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高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量
被引量：
4
1
作者
曹秋实
巴元明
+1 位作者
罗俊华
戴琪
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期82-87,共6页
目的建立高效液相色谱法（HPLC）检测大鼠尿液中草酸含量。方法将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组（n=12）和乙二醇组（n=12）。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇...
目的建立高效液相色谱法（HPLC）检测大鼠尿液中草酸含量。方法将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组（n=12）和乙二醇组（n=12）。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇自由饮水喂养,每天2%氯化铵2 ml灌胃。造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较。HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C18（250×4.6 mm,5μm）,以甲醇（0.1 mol/L）、醋酸铵水溶液（15∶85）为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20℃。结果大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x＋378730,R2=0.9984和y=7810.5x-16635,R2=0.9967;最低检测浓度为5μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50-2000.00μg/ml,低浓度线性范围为6.25-100.00μg/ml。平均回收率为95.1%,日内及日间精密度分别为3.4%-10.8%和3.8%-9.4%。HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24 h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度：（736.35±254.52）μg/ml比（51.56±36.34）μg/ml,（687.35±234.53）μg/ml比（50.24±42.34）μg/ml;24 h尿草酸含量：（11.23±4.12）mg比（0.87±0.45）mg,（9.89±3.55）mg比（0.77±0.65）mg;P均〈0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24 h尿草酸含量差异无统计学意义（P均〉0.05）。结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定。
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关键词
高效液相色谱法
大鼠模型
尿草酸
含量
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职称材料
PTEN低表达和c-Met高表达激活AKT/mTOR信号通路促进肝细胞癌形成
被引量：
5
2
作者
王瑞
戴琪
胡俊杰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期448-454,共7页
目的探究第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)低表达和细胞间质上皮转化因子(c-Met)高表达对肝细胞癌形成的影响及机制。方法实时定量PCR和免疫组织化学染色分别检测肝癌患者组织样本中PTEN和c-Met的mRNA和蛋白表达,并分析P...
目的探究第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)低表达和细胞间质上皮转化因子(c-Met)高表达对肝细胞癌形成的影响及机制。方法实时定量PCR和免疫组织化学染色分别检测肝癌患者组织样本中PTEN和c-Met的mRNA和蛋白表达,并分析PTEN低表达和c-Met高表达患者的生存曲线。高压尾静脉注射法将提取制备的PTEN的短发夹RNA(shRNA)和c-Met基因质粒,单独或共同注射到FVB/N小鼠肝脏中,观察肿瘤的发生发展情况并绘制各组小鼠生存曲线,Western blot法检测小鼠肝组织蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)信号通路的激活。雷帕霉素不敏感性mTOR伴侣分子基因敲除(Rictorflox/flox)小鼠分别转染注射shPTEN/c-Met/PT3(对照组)、shPTEN/c-Met/Cre(Rictor敲除组),观察肿瘤的发生和发展情况,Western blot法检测各组小鼠肝组织AKT、mTOR蛋白的磷酸化水平。结果在60例肝癌样本中,44例样本PTEN表达量低于癌旁组织,42例的c-Met的表达高于癌旁组织,PTEN低表达和c-Met高表达同时发生在34例患者中。shPTEN质粒和c-Met基因质粒共同注射组FVB/N小鼠肝癌发生和死亡率显著高于shPTEN质粒和c-Met基因质粒单独注射组,AKT/mTOR信号通路激活情况亦显著高于shPTEN质粒和c-Met基因质粒单独注射组。Rictorflox/flox小鼠转染shPTEN协同c-Met基因质粒肝癌发生率及AKT、mTOR蛋白的磷酸化均显著低于转染shPTEN协同c-Met基因质粒的野生型小鼠。结论肝癌中PTEN低表达和c-Met高表达可促进AKT/mTOR信号通路的激活而促进肝癌的发生。
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关键词
第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)
细胞间质上皮转化因子(c-Met)
肝癌
蛋白激酶B(AKT)
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)
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职称材料
题名
高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量
被引量：
4
1
作者
曹秋实
巴元明
罗俊华
戴琪
机构
湖北中医药大学
中医
临床学院
湖北
省
中医
院肾内科
广州军区武汉总
医院
干部病房一科
湖北中医药大学校医院
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期82-87,共6页
基金
湖北省卫计委科研重点项目(JX6A09)
湖北省医学领军人才培养工程专项经费资助项目~~
文摘
目的建立高效液相色谱法（HPLC）检测大鼠尿液中草酸含量。方法将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组（n=12）和乙二醇组（n=12）。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇自由饮水喂养,每天2%氯化铵2 ml灌胃。造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较。HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C18（250×4.6 mm,5μm）,以甲醇（0.1 mol/L）、醋酸铵水溶液（15∶85）为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20℃。结果大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x＋378730,R2=0.9984和y=7810.5x-16635,R2=0.9967;最低检测浓度为5μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50-2000.00μg/ml,低浓度线性范围为6.25-100.00μg/ml。平均回收率为95.1%,日内及日间精密度分别为3.4%-10.8%和3.8%-9.4%。HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24 h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度：（736.35±254.52）μg/ml比（51.56±36.34）μg/ml,（687.35±234.53）μg/ml比（50.24±42.34）μg/ml;24 h尿草酸含量：（11.23±4.12）mg比（0.87±0.45）mg,（9.89±3.55）mg比（0.77±0.65）mg;P均〈0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24 h尿草酸含量差异无统计学意义（P均〉0.05）。结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定。
关键词
高效液相色谱法
大鼠模型
尿草酸
含量
Keywords
high performance liquid chromatography
rat model
urinary oxalate
content
分类号
R692.4 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
PTEN低表达和c-Met高表达激活AKT/mTOR信号通路促进肝细胞癌形成
被引量：
5
2
作者
王瑞
戴琪
胡俊杰
机构
湖北中医药大学
药学院药理实验室
湖北中医药大学校医院
药剂科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期448-454,共7页
基金
湖北省教育厅优秀中青年人才项目(Q20172001)。
文摘
目的探究第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)低表达和细胞间质上皮转化因子(c-Met)高表达对肝细胞癌形成的影响及机制。方法实时定量PCR和免疫组织化学染色分别检测肝癌患者组织样本中PTEN和c-Met的mRNA和蛋白表达,并分析PTEN低表达和c-Met高表达患者的生存曲线。高压尾静脉注射法将提取制备的PTEN的短发夹RNA(shRNA)和c-Met基因质粒,单独或共同注射到FVB/N小鼠肝脏中,观察肿瘤的发生发展情况并绘制各组小鼠生存曲线,Western blot法检测小鼠肝组织蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)信号通路的激活。雷帕霉素不敏感性mTOR伴侣分子基因敲除(Rictorflox/flox)小鼠分别转染注射shPTEN/c-Met/PT3(对照组)、shPTEN/c-Met/Cre(Rictor敲除组),观察肿瘤的发生和发展情况,Western blot法检测各组小鼠肝组织AKT、mTOR蛋白的磷酸化水平。结果在60例肝癌样本中,44例样本PTEN表达量低于癌旁组织,42例的c-Met的表达高于癌旁组织,PTEN低表达和c-Met高表达同时发生在34例患者中。shPTEN质粒和c-Met基因质粒共同注射组FVB/N小鼠肝癌发生和死亡率显著高于shPTEN质粒和c-Met基因质粒单独注射组,AKT/mTOR信号通路激活情况亦显著高于shPTEN质粒和c-Met基因质粒单独注射组。Rictorflox/flox小鼠转染shPTEN协同c-Met基因质粒肝癌发生率及AKT、mTOR蛋白的磷酸化均显著低于转染shPTEN协同c-Met基因质粒的野生型小鼠。结论肝癌中PTEN低表达和c-Met高表达可促进AKT/mTOR信号通路的激活而促进肝癌的发生。
关键词
第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)
细胞间质上皮转化因子(c-Met)
肝癌
蛋白激酶B(AKT)
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)
Keywords
phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten(PTEN)
cellular-mesenchymal to epithelial transition factor(c-Met)
liver cancer
protein kinase B(AKT)
mammalian target of rapamycin(mTOR)
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量
曹秋实
巴元明
罗俊华
戴琪
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
PTEN低表达和c-Met高表达激活AKT/mTOR信号通路促进肝细胞癌形成
王瑞
戴琪
胡俊杰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
5
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