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安寐丹调控Orexin信号通路改善睡眠剥夺斑马鱼模型学习记忆的作用及机制研究 被引量：3
1
作者 叶子靖 徐波 +4 位作者 夏婧 鲁海菲 陈雨萌 黄梦莹 王平 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第3期731-741,共11页
目的观察培元固本安神法代表方安寐丹对睡眠剥夺(SD)斑马鱼模型学习记忆的作用,并基于食欲素(Orexin)信号通路探讨其可能机制及最佳显效剂量。方法120尾4月龄野生型AB系斑马鱼随机分为空白组、模型组、安寐丹低剂量组(0.009 mg·mL^... 目的观察培元固本安神法代表方安寐丹对睡眠剥夺(SD)斑马鱼模型学习记忆的作用,并基于食欲素(Orexin)信号通路探讨其可能机制及最佳显效剂量。方法120尾4月龄野生型AB系斑马鱼随机分为空白组、模型组、安寐丹低剂量组(0.009 mg·mL^(-1)·d^(-1))、安寐丹中剂量组(0.027 mg·mL^(-1)·d^(-1))、安寐丹高剂量组(0.081 mg·mL^(-1)·d^(-1))、褪黑素组(0.4 mg·mL^(-1)·d^(-1)),采用LED灯光照诱导方法建立斑马鱼SD模型,利用斑马鱼行为追踪系统监测各组斑马鱼24 h行为学变化,T型迷宫检测各组斑马鱼学习记忆能力差异,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组斑马鱼脑部神经元的状态与数量,透射电镜观察各组斑马鱼脑部神经元结构的变化,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组斑马鱼食欲素A(OXA)、食欲素B(OXB)含量水平,蛋白质免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量法(RT-PCR)检测脑组织OXA/p38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)信号通路蛋白和mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组总静止次数、持续时间以及距离减少(P<0.05),进入目标区域(OR)潜伏期延长(P<0.01);神经细胞数量减少,细胞核变性、胞质透明增多、着色浅,细胞核塌陷、核膜破裂溶解、染色质固缩、线粒体肿胀畸形、内有空腔、形成板层状髓鞘样结构;脑组织OXA、OXB蛋白显著升高(P<0.01),OXA mRNA和蛋白显著上调(P<0.01),P38 MAPK和ERK1/2 mRNA和蛋白显著下调(P<0.01)。与模型组比较,药物干预能延长SD斑马鱼静息运动总时间(P<0.05),缩短斑马鱼到达OR潜伏期(P<0.05);保护神经细胞结构与形态,减轻脑组织损伤;降低脑组织OXA、OXB含量(P<0.01),下调OXA mRNA和蛋白表达量(P<0.01),上调P38 MAPK和ERK1/2 mRNA和蛋白的表达量(P<0.01);且量效关系明显,安寐丹高剂量效果最优。结论培元固本安神法代表方安寐丹可以改善斑马鱼SD模型学习记忆能力,其机制可能与调控OXA/P38 MAPK/ERK1/2信号通路,缓解脑部神经元损伤相关,且安寐丹高剂量组显效最佳。 展开更多
关键词 安寐丹 睡眠剥夺 斑马鱼 学习记忆 食欲素
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安寐丹“生熟枣仁”同用及拆方调控Orexin信号通路改善失眠大鼠模型突触可塑性的差异及机制探究 被引量：1
2
作者 徐波 孙康 +4 位作者 王平 谢光璟 叶子靖 秦庆花 夏婧 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第12期3218-3233,共16页
目的基于食欲素(Orexin)信号通路调控的突触可塑性初步探索清代经典名方安寐丹“生熟枣仁”同用及拆方对失眠大鼠模型学习记忆的影响差异及可能机制。方法腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)构建失眠大鼠模型,给予安寐丹“生熟枣仁”同用及拆... 目的基于食欲素(Orexin)信号通路调控的突触可塑性初步探索清代经典名方安寐丹“生熟枣仁”同用及拆方对失眠大鼠模型学习记忆的影响差异及可能机制。方法腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)构建失眠大鼠模型,给予安寐丹“生熟枣仁”同用及拆方水煎液灌胃。利用Etho Vision XT动物运动轨迹跟踪系统观察其24 h自主活动,Morris水迷宫评价学习记忆能力;苏木精-伊红(HE)和尼氏(Nissl)染色观察大鼠海马CA1区神经元改变,高尔基(Golgi)染色和免疫组化(IHC)观察大鼠海马CA1区树突棘变化和突触可塑性蛋白突触素(SYN)、人微管相关蛋白2(MAP-2)、胶质细胞原纤维酸性蛋白43(GFAP-43)表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测海马食欲素A(OXA)/磷脂酰肌醇特异性磷酯酶C_(β1)(PLC_(β-1))/蛋白激酶C_(α)(PKC_(α))/胞外信号调节激酶(ERK_(1/2))信号通路蛋白、基因表达。结果与空白组相比,模型组上平台潜伏期延长、穿越站台次数降低、站台周围范围Ⅰ活动路程降低、狂躁频率和时间增加、静止频率和时间降低(P<0.01),海马CA1区肌纤维受损、细胞核染色不均匀,尼氏小体减少、排列紊乱,树突棘长度、个数均减少(P<0.05),SYN、MAP-2、GFAP-43染色淡、表达下降(P<0.01),海马OXA蛋白、基因表达增高(P<0.01),PLC_(β-1)、PKC_(α)、ERK_(1/2)蛋白和基因表达降低(P<0.01)。与模型组比较,苏沃雷生和安寐丹、安寐丹去生、熟枣仁可增加其静止频率、穿越站台次数、第一象限和站台周围范围活动路程、站台周围范围Ⅰ活动时间(P<0.05,P<0.01);海马肌纤维排列较整齐,尼氏小体增多,树突棘长度、个数增加(P<0.05),SYN、MAP-2、GFAP-43表达升高(P<0.05,P<0.01),OXA表达降低(P<0.01,P<0.05),PLC_(β-1)、PKC_(α)、ERK_(1/2)表达提升(P<0.01,P<0.05)。与安寐丹组比较,安寐丹去生、熟枣仁组均可以增加其穿越站台次数和路程(P<0.05,P<0.01),减少树突棘长度、个数(P<0.05),降低海马CA1区SYN、MAP-2、GFAP-43和OXA蛋白表达(P<0.01),提升PLC_(β-1)、PKC_(α)、ERK_(1/2)表达(P<0.05)。结论安寐丹可通过调控OXA/PLC_(β-1)/PKC_(α)/ERK_(1/2)信号通路调节失眠大鼠海马突触可塑性从而改善学习记忆,且安寐丹“生熟枣仁”同用效果优于“生熟枣仁”拆方。 展开更多
关键词 安寐丹 失眠 学习记忆 突触可塑性 OXA/PLC_(β-1)/PKC_(α)/ERK_(1/2)信号通路
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生物信息学融入中药药理学实验教学设计的探索——以酸枣仁汤为例
3
作者 尹超 张美娅 +3 位作者 王平 丁莉 游秋云 吴和珍 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2024年第5期168-174,共7页
以酸枣仁汤为例,将生物信息学融入实验教学设计与实践,实现了理论教学与实验教学的双融合。生物信息学多靶点、多途径的协同调控与中医药的“整体观念”相契合,而数据可视化帮助学生直观“看到”并理解中药复方的作用机制和科学内涵。... 以酸枣仁汤为例,将生物信息学融入实验教学设计与实践,实现了理论教学与实验教学的双融合。生物信息学多靶点、多途径的协同调控与中医药的“整体观念”相契合,而数据可视化帮助学生直观“看到”并理解中药复方的作用机制和科学内涵。将酸枣仁汤“异病同治”失眠和阿尔茨海默病的实验划分成3个教学模块,即基础生物信息实验、异病同治实验、机制探索实验,围绕预习探索、模拟实验和团队协作能力进行系统训练,引导学生自主设计并完善验证性实验。通过线上操作、线下考核、课程汇报等方式优化实验教学模式,全方位提升学生对关键知识的理解能力、应用能力和创新能力。 展开更多
关键词 生物信息学 中药药理学 酸枣仁汤 异病同治
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