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白藜芦醇抑制蛋白激酶B磷酸化缓解大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化
被引量：
2
1
作者
林周豪
白永恒
+2 位作者
陆红
郭勇
吴存造
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2019年第1期9-15,共7页
目的探讨白藜芦醇对大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化的影响。方法制备大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,白藜芦醇干预组于手术当天ig给予白藜芦醇20 mg·kg^(-1),术后第7天取其梗阻侧肾脏进行检测。HE和Masson染色分别观察肾组织病理改...
目的探讨白藜芦醇对大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化的影响。方法制备大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,白藜芦醇干预组于手术当天ig给予白藜芦醇20 mg·kg^(-1),术后第7天取其梗阻侧肾脏进行检测。HE和Masson染色分别观察肾组织病理改变和纤维化程度;免疫组织化学染色检测肌成纤维细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。体外分别培养肾小管上皮细胞(NRK-52E)和成纤维细胞(NRK-49F),各分为3组:细胞对照组,转化生长因子β_1(TGF-β_1)5μg·L^(-1)诱导组和TGF-β_15μg·L^(-1)+白藜芦醇10或100 mmol·L^(-1)干预组。细胞免疫荧光染色检测α-SMA、细胞外基质成分(Ⅲ型胶原)和上皮细胞标志物E-钙黏着蛋白的表达;Western蛋白印迹法检测细胞或组织中蛋白激酶B(AKT)磷酸化。结果与假手术组相比,HE染色显示UUO模型组肾间充质面积扩大(P<0.01),Masson染色显示UUO模型组胶原累积明显(P<0.05);白藜芦醇干预组上述改变均被抑制(P<0.05),α-SMA阳性肌成纤维细胞的形成亦被抑制(P<0.05)。体外应用TGF-β_1刺激后,与细胞对照组相比,TGF-β_15μg·L^(-1)诱导组α-SMA表达增加(P<0.01),提示细胞表型转化为肌成纤维细胞数量明显增加,同时伴随着Ⅲ型胶原过度累积(P<0.01);白藜芦醇干预组上述改变被抑制(P<0.05)。进一步研究发现,在肌成纤维细胞产生过程中,AKT磷酸化水平增加(P<0.05);白藜芦醇干预后,体内外AKT磷酸化升高均被抑制(P<0.01)。结论白藜芦醇可能通过拮抗AKT的磷酸化,抑制TGF-β_1所诱导的NRK-52E和NRK-49F表型转化为肌成纤维细胞,进而减少基质累积,缓解肾纤维化。
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关键词
白藜芦醇
肌成纤维细胞
肾纤维化
蛋白激酶B磷酸化
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职称材料
题名
白藜芦醇抑制蛋白激酶B磷酸化缓解大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化
被引量：
2
1
作者
林周豪
白永恒
陆红
郭勇
吴存造
机构
温州医科大学附属第一医院浙江省胰腺肝脏危重性疾病诊治新技术研究重点实验室
温州医科大学附属第一医院
移植科
温州医科大学附属第一医院
医学检验中心
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2019年第1期9-15,共7页
基金
国家自然科学基金(81772264)
温州科技局项目(Y20160127)~~
文摘
目的探讨白藜芦醇对大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化的影响。方法制备大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,白藜芦醇干预组于手术当天ig给予白藜芦醇20 mg·kg^(-1),术后第7天取其梗阻侧肾脏进行检测。HE和Masson染色分别观察肾组织病理改变和纤维化程度;免疫组织化学染色检测肌成纤维细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。体外分别培养肾小管上皮细胞(NRK-52E)和成纤维细胞(NRK-49F),各分为3组:细胞对照组,转化生长因子β_1(TGF-β_1)5μg·L^(-1)诱导组和TGF-β_15μg·L^(-1)+白藜芦醇10或100 mmol·L^(-1)干预组。细胞免疫荧光染色检测α-SMA、细胞外基质成分(Ⅲ型胶原)和上皮细胞标志物E-钙黏着蛋白的表达;Western蛋白印迹法检测细胞或组织中蛋白激酶B(AKT)磷酸化。结果与假手术组相比,HE染色显示UUO模型组肾间充质面积扩大(P<0.01),Masson染色显示UUO模型组胶原累积明显(P<0.05);白藜芦醇干预组上述改变均被抑制(P<0.05),α-SMA阳性肌成纤维细胞的形成亦被抑制(P<0.05)。体外应用TGF-β_1刺激后,与细胞对照组相比,TGF-β_15μg·L^(-1)诱导组α-SMA表达增加(P<0.01),提示细胞表型转化为肌成纤维细胞数量明显增加,同时伴随着Ⅲ型胶原过度累积(P<0.01);白藜芦醇干预组上述改变被抑制(P<0.05)。进一步研究发现,在肌成纤维细胞产生过程中,AKT磷酸化水平增加(P<0.05);白藜芦醇干预后,体内外AKT磷酸化升高均被抑制(P<0.01)。结论白藜芦醇可能通过拮抗AKT的磷酸化,抑制TGF-β_1所诱导的NRK-52E和NRK-49F表型转化为肌成纤维细胞,进而减少基质累积,缓解肾纤维化。
关键词
白藜芦醇
肌成纤维细胞
肾纤维化
蛋白激酶B磷酸化
Keywords
resveratrol
myofibroblasts
renal fibrosis
protein kinase B
分类号
R692 [医药卫生—泌尿科学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
白藜芦醇抑制蛋白激酶B磷酸化缓解大鼠肌成纤维细胞形成及肾纤维化
林周豪
白永恒
陆红
郭勇
吴存造
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2019
2
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