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三七总皂苷通过ADAM10/Notch3信号通路干预大鼠PASMCs增殖
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作者 黄曼 白相书 +5 位作者 田云娜 徐俊鹏 王肖婷 张赛 袁琳波 王万铁 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第4期487-492,共6页
目的:探讨在野百合碱(MCT)作用下三七总皂苷(PNS)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的干预作用及其机制。方法:体外培养的PASMCs随机分为正常对照(Control)组、野百合碱(MCT)组、三七总皂苷(PNS)组、敲低(M+Si ADAM10)组、敲低后处理(... 目的:探讨在野百合碱(MCT)作用下三七总皂苷(PNS)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的干预作用及其机制。方法:体外培养的PASMCs随机分为正常对照(Control)组、野百合碱(MCT)组、三七总皂苷(PNS)组、敲低(M+Si ADAM10)组、敲低后处理(M+P+Si ADAM10)组、过表达(M+OE ADAM10)组和过表达后处理(M+P+OE ADAM10)组。造模结束后,采用CCK-8法测各组细胞活力;蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)、细胞神经源性基因座notch同源蛋白-3(Notch3)蛋白的表达情况。结果:在MCT作用下,PASMCs活力显著增强(P<0.05或P<0.01);0~400 mg/L的PNS对正常细胞活力无毒性,100 mg/L的PNS可显著抑制MCT诱导的细胞活力(P<0.01)。在敲低ADAM10后PASMCs活力显著减弱(P<0.01),PCNA蛋白表达明显下降(P<0.05),尤以M+P+Si ADAM10组为著;ADAM10、Notch3蛋白表达均显著下降(P<0.05或P<0.01),尤以M+P+Si ADAM10组为著。过表达ADAM10后PASMCs活力显著增强(P<0.01),PCNA蛋白表达明显增高(P<0.01),M+P+OE ADAM10组PCNA值稍偏高(P>0.05),ADAM10、Notch3蛋白表达均显著升高(P<0.05);而过表达ADAM10的同时使用PNS的PASMCs与敲低ADAM10的PASMCs相比,PCNA蛋白表达显著下降(P<0.01),ADAM10、Notch3蛋白表达不同程度降低(P>0.05)。结论:PNS可能通过抑制ADAM10/Notch3信号通路,减弱大鼠MCT诱导的PASMCs增殖。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 三七总皂苷 野百合碱 ADAM10/Notch3通路 大鼠
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GYY4137通过调控糖酵解-细胞焦亡抑制低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖 被引量:1
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作者 贾旭广 田云娜 +6 位作者 骆珍珍 黄曼 徐俊鹏 王肖婷 石璐 袁琳波 王万铁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2328-2335,共8页
目的:探讨外源性硫化氢供体GYY4137对低氧(hypoxia)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs的作用及其机制。方法:取生长状态良好的大鼠PASMCs,在细胞密度为60%~70%时,饥饿处理24 h。随机将细胞分成4组:正常对照组、正常+GYY4137组、低氧组... 目的:探讨外源性硫化氢供体GYY4137对低氧(hypoxia)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs的作用及其机制。方法:取生长状态良好的大鼠PASMCs,在细胞密度为60%~70%时,饥饿处理24 h。随机将细胞分成4组:正常对照组、正常+GYY4137组、低氧组和低氧+GYY4137组。通过CCK-8检测GYY4137对正常细胞无影响的安全浓度范围,并进一步检测GYY4137抑制低氧诱导的PASMCs增殖的最适浓度;EdU染色法检测各组PASMCs的增殖情况;Western blot检测各组PASMCs中增殖细胞核抗原(PCNA)及糖酵解和细胞焦亡相关蛋白的表达情况;乳酸试剂盒检测各组PASMCs的乳酸含量;免疫荧光法检测各组PASMCs中己糖激酶2(HK2)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达情况;ELISA法检测各组PASMCs中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的含量。结果:GYY4137抑制低氧诱导的PAMSCs的有效浓度为100μmol/L(P<0.05)。与低氧组相比,低氧+GYY4137组PCNA蛋白表达显著下降(P<0.05),PAMSCs增殖显著减少(P<0.01),HK2和丙酮酸激酶M2(PKM2)蛋白表达均显著下降(P<0.05,P<0.01),丙酮酸脱氢酶(PDH)蛋白表达显著上升(P<0.05),乳酸含量显著降低(P<0.01),细胞焦亡相关蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01),免疫荧光显示HK2与NLRP3表达显著降低(P<0.01),ELISA试剂盒检测结果显示IL-1β和IL-18含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:GYY4137通过调控糖酵解-细胞焦亡抑制低氧诱导的大鼠PASMCs增殖。 展开更多
关键词 硫化氢 GYY4137 肺动脉高压 糖酵解 细胞焦亡 低氧
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