期刊文献+
共找到1篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
兔抗细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体的制备及鉴定
1
作者 叶晓鲜 董海艳 +4 位作者 王昱 陈争珍 李军伟 韦玉兵 张丽芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期742-747,共6页
目的 制备兔抗重组细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体并进行鉴定。方法 合成并构建pET21a(+)-CDK6重组质粒,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经SDS-PAGE及Western blot法... 目的 制备兔抗重组细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体并进行鉴定。方法 合成并构建pET21a(+)-CDK6重组质粒,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经SDS-PAGE及Western blot法检测蛋白表达;用镍氮川三乙酸(Ni-NTA)亲和层析柱纯化,SDS-PAGE分析;纯化后的CDK6蛋白多部位、多次(隔周)免疫日本大耳白兔,分别于免疫的0、 2、 4、 6周取血,分离血清。采用间接ELISA检测效价,Western blot法、免疫荧光细胞化学染色和免疫组织化学染色法检测其特异性。结果 表达并获得高纯度的CDK6蛋白,制备了兔抗CDK6重组蛋白抗体,其效价达1∶30 000,能特异性识别宫颈癌细胞及宫颈癌组织中表达的CDK6蛋白。结论 成功制备了高效价、特异性强的兔抗CDK6抗体。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6) 重组蛋白 基因表达 血清抗体
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部