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自噬对宫颈癌细胞干性及增殖能力的影响
被引量：
3
1
作者
杨毅
丁妍
+1 位作者
于爱清
严世荣
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017年第11期1390-1394,共5页
目的:研究自噬对宫颈癌细胞干性及增殖能力的影响。方法:采用悬浮培养法分离HeLa肿瘤干细胞,免疫荧光检测干细胞标志基因CD133和Nanog,吖啶橙染色观察自噬小体的形成;Western blot检测贴壁细胞和肿瘤干细胞中自噬相关基因Beclin1和LC3B...
目的:研究自噬对宫颈癌细胞干性及增殖能力的影响。方法:采用悬浮培养法分离HeLa肿瘤干细胞,免疫荧光检测干细胞标志基因CD133和Nanog,吖啶橙染色观察自噬小体的形成;Western blot检测贴壁细胞和肿瘤干细胞中自噬相关基因Beclin1和LC3B的表达情况;贴壁细胞和肿瘤干细胞平衡盐溶液EBSS饥饿处理4 h和8 h后,吖啶橙染色观察自噬小体的形成,Western blot检测Beclin1和LC3B表达,实时细胞检测系统检测野生型和饥饿处理后HeLa细胞的增殖能力;自噬抑制剂3-methyladenine(3-MA)阻断宫颈癌贴壁细胞和干细胞的自噬后,Western blot检测Beclin1和LC3B表达,实时细胞检测系统检测野生型和自噬抑制剂处理后HeLa细胞的增殖能力;运用CRISPR/Cas9基因编辑技术降低自噬基因Beclin1的表达,通过实时细胞检测系统检测野生型和Beclin1突变HeLa细胞的增殖能力。结果:基础水平下,HeLa肿瘤干细胞比HeLa贴壁细胞自噬水平高。饥饿诱导处理后,HeLa肿瘤干细胞和HeLa贴壁细胞自噬水平均增高,均在4 h最强,8 h后有所减弱,且HeLa肿瘤干细胞在饥饿诱导各时间点均比HeLa贴壁细胞强;HeLa细胞饥饿处理4 h和8 h后增殖能力均有所下降,8 h下降更明显。应用3-MA后,HeLa肿瘤干细胞和HeLa贴壁细胞自噬均减弱,且HeLa贴壁细胞自噬减弱更为明显;细胞增殖能力也明显减弱。Beclin1突变后HeLa细胞较野生型HeLa细胞增殖能力增强。结论:自噬参与维持宫颈癌HeLa细胞的干性。同时,自噬也能影响宫颈癌HeLa细胞的增殖能力。通过基因打靶扰乱自噬关键基因(如Beclin1或LC3B等)而改变宫颈癌细胞自噬水平可为宫颈癌的治疗带来新的治疗策略。
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关键词
自噬:宫颈癌干细胞
BECLIN1
LC3B
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职称材料
睑裂狭小综合征Ⅱ型一家系未检测到FOXL2基因突变
被引量：
1
2
作者
温臣婷
唐微
+1 位作者
李国保
张有顺
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2012年第11期1043-1046,共4页
目的对一个常染色体显性遗传的睑裂狭小综合征Ⅱ型家系FOXL2基因突变进行研究。方法采集一个中国人睑裂狭小综合征Ⅱ型家系的4例患者及家系中5例健康人和30例正常对照者外周静脉血样,提取基因组DNA,参考FOXL2基因序列,设计5对引物,应用...
目的对一个常染色体显性遗传的睑裂狭小综合征Ⅱ型家系FOXL2基因突变进行研究。方法采集一个中国人睑裂狭小综合征Ⅱ型家系的4例患者及家系中5例健康人和30例正常对照者外周静脉血样,提取基因组DNA,参考FOXL2基因序列,设计5对引物,应用PCR和DNA测序技术对FOXI2基因的编码区和启动子区进行扩增和突变检查。结果成功提取了该家系中4例患者和5例健康人与30名正常对照者外周血基因组DNA,分段扩增出了FOXL2基因的编码区及启动子区,但5段测序结果显示该家系中4例患者和5例健康人与30名正常对照者的FOXL2基因测序结果相同。该家系患者FOXL2基因编码区及启动子区均未发现突变。结论该家系睑裂狭小综合征的致病因素不是由FOXL2基因突变引起的。
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关键词
睑裂狭小综合征
FOXL2基因
聚合酶链反应
基因突变
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职称材料
题名
自噬对宫颈癌细胞干性及增殖能力的影响
被引量：
3
1
作者
杨毅
丁妍
于爱清
严世荣
机构
武汉大学中南医院基因诊断中心.武汉
湖北医药学院生化教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017年第11期1390-1394,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:81541147)
湖北医药学院博士研究生启动金资助项目(编号:2015QDJZR01)
文摘
目的:研究自噬对宫颈癌细胞干性及增殖能力的影响。方法:采用悬浮培养法分离HeLa肿瘤干细胞,免疫荧光检测干细胞标志基因CD133和Nanog,吖啶橙染色观察自噬小体的形成;Western blot检测贴壁细胞和肿瘤干细胞中自噬相关基因Beclin1和LC3B的表达情况;贴壁细胞和肿瘤干细胞平衡盐溶液EBSS饥饿处理4 h和8 h后,吖啶橙染色观察自噬小体的形成,Western blot检测Beclin1和LC3B表达,实时细胞检测系统检测野生型和饥饿处理后HeLa细胞的增殖能力;自噬抑制剂3-methyladenine(3-MA)阻断宫颈癌贴壁细胞和干细胞的自噬后,Western blot检测Beclin1和LC3B表达,实时细胞检测系统检测野生型和自噬抑制剂处理后HeLa细胞的增殖能力;运用CRISPR/Cas9基因编辑技术降低自噬基因Beclin1的表达,通过实时细胞检测系统检测野生型和Beclin1突变HeLa细胞的增殖能力。结果:基础水平下,HeLa肿瘤干细胞比HeLa贴壁细胞自噬水平高。饥饿诱导处理后,HeLa肿瘤干细胞和HeLa贴壁细胞自噬水平均增高,均在4 h最强,8 h后有所减弱,且HeLa肿瘤干细胞在饥饿诱导各时间点均比HeLa贴壁细胞强;HeLa细胞饥饿处理4 h和8 h后增殖能力均有所下降,8 h下降更明显。应用3-MA后,HeLa肿瘤干细胞和HeLa贴壁细胞自噬均减弱,且HeLa贴壁细胞自噬减弱更为明显;细胞增殖能力也明显减弱。Beclin1突变后HeLa细胞较野生型HeLa细胞增殖能力增强。结论:自噬参与维持宫颈癌HeLa细胞的干性。同时,自噬也能影响宫颈癌HeLa细胞的增殖能力。通过基因打靶扰乱自噬关键基因(如Beclin1或LC3B等)而改变宫颈癌细胞自噬水平可为宫颈癌的治疗带来新的治疗策略。
关键词
自噬:宫颈癌干细胞
BECLIN1
LC3B
Keywords
autophagy
cervical cancer cells
Beclin 1
LC3B
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
睑裂狭小综合征Ⅱ型一家系未检测到FOXL2基因突变
被引量：
1
2
作者
温臣婷
唐微
李国保
张有顺
机构
湖北
医药
学院
附属东风总医院眼科
湖北医药学院生化教研室
湖北
医药
学院
附属东风总医院实验中心
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2012年第11期1043-1046,共4页
基金
湖北省教育厅科技研究项目(编号:Q20102108)~~
文摘
目的对一个常染色体显性遗传的睑裂狭小综合征Ⅱ型家系FOXL2基因突变进行研究。方法采集一个中国人睑裂狭小综合征Ⅱ型家系的4例患者及家系中5例健康人和30例正常对照者外周静脉血样,提取基因组DNA,参考FOXL2基因序列,设计5对引物,应用PCR和DNA测序技术对FOXI2基因的编码区和启动子区进行扩增和突变检查。结果成功提取了该家系中4例患者和5例健康人与30名正常对照者外周血基因组DNA,分段扩增出了FOXL2基因的编码区及启动子区,但5段测序结果显示该家系中4例患者和5例健康人与30名正常对照者的FOXL2基因测序结果相同。该家系患者FOXL2基因编码区及启动子区均未发现突变。结论该家系睑裂狭小综合征的致病因素不是由FOXL2基因突变引起的。
关键词
睑裂狭小综合征
FOXL2基因
聚合酶链反应
基因突变
Keywords
blepharophimosis ptosis epicanthus inversus syndrome
FOXL2 gene
polymerase chain reaction
gene mutation
分类号
R77 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
自噬对宫颈癌细胞干性及增殖能力的影响
杨毅
丁妍
于爱清
严世荣
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
睑裂狭小综合征Ⅱ型一家系未检测到FOXL2基因突变
温臣婷
唐微
李国保
张有顺
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2012
1
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