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基于常规引物靶向结核分枝杆菌Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位的恒温扩增
1
作者
吴康
屈蓉
+4 位作者
王刚
薛清华
吕建新
Douglas BLowrie
范小勇
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期799-808,共10页
目的探讨基于特异常规引物(即引物不需折叠成特定二级结构)靶向恒温扩增重复DNA序列的方法,并测试其检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)的可能性。方法以合成的重复DNA或以抽提的细菌基因组DNA为模板,用Bst 2.0 WarmStar...
目的探讨基于特异常规引物(即引物不需折叠成特定二级结构)靶向恒温扩增重复DNA序列的方法,并测试其检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)的可能性。方法以合成的重复DNA或以抽提的细菌基因组DNA为模板,用Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶进行恒温扩增。用琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果。结果合成的重复DNA可用其特异常规引物进行恒温扩增。进一步,Mtb H37Rv Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位(mycobacterial interspersed repetitive units,MIRUs)可用其特异常规引物对(即Ⅱ_MIRU-F和Ⅱ_MIRU-R)或单引物(即Ⅱ_MIRU-F)进行恒温扩增。相比于非分枝杆菌菌株、非结核分枝杆菌菌株、Mtb复合物菌株和临床分离株,Ⅱ_MIRU-F能够高特异地扩增Mtb菌株。Ⅱ_MIRU-F针对Mtb H37Rv基因组DNA的检测下限较高,且不能特异地区分Mtb阴性痰液样本和Mtb阳性痰液样本。结论常规引物可恒温扩增重复DNA序列(包括MtbⅡ型MIRUs);MtbⅡ型MIRUs特异引物Ⅱ_MIRU-F不适合用于痰液样本的检测。
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关键词
恒温扩增
重复DNA
结核分枝杆菌
Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位
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职称材料
吡非尼酮对舰船烟雾所致吸入性肺损伤大鼠的防护作用
被引量:
2
2
作者
段欣欣
王成彬
+1 位作者
韩志海
吕建新
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期441-448,共8页
目的探讨吡非尼酮(PFD)对舰船烟雾所致吸入性肺损伤大鼠的防护作用。方法将健康成年雄性Wistar大鼠放入自制发烟装置,吸入舰船烟雾15 min建立吸入性肺损伤大鼠模型。吸入烟雾前30 min,正常对照组大鼠和烟雾吸入损伤组分别ip含5%二甲亚...
目的探讨吡非尼酮(PFD)对舰船烟雾所致吸入性肺损伤大鼠的防护作用。方法将健康成年雄性Wistar大鼠放入自制发烟装置,吸入舰船烟雾15 min建立吸入性肺损伤大鼠模型。吸入烟雾前30 min,正常对照组大鼠和烟雾吸入损伤组分别ip含5%二甲亚砜的生理盐水2 mL,PFD组ip PFD300 mg·kg^(-1)(溶于5%二甲亚砜的生理盐水)2 mL。分别于12,24和48 h每组各取6只大鼠,腹主动脉取血,检测动脉血气。双抗体夹心法检测白细胞介素6(IL-6)、IL-17和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;取右肺前叶,计算肺含水率;留取右肺中叶,检测肺组织中丙二醛(MDA)含量;取右肺下叶经4%甲醛固定后做病理切片,苏木精-伊红染色,光镜观察。结果与正常对照组比,舰船烟雾吸入损伤暴露后12,24和48 h,烟雾吸入损伤组各时相点O_2分压(paO_2)降低,CO_2分压(paCO_2)升高(P<0.05),肺含水率水平升高(P<0.05),血清中IL-6,IL-17和TNF-α水平升高(P<0.05),肺组织匀浆中MDA含量增加(P<0.05)。与烟雾吸入损伤组相比,PFD组大鼠动脉血中paO_2水平升高,paCO_2及肺含水率降低(P<0.05),大鼠血清中IL-6,IL-17和TNF-α水平降低,组织中MDA含量降低(P<0.05)。病理观察可见,PFD组较舰船烟雾吸入损伤组肺组织水肿减轻,肺泡腔渗出及炎症细胞浸润减少。结论 PFD可通过抑制IL-6等相关炎症因子的释放减轻舰船烟雾致大鼠吸入性肺损伤。
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关键词
吡非尼酮
烟雾吸入损伤
吸入性肺损伤
炎症反应
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职称材料
题名
基于常规引物靶向结核分枝杆菌Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位的恒温扩增
1
作者
吴康
屈蓉
王刚
薛清华
吕建新
Douglas BLowrie
范小勇
机构
上海市(复旦
大学
附属)公共卫生临床中心
温州医科大学检验医学院和生命科学学院
出处
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第6期799-808,共10页
基金
国家重点研发计划(2018YFD0500900)
国家科技重大专项(2018ZX10731301,2018ZX10302301)
上海市科委医学引导项目(18411970700)。
文摘
目的探讨基于特异常规引物(即引物不需折叠成特定二级结构)靶向恒温扩增重复DNA序列的方法,并测试其检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)的可能性。方法以合成的重复DNA或以抽提的细菌基因组DNA为模板,用Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶进行恒温扩增。用琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果。结果合成的重复DNA可用其特异常规引物进行恒温扩增。进一步,Mtb H37Rv Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位(mycobacterial interspersed repetitive units,MIRUs)可用其特异常规引物对(即Ⅱ_MIRU-F和Ⅱ_MIRU-R)或单引物(即Ⅱ_MIRU-F)进行恒温扩增。相比于非分枝杆菌菌株、非结核分枝杆菌菌株、Mtb复合物菌株和临床分离株,Ⅱ_MIRU-F能够高特异地扩增Mtb菌株。Ⅱ_MIRU-F针对Mtb H37Rv基因组DNA的检测下限较高,且不能特异地区分Mtb阴性痰液样本和Mtb阳性痰液样本。结论常规引物可恒温扩增重复DNA序列(包括MtbⅡ型MIRUs);MtbⅡ型MIRUs特异引物Ⅱ_MIRU-F不适合用于痰液样本的检测。
关键词
恒温扩增
重复DNA
结核分枝杆菌
Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位
Keywords
isothermal amplification
repetitive DNA
Mycobacterium tuberculosis
type Ⅱ mycobacterial interspersed repetitive units
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
吡非尼酮对舰船烟雾所致吸入性肺损伤大鼠的防护作用
被引量:
2
2
作者
段欣欣
王成彬
韩志海
吕建新
机构
温州医科大学检验医学院和生命科学学院
解放军总医院
检验
科
海军总医院呼吸与危重症
医学
科
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期441-448,共8页
文摘
目的探讨吡非尼酮(PFD)对舰船烟雾所致吸入性肺损伤大鼠的防护作用。方法将健康成年雄性Wistar大鼠放入自制发烟装置,吸入舰船烟雾15 min建立吸入性肺损伤大鼠模型。吸入烟雾前30 min,正常对照组大鼠和烟雾吸入损伤组分别ip含5%二甲亚砜的生理盐水2 mL,PFD组ip PFD300 mg·kg^(-1)(溶于5%二甲亚砜的生理盐水)2 mL。分别于12,24和48 h每组各取6只大鼠,腹主动脉取血,检测动脉血气。双抗体夹心法检测白细胞介素6(IL-6)、IL-17和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;取右肺前叶,计算肺含水率;留取右肺中叶,检测肺组织中丙二醛(MDA)含量;取右肺下叶经4%甲醛固定后做病理切片,苏木精-伊红染色,光镜观察。结果与正常对照组比,舰船烟雾吸入损伤暴露后12,24和48 h,烟雾吸入损伤组各时相点O_2分压(paO_2)降低,CO_2分压(paCO_2)升高(P<0.05),肺含水率水平升高(P<0.05),血清中IL-6,IL-17和TNF-α水平升高(P<0.05),肺组织匀浆中MDA含量增加(P<0.05)。与烟雾吸入损伤组相比,PFD组大鼠动脉血中paO_2水平升高,paCO_2及肺含水率降低(P<0.05),大鼠血清中IL-6,IL-17和TNF-α水平降低,组织中MDA含量降低(P<0.05)。病理观察可见,PFD组较舰船烟雾吸入损伤组肺组织水肿减轻,肺泡腔渗出及炎症细胞浸润减少。结论 PFD可通过抑制IL-6等相关炎症因子的释放减轻舰船烟雾致大鼠吸入性肺损伤。
关键词
吡非尼酮
烟雾吸入损伤
吸入性肺损伤
炎症反应
Keywords
pirfenidone
smoke inhalation injury
inhalation lung injury
inflammatory reaction
分类号
R979.5 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于常规引物靶向结核分枝杆菌Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位的恒温扩增
吴康
屈蓉
王刚
薛清华
吕建新
Douglas BLowrie
范小勇
《复旦学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
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职称材料
2
吡非尼酮对舰船烟雾所致吸入性肺损伤大鼠的防护作用
段欣欣
王成彬
韩志海
吕建新
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
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