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过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立
1
作者
徐菁
何柳
+3 位作者
周芳婷
潘勤
陈姗
罗靓
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期24-29,共6页
为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳...
为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞(TLR2^(+))。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促进细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。
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关键词
TLR2
慢病毒载体
B淋巴细胞
PI3K-AKT信号通路
细胞增殖
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职称材料
裸子植物psbA基因分子进化式样的研究
被引量：
4
2
作者
森林
余坤
+4 位作者
胡志刚
汪文杰
徐雷
刘合刚
潘宏林
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期151-159,共9页
为阐明裸子植物对陆生生境生态响应的分子机制,以新近的裸子植物分类系统为指导,基于psb A基因编码全序列对4亚纲53种代表植物进行分子进化分析。首先,依据"放松分子钟"模型重建裸子植物在时间尺度下系统发育关系;其次,采用6...
为阐明裸子植物对陆生生境生态响应的分子机制,以新近的裸子植物分类系统为指导,基于psb A基因编码全序列对4亚纲53种代表植物进行分子进化分析。首先,依据"放松分子钟"模型重建裸子植物在时间尺度下系统发育关系;其次,采用6个模型(MEC/JTT、MEC/cp REV、M5、M7、M8、M8a)估测氨基酸位点ω值,并对各模型结果进行统计检测;随后,利用Bootstrap方法检PSBA蛋白内部氨基酸位点的共进化动态。结果表明,系统树提示的物种分化历程支持前期分类结果;光合系统反应中心核心PSBA蛋白有3个氨基酸位点(13、19和243)曾经受正选择压力;PSBA蛋白内部有多对氨基酸位点间构成了共进化网络。因此,psb A基因编码序列具有作为描绘裸子植物系统发育关系标记的潜力,PSBA蛋白部分位点经历了适应性进化,通过位点间共进化网络协同作用方式辅助裸子植物响应陆生生境。
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关键词
裸子植物
响应
机制
放松分子钟模型
适应性进化
共进化
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职称材料
题名
过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立
1
作者
徐菁
何柳
周芳婷
潘勤
陈姗
罗靓
机构
湖北中医药大学、药学院
、药物分析教研室
武汉
大学
泰康医
学院
(基础医
学院
)人体解剖学与组织胚胎学系
武汉市蔡甸区人民医院检验科
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期24-29,共6页
基金
湖北省教育厅科学研究计划指导性项目(B2021115)。
文摘
为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞(TLR2^(-)),嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞(TLR2^(+))。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促进细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。
关键词
TLR2
慢病毒载体
B淋巴细胞
PI3K-AKT信号通路
细胞增殖
Keywords
TLR2
lentiviral vector
B lymphocyte
PI3K-AKT pathway
cell proliferation
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
裸子植物psbA基因分子进化式样的研究
被引量：
4
2
作者
森林
余坤
胡志刚
汪文杰
徐雷
刘合刚
潘宏林
机构
湖北中医药大学
中药资源与中药复方教育部重点实验室
湖北中医药大学、药学院
出处
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期151-159,共9页
基金
国家自然科学基金青年项目(31500260)
湖北中医药大学教育部重点实验室科研启动经费(5114000914)资助~~
文摘
为阐明裸子植物对陆生生境生态响应的分子机制,以新近的裸子植物分类系统为指导,基于psb A基因编码全序列对4亚纲53种代表植物进行分子进化分析。首先,依据"放松分子钟"模型重建裸子植物在时间尺度下系统发育关系;其次,采用6个模型(MEC/JTT、MEC/cp REV、M5、M7、M8、M8a)估测氨基酸位点ω值,并对各模型结果进行统计检测;随后,利用Bootstrap方法检PSBA蛋白内部氨基酸位点的共进化动态。结果表明,系统树提示的物种分化历程支持前期分类结果;光合系统反应中心核心PSBA蛋白有3个氨基酸位点(13、19和243)曾经受正选择压力;PSBA蛋白内部有多对氨基酸位点间构成了共进化网络。因此,psb A基因编码序列具有作为描绘裸子植物系统发育关系标记的潜力,PSBA蛋白部分位点经历了适应性进化,通过位点间共进化网络协同作用方式辅助裸子植物响应陆生生境。
关键词
裸子植物
响应
机制
放松分子钟模型
适应性进化
共进化
Keywords
Gymnosperms
Response
Mechanism
Relaxed molecular clock model
Adaptive evolution
Co-evolution
分类号
Q943 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立
徐菁
何柳
周芳婷
潘勤
陈姗
罗靓
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
裸子植物psbA基因分子进化式样的研究
森林
余坤
胡志刚
汪文杰
徐雷
刘合刚
潘宏林
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
4
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职称材料
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