺炎克雷伯菌与宿主肠道因子互作及致病机制研究提供新思路。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 氧化 胁迫 生物膜 荚膜 毒力因子

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抗坏血酸-磷酸溶液超声提取-高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法快速测定土壤中6种砷形态的含量 被引量：2

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作者 杨丽婷 隆星星 +2 位作者 王艳萍 郭怀兰 张垚 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期770-774,共5页

为解决高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(HPLC-ICP-MS)测定土壤中6种砷形态含量时色谱分离时间长以及亚砷酸根[As(Ⅲ)]易转化成砷酸根[As(Ⅴ)]的问题,进行了题示研究。在0.1 g土壤样品中添加体积比1∶1的1.6 mol·L^(-1)磷酸溶... 为解决高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(HPLC-ICP-MS)测定土壤中6种砷形态含量时色谱分离时间长以及亚砷酸根[As(Ⅲ)]易转化成砷酸根[As(Ⅴ)]的问题,进行了题示研究。在0.1 g土壤样品中添加体积比1∶1的1.6 mol·L^(-1)磷酸溶液和0.5 mol·L^(-1)抗坏血酸溶液的混合溶液10 mL,常温下超声提取6 h,用水稀释至50 mL,经0.22μm聚醚砜膜过滤,用HPLC-ICP-MS测定滤液中砷甜菜碱(AsB)、As(Ⅲ)、二甲基砷(DMA)、砷胆碱(AsC)、一甲基砷(MMA)和As(Ⅴ)等6种砷形态的含量。在色谱分析中,以Dionex IonPac AG7色谱柱(50 mm×4 mm,10μm)为分析柱和保护柱,不同体积比的3.5 mmol·L^(-1)碳酸铵溶液和100 mmol·L^(-1)碳酸铵溶液的混合溶液为流动相进行梯度洗脱。结果显示:6种砷形态的质量浓度均在一定范围内和峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.010~0.050μg·L^(-1);按照标准加入法进行回收试验,回收率为92.0%~110%,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于5.0%。方法用于6个实际土壤样品的分析,检出了As(Ⅲ)和As(Ⅴ),检出量分别为0.07~0.15μg·g^(-1)和3.44~8.61μg·g^(-1)。 展开更多

关键词 抗坏血酸 高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 砷 形态分析 土壤

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HPLC-MS/MS指纹图谱模式识别结合化学计量学对文王一支笔特征标志物的差异分析 被引量：1

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作者 殷莉 张彦波 +3 位作者 郑金红 程刚 李征远 陈桂林 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期499-508,共10页

文王一支笔为蛇菰科植物筒鞘蛇菰(Balanophora involucrate Hook.f.)的干燥全草,是鄂西地区特色民族珍稀药材。本研究首先利用HPLC-MS/MS技术建立了鄂西十堰地区5个产地10个批次文王一支笔的根茎、花茎和花序3个部位的化学指纹图谱,标... 文王一支笔为蛇菰科植物筒鞘蛇菰(Balanophora involucrate Hook.f.)的干燥全草,是鄂西地区特色民族珍稀药材。本研究首先利用HPLC-MS/MS技术建立了鄂西十堰地区5个产地10个批次文王一支笔的根茎、花茎和花序3个部位的化学指纹图谱,标定了其中29个共有峰,并推断了27个色谱峰的化学结构,包括13个酚酸类和8个黄酮类成分。聚类分析(CA)及主成分分析(PCA)结果显示,文王一支笔地下(根茎)与地上(花茎、花序)部位化学成分差异较大,花茎与花序间化学成分差异较小。正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)中VIP值分析结果表明,峰12、8、2、3、17、21、9和22是引起文王一支笔不同药用部位化学成分差异的潜在标志性成分(Q-marker),可作为其质量控制的依据。 展开更多

关键词 文王一支笔 HPLC-MS/MS 指纹图谱 化学计量学 特征标志物 质量评价

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Micro-CT在实验动物疾病模型中的应用 被引量：2

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作者 李淑桢 戴文敬 +3 位作者 喻青青 田苗 张潜 李蓓 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期676-682,共7页

微计算机断层扫描技术(micro-computed tomography, Micro-CT)作为一种无创性技术手段,在动物实验中应用广泛,可用于辅助检测多种动物疾病模型,包括骨骼疾病、肺部疾病、口腔疾病、代谢性疾病、中耳及内耳疾病以及肿瘤等,能够提供多样... 微计算机断层扫描技术(micro-computed tomography, Micro-CT)作为一种无创性技术手段,在动物实验中应用广泛,可用于辅助检测多种动物疾病模型,包括骨骼疾病、肺部疾病、口腔疾病、代谢性疾病、中耳及内耳疾病以及肿瘤等,能够提供多样性、科学性和可靠性的影像数据,因此已经成为动物实验中必不可少的实验工具之一。本综述将深入介绍Micro-CT的成像原理、梳理其在动物疾病模型研究中的应用,并总结了Micro-CT技术上的局限性并对未来的前景进行展望。 展开更多

关键词 MICRO-CT 实验动物 疾病模型 应用 技术短板

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α-常春藤皂苷通过激活和稳定p53/Noxa信号诱导肝癌细胞凋亡

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作者 陈晓静 周莉 +4 位作者 刘凯琪 段菊凤 刘明 李洪亮 汪选斌 《医药导报》 CAS 北大核心 2024年第3期334-345,共12页

目的研究预知子活性成分α-常春藤皂苷对肝癌细胞的体内外抑制作用及其机制。方法将肝癌细胞分为4组,分别给予0、10、20和30μmol·L^(-1)α-常春藤皂苷至24、48 h。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡率,转录组学筛选α... 目的研究预知子活性成分α-常春藤皂苷对肝癌细胞的体内外抑制作用及其机制。方法将肝癌细胞分为4组,分别给予0、10、20和30μmol·L^(-1)α-常春藤皂苷至24、48 h。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡率,转录组学筛选α-常春藤皂苷作用的信号通路,核糖核酸(RNA)干扰、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹检测信号通路和凋亡通路信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达,体内移植瘤试验验证α-常春藤皂苷体内对肝癌细胞生长的抑制作用。结果α-常春藤皂苷通过激活腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9(Caspase9)和Caspase3诱导肝癌细胞凋亡。转录组学、qRT-PCR和蛋白免疫印迹检测发现α-常春藤皂苷上调了p53和Noxa的表达,并抑制p53和Noxa蛋白的降解,α-常春藤皂苷还能逆转p53/Noxa敲低所致的凋亡减少。动物实验结果表明,α-常春藤皂苷可抑制肝癌细胞移植瘤的增殖。结论α-常春藤皂苷可通过激活和稳定p53/Noxa信号诱导肝癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 α-常春藤皂苷 肝细胞癌 凋亡 P53 NOXA

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根皮素通过抑制FAK改善肾小管间质纤维化

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作者 程新瑶 曹文洁 +5 位作者 钱永帅 刘丽 余惠凡 王晓菲 方梦淇 李飞 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期181-189,共9页

目的探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞... 目的探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞及小鼠肾脏组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平,明确根皮素体内外抗肾纤维化作用;检测实验小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,分析根皮素的肾保护作用;以苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察根皮素对UUO小鼠肾脏病理学改变和胶原纤维沉积的影响;Western blot检测TGF-β1诱导的NRK-52E细胞和UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK的蛋白表达水平;通过分子对接预测根皮素与FAK蛋白的潜在结合模式和结合能力;使用FAK抑制剂PND-1186,探究根皮素改善肾间质纤维化的作用机制。结果根皮素可逆转TGF-β1所致的肾小管上皮细胞及UUO小鼠肾组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平升高,且显著降低UUO小鼠血清中Cr、BUN水平,改善UUO小鼠肾小管扩张、炎性细胞浸润及间质胶原沉积;根皮素可以显著抑制UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK蛋白的表达水平,分子对接提示根皮素与FAK蛋白之间具有良好相互作用。根皮素与PND-1186均可改善TGF-β1诱导的NRK-52E细胞纤维化。结论根皮素通过抑制FAK信号通路在体内外发挥抗肾间质纤维化作用。 展开更多

关键词 根皮素 单侧输尿管梗阻 肾保护 肾间质纤维化 黏着斑激酶

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CaMK4对狼疮性肾炎患者外周血中γδT细胞功能的影响

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作者 王钟毓 王洋彬 +3 位作者 雷飞飞 李刚 郗雪艳 李方舟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2158-2162,共5页

目的:本文探讨钙/钙调素依赖性蛋白激酶(CaMK4)对LN患者外周血中γδT细胞功能的影响。方法:流式细胞术比较LN患者及健康对照组外周血中γδT细胞的比例,磁珠分选LN患者和健康对照组外周血中的γδT细胞,RNA-SEQ分析两组中γδT细胞的... 目的:本文探讨钙/钙调素依赖性蛋白激酶(CaMK4)对LN患者外周血中γδT细胞功能的影响。方法:流式细胞术比较LN患者及健康对照组外周血中γδT细胞的比例,磁珠分选LN患者和健康对照组外周血中的γδT细胞,RNA-SEQ分析两组中γδT细胞的差异基因。Real-time PCR和Western blot验证差异基因CaMK4的表达水平,流式细胞术检测CaMK4抑制剂处理后γδT细胞表面CD80,CD86和CD40L的表达水平,ELISA检测CaMK4抑制剂处理后γδT细胞分泌IL-17的水平。结果:LN患者外周血中γδT细胞的比例低于健康对照组(P<0.05)。RNA-SEQ测序共筛选出28个与LN有关的差异基因,其中CaMK4在LN患者和健康对照者间差异显著。LN患者外周血中γδT细胞经过CaMK4阻断剂KN-93处理后,表面共刺激分子CD80、CD86和CD40L的表达下降、分泌的IL-17水平也下降(P<0.01)。结论:CaMK4通过调控γδT细胞分泌IL-17和共刺激分子表达参与LN发病,抑制CaMK4或可成为治疗LN的新靶点。 展开更多

关键词 ΓΔT细胞 狼疮性肾炎 CaMK4 IL-17

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十堰市白菜黑斑病病原真菌的分离与鉴定

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作者 石宪铭 何亚慧 +5 位作者 胡燕萍 吴飞扬 彭晓璇 张勇洪 游磊 温毅华 《湖北农业科学》 2024年第10期59-63,共5页

对湖北省十堰市当地白菜(Brassica pekinensis)品种的黑斑病进行病原真菌鉴定和病害分析,并提出相应的预防措施。采用组织分离法从病叶中分离得到病原真菌,并利用rDNA ITS和Alt-α1基因序列比对进行分析鉴定。结果表明,发现1个新的链格... 对湖北省十堰市当地白菜(Brassica pekinensis)品种的黑斑病进行病原真菌鉴定和病害分析,并提出相应的预防措施。采用组织分离法从病叶中分离得到病原真菌,并利用rDNA ITS和Alt-α1基因序列比对进行分析鉴定。结果表明,发现1个新的链格孢属(Alternaria sp.)真菌,推测其是导致十堰市当地白菜黑斑病的致病真菌。此外,确认ITS序列和Alt-α1基因序列的联合分析,能够区分3种常见的链格孢属真菌Alternaria brassicicola、Alternaria japonica、Alternaria brassicae。 展开更多

关键词 白菜(Brassica pekinensis) rDNA ITS 黑斑病 病原真菌 分离与鉴定 湖北省十堰市

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三种七叶一枝花活性成分抗新型冠状病毒的分子对接预测 被引量：4

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作者 司渊 王纠 +2 位作者 张亮 刘雪文 刘莹 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1099-1103,共5页

以分子对接法探索中草药七叶一枝花治疗新型冠状病毒SARS-CoV-2的活性化合物。SARS-CoV-2主要通过其S蛋白与人体细胞表面的Angiotensin-converting enzyme 2(ACE2)受体结合。本研究通过分子对接模拟预测了七叶一枝花中富含的3种重楼皂苷... 以分子对接法探索中草药七叶一枝花治疗新型冠状病毒SARS-CoV-2的活性化合物。SARS-CoV-2主要通过其S蛋白与人体细胞表面的Angiotensin-converting enzyme 2(ACE2)受体结合。本研究通过分子对接模拟预测了七叶一枝花中富含的3种重楼皂苷(Ⅰ、Ⅵ、Ⅶ)与ACE2的结合亲和力。结果表明:三种重楼皂苷均能够与ACE2结合,结合自由能均低于-8 kcal/mol。三种化合物共同结合的氨基酸残基包括:Pro-346、Thr-347、Ala-348、Asp-350、Asn-394、His-401、Glu-402。三种药物结合以上位点的结构主要是共同的母核结构起着关键作用。另外,重楼皂苷Ⅰ与ACE2结合所需能量最低,而重楼皂苷Ⅵ与靶蛋白作用的关键氨基酸数量最多及形成的氢键数量最多。因此,基于这三种有效成分进行结构设计有望获得高效的SARS-CoV-2抑制剂,以期为COVID-19治疗药物发现提供研究基础。 展开更多

关键词 SARS-CoV-2 COVID-19 重楼皂苷 分子对接

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中性粒细胞胞外诱捕网在肾脏疾病中的作用 被引量：4

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作者 曹文洁 许毛 +3 位作者 余惠凡 刘丽 钱永帅 李飞 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期276-282,共7页

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是由激活的中性粒细胞形成,以DNA为骨架并镶嵌多种活性蛋白的细胞外网状结构,是除吞噬和脱颗粒作用外,中性粒细胞捕获和杀死病原体的一种新的作用机制。尽管NETs对机体有一... 中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是由激活的中性粒细胞形成,以DNA为骨架并镶嵌多种活性蛋白的细胞外网状结构,是除吞噬和脱颗粒作用外,中性粒细胞捕获和杀死病原体的一种新的作用机制。尽管NETs对机体有一定的保护作用,但过量NETs的形成会对组织造成损伤,被认为是引起多种疾病的潜在危险因素,成为疾病发病机制的研究热点。近年来研究发现,过量NETs的形成可促进自身免疫性肾病、肾缺血再灌注损伤及糖尿病肾病等常见肾脏疾病的进程,阐明NETs的作用及机制对肾脏疾病的诊断和治疗具有重要的临床意义。该文对NETs在肾脏疾病中的最新研究进展进行了总结,以期为肾脏疾病的诊疗提供新的思路。 展开更多

关键词 中性粒细胞胞外诱捕网 肾脏疾病 急性肾损伤 狼疮性肾炎

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线粒体活性对人类精子活动力的影响 被引量：2

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作者 张友旺 潘龙瑞 +3 位作者 刘俊 马开槐 张特 谭艳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期580-584,共5页

目的:分析线粒体活性对人类精子活动力的影响。方法:以线粒体特异性荧光染料--mitotracker deep red 633(MTDR对不同活力的精子进行染色,然后用流式细胞术测定精子线粒体活性(即MTDR荧光强度值)。用雷帕霉素(rapamycin,RP)和羟氯喹(hydr... 目的:分析线粒体活性对人类精子活动力的影响。方法:以线粒体特异性荧光染料--mitotracker deep red 633(MTDR对不同活力的精子进行染色,然后用流式细胞术测定精子线粒体活性(即MTDR荧光强度值)。用雷帕霉素(rapamycin,RP)和羟氯喹(hydroxychloroquineon,HCQ)调控精子活性水平,测定精子活动力的变化。结果:MTDR荧光强度值与前向运动速率(progressive motility,PR)不相关(r=0.182,P=0.268)。5 nmol/L和100 nmol/L的RP均可明显降低线粒体活性,50μmol/L HCQ可明显提高线粒体活性(P<0.05),但它们对精子活动力影响都不明显(P>0.05)。结论:线粒体活性对人类精子活力影响不明显。 展开更多

关键词 mitotracker deep red 633 线粒体 精子 活动力

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五汁饮对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用 被引量：1

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作者 高金星 余惠凡 +1 位作者 覃彬华 张昌文 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第16期331-335,共5页

目的:探讨五汁饮(Wuzhiyin,WZY)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,AP)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将小鼠随机分为空白组,模型组及五汁饮低、中、高剂量组,灌胃给药100、200、400 mg/kg,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水。通过计算... 目的:探讨五汁饮(Wuzhiyin,WZY)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,AP)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将小鼠随机分为空白组,模型组及五汁饮低、中、高剂量组,灌胃给药100、200、400 mg/kg,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水。通过计算脏器指数,检测血清中的ALT、AST及肝组织匀浆中的MDA、GSH、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,结合肝组织切片来观察病理学变化。结果:五汁饮低、中、高剂量组小鼠肝脏指数较模型组降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,五汁饮中、高剂量明显抑制血清中的AST、ALT活力(P<0.05或P<0.01),显著性降低TNF-α、IL-6、IL-1β的水平(P<0.05或P<0.01),使肝组织匀浆中MDA水平降低,同时缓解肝组织匀浆中GSH水平的升高;组织病理学HE和Tunel染色显示五汁饮可改善肝组织的坏死与凋亡,并减轻细胞炎性浸润。结论:五汁饮对对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用、减少炎症反应及抑制细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 五汁饮 对乙酰氨基酚 肝损伤 凋亡

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ATG5介导内皮细胞外泌体调控平滑肌细胞增殖 被引量：1

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作者 李征远 胡培 +2 位作者 周琳 单勐也 郭兴荣 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第11期1718-1724,共7页

目的探究ATG5介导人脐静脉内皮细胞外泌体对小鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法利用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注消化法获得原代人脐静脉内皮细胞;利用组织块贴壁法分离原代小鼠胸主动脉平滑肌细胞;利用超速离心法提取内皮细胞外泌体;利用... 目的探究ATG5介导人脐静脉内皮细胞外泌体对小鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法利用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注消化法获得原代人脐静脉内皮细胞;利用组织块贴壁法分离原代小鼠胸主动脉平滑肌细胞;利用超速离心法提取内皮细胞外泌体;利用共聚焦高内涵成像分析仪示踪平滑肌细胞摄取内皮细胞外泌体;利用siRNA干扰内皮细胞ATG5蛋白表达;利用高内涵DPC成像模式分析平滑肌细胞增殖能力。结果成功得到活性好、纯度高的人脐静脉内皮细胞和小鼠胸主动脉平滑肌细胞。超速离心法获得的内皮细胞外泌体经免疫印迹鉴定,呈Hsp70、TSG101、CD9和CD63阳性。高内涵示踪结果显示平滑肌细胞在共培养30 min后开始摄取内皮细胞外泌体,共培养4 h后,平滑肌细胞摄取的外泌体明显增多。高内涵监测结果显示,与对照组比较,ATG5干扰组内皮细胞分泌的外泌体在浓度为200μg/ml时能够明显抑制平滑肌细胞的增殖。结论ATG5可通过介导内皮细胞外泌体调控平滑肌细胞增殖。 展开更多

关键词 人脐静脉内皮细胞 小鼠胸主动脉平滑肌细胞 外泌体 ATG5

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