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柴胡皂甙D诱导肝癌细胞同时发生凋亡及类凋亡性细胞死亡 被引量：14
1
作者 卢新兰 卢朝辉 +5 位作者 曹琰 张旭 王新 李雅睿 郭丹 和水祥 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期966-971,共6页
目的探讨柴胡皂甙D(saikosaponin-d,SSD)诱导人肝癌Hep3B细胞死亡的作用及其可能机制。方法将肝癌Hep3B细胞分为空白对照组、DMSO(溶媒)对照组和3个SSD(5、10、15μmol/L)处理组,MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双标记后采用流式... 目的探讨柴胡皂甙D(saikosaponin-d,SSD)诱导人肝癌Hep3B细胞死亡的作用及其可能机制。方法将肝癌Hep3B细胞分为空白对照组、DMSO(溶媒)对照组和3个SSD(5、10、15μmol/L)处理组,MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双标记后采用流式细胞仪定量检测死亡细胞的比例;Hoechst 33258染色后在形态学方面检测细胞凋亡;分光光度法检测半胱天冬酶-3(caspase-3)凋亡蛋白酶活性;倒置显微镜观察细胞形态改变;Western blotting和Real-time PCR技术分别用于检测CHOP(C/EBP homology protein)蛋白和mRNA表达。结果MTT结果显示,SSD浓度和时间依赖性抑制Hep3B细胞生长;流式细胞术结果表明SSD诱导Hep3B细胞死亡;Hoechst 33258染色后在荧光显微镜下观察,发现SSD处理组的细胞核出现凋亡细胞特征性的核染色体凝集、核固缩和碎裂;SSD可明显激活关键的凋亡执行分子caspase-3;通过倒置显微镜观察到SSD处理的细胞内出现大量空泡样改变——类凋亡的发生;总caspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理能够有效抑制caspase-3活性,但仅能部分抑制SSD诱导的细胞死亡,且不能减少SSD诱导的细胞内空泡形成;SSD诱导应激诱导性分子CHOP蛋白和mRNA表达上调,该作用不能被Z-VAD-FMK抑制。结论SSD可诱导人肝癌Hep3B细胞同时发生caspase依赖性凋亡和非caspase依赖性类凋亡,其中CHOP表达升高可能是参与SSD诱导类凋亡的分子机制之一。 展开更多
关键词 柴胡皂甙D 细胞凋亡 类凋亡 肝癌 CHOP
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盐酸青藤碱通过线粒体凋亡途径诱导胃癌细胞死亡 被引量：10
2
作者 王新 张旭 +8 位作者 李雅睿 郭丹 曹琰 赵艳 张丹 任牡丹 卢桂芳 和水祥 卢新兰 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期854-858,866,共6页
目的探讨盐酸青藤碱诱导人胃癌BGC-823细胞死亡的作用及其可能机制。方法将胃癌BGC-823细胞分为对照组(未给药)和4个盐酸青藤碱(0.5、1、2、4 mmol/L)处理组,MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双标记后采用流式细胞仪定量检测凋亡细... 目的探讨盐酸青藤碱诱导人胃癌BGC-823细胞死亡的作用及其可能机制。方法将胃癌BGC-823细胞分为对照组(未给药)和4个盐酸青藤碱(0.5、1、2、4 mmol/L)处理组,MTT法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双标记后采用流式细胞仪定量检测凋亡细胞的比例;分光光度法检测半胱天冬酶-3(caspase-3)凋亡蛋白酶活力;JC-1染色标记后采用流式细胞仪检测线粒体膜电位水平;Western blotting检测细胞质中细胞色素C蛋白的表达。结果MTT结果显示,盐酸青藤碱可浓度和时间依赖性抑制人胃癌BGC-823细胞活力;流式细胞术检测结果显示,盐酸青藤碱浓度依赖性促进BGC-823细胞凋亡;盐酸青藤碱可激活caspase-3,促进细胞色素C从线粒体向细胞质中释放,导致细胞线粒体膜电位崩溃;总caspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理能有效抑制盐酸青藤碱诱导的caspase-3活化和细胞凋亡。结论盐酸青藤碱可通过激活线粒体凋亡通路显著诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡。 展开更多
关键词 盐酸青藤碱 胃癌 BGC-823细胞 细胞凋亡 线粒体凋亡通路
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盐酸青藤碱通过C/EBPβ-COX-2通路抑制LPA诱导的肝癌细胞增殖 被引量：6
3
作者 王新 卢朝辉 +6 位作者 李雅睿 郭丹 张旭 曹琰 李皓瑞 和水祥 卢新兰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第5期786-789,共4页
目的观察溶血磷脂酸(LPA)对肝癌细胞CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)和环氧合酶-2(COX-2)表达及增殖的影响,并进一步探讨抗炎药物盐酸青藤碱(SIN)对其可能的作用。方法采用人肝癌Huh7细胞系,分别用Real-time PCR和Western blot检测基因... 目的观察溶血磷脂酸(LPA)对肝癌细胞CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)和环氧合酶-2(COX-2)表达及增殖的影响,并进一步探讨抗炎药物盐酸青藤碱(SIN)对其可能的作用。方法采用人肝癌Huh7细胞系,分别用Real-time PCR和Western blot检测基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法检测细胞增殖。结果用10μmol/L LPA处理Huh7细胞不同时间(0~6 h)后,C/EBPβ、COX-2的蛋白和mRNA表达水平呈时间依赖性升高;分别用不同浓度的LPA(0~10μmol/L)处理Huh7细胞6 h后,C/EBPβ、COX-2的蛋白和mRNA表达均呈浓度依赖性升高;SIN浓度依赖性抑制LPA所诱导的C/EBPβ、COX-2表达及细胞增殖。结论LPA通过诱导C/EBPβ-COX-2通路表达促进人肝癌Huh7细胞增殖,而SIN能够通过下调C/EBPβ-COX-2表达抑制LPA所诱导的细胞增殖。 展开更多
关键词 溶血磷脂酸 CCAAT/增强子结合蛋白β 环氧合酶-2 盐酸青藤碱 肝癌
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