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Sonic hedgehog信号通路在单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中的表达变化及意义 被引量:10
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作者 白永恒 陆红 +5 位作者 周琴 林成成 梁勇 洪炜龙 郑少玲 陈必成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2227-2232,共6页
目的:探讨Sonic hedgehog(Shh)信号通路在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织中的表达变化及意义。方法:将48只SD大鼠随机分为UUO模型组(n=24)和假手术组(n=24),梗阻术3、7和14 d后取其梗阻侧肾脏组织。用HE和Masson染色检测肾间质纤维化程... 目的:探讨Sonic hedgehog(Shh)信号通路在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织中的表达变化及意义。方法:将48只SD大鼠随机分为UUO模型组(n=24)和假手术组(n=24),梗阻术3、7和14 d后取其梗阻侧肾脏组织。用HE和Masson染色检测肾间质纤维化程度,免疫组织化学染色检测Shh通路分子Shh、Ptch1、Smo、Gli1及Ⅲ型胶原的蛋白表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肾组织中TGF-β1和Shh含量,real-time RT-PCR检测TGF-β1、I和Ⅲ型胶原及Shh通路分子mRNA表达。结果:HE和Masson染色显示,梗阻侧肾组织出现明显的纤维化病变,且随时间延长而加剧。TGF-β1、I和Ⅲ型胶原含量在梗阻肾中表达明显增高(P<0.05)。同时,Shh信号通路分子Shh、Smo和Gli mRNA和蛋白在梗阻肾中表达明显升高(P<0.05),而Ptch1 mRNA和蛋白的表达下调(P<0.01),提示Shh信号被激活。相关分析表明,Shh信号起始信号Shh水平的升高与TGF-β1含量增加呈明显的相关。结论:UUO大鼠诱导肾间质纤维化发生过程中,Shh信号通路分子被激活,推测可能的机制是活化的Shh信号通路诱导TGF-β1表达和释放,导致肾间质纤维化。 展开更多
关键词 Sonic HEDGEHOG 单侧输尿管梗阻 转化生长因子Β
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曲古抑菌素A对细胞PANC-1株凋亡和肿瘤转移相关基因表达的影响 被引量:4
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作者 杨云秀 胡孙宽 +6 位作者 叶星照 白永恒 王斯璐 刘彪 王本泉 陈必成 陈宗静 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期624-629,共6页
目的探讨曲古抑菌素A(TSA)诱导胰腺癌细胞PANC-1细胞凋亡机制。方法 TSA 0.1~0.6μmol.L-1培养PANC-1细胞0~48 h,MTT法检测细胞存活率并计算IC50。TSA 0.4μmol.L-1PANC-1培养0~48 h,Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化。TSA 0.4μ... 目的探讨曲古抑菌素A(TSA)诱导胰腺癌细胞PANC-1细胞凋亡机制。方法 TSA 0.1~0.6μmol.L-1培养PANC-1细胞0~48 h,MTT法检测细胞存活率并计算IC50。TSA 0.4μmol.L-1PANC-1培养0~48 h,Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化。TSA 0.4μmol.L-1PANC-1培养0~12 h,检测胱天蛋白酶3活性。TSA 0.4μmol.L-1与PANC-1培养24 h,实时定量PCR检测c-myc,p53,Bcl-2,Bax,存活素,基质金属蛋白酶1(MMP1)和基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)和Notch-1基因的表达。TSA 0.4和0.6μmol.L-1与PANC-1培养24 h,细胞免疫化学方法检测Notch-1蛋白的胞内活性形式NICD表达。结果TSA可以明显抑制PANC-1细胞增殖,12,24和48 h的IC50值分别为0.42,0.32和0.19μmol.L-1,具有量效(r=0.640,P=0.01)和时效(r=0.768,P=0.002)关系。Hoechst 33258染色结果表明,TSA 0.4μmol.L-1增加PANC-1细胞核的蓝色荧光并出现凋亡特征。TSA 0.4μmol.L-1作用4,8和12 h后,胱天蛋白酶3的活性分别为正常对照组的1.62±0.12,2.68±0.17和(3.92±0.23)倍。PCR结果显示,TSA 0.4μmol.L-1作用24 h后,p53,c-myc和存活素mRNA表达下降,分别为对照组的(18.3±5.1)%,(24.2±0.9)%和(15.8±1.0)%,Bcl-2和Notch-1 mRNA未见明显变化,而Bax,MMP1和TIMP-1 mRNA升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低到正常对照组的(13.0±2.8)%。Notch-1活性分子NICD明显升高(P<0.05)。结论TSA可通过线粒体途径诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡,而且使Notch-1激活,促进转移相关基因表达。 展开更多
关键词 曲古抑菌素A 胰腺癌 细胞凋亡 NOTCH通路
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结肠癌中RHAMM与ERK2的表达及其与临床病理特征的关系 被引量:2
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作者 郑建建 朱方超 +4 位作者 杨宇 刘乐平 孙国羊 谢辉 陈必成 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第10期1760-1762,共3页
目的:探讨透明质酸介导运动的受体(receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)和ERK2(extracellular signal-regulated kinase)在结肠癌组织中表达及其与临床病理因素的关系,评估其在结肠癌诊断及预后中的价值。方法:收集我院... 目的:探讨透明质酸介导运动的受体(receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)和ERK2(extracellular signal-regulated kinase)在结肠癌组织中表达及其与临床病理因素的关系,评估其在结肠癌诊断及预后中的价值。方法:收集我院结肠癌患者标本30例及其相应癌旁组织,通过real-timePCR对RHAMM和ERK2进行检测。结果:RHAMM和ERK2在结肠癌组织较癌旁组织表达均明显升高(P<0.001),且两者表达在低分化、中分化和高分化3组组间差异无显著性(P=0.222和P=0.173),但都与是否发生淋巴结转移有关(P=0.01和P<0.001);两者表达具有一定相关性(P=0.009,r=0.465)。结论:结肠癌中的RHAMM和ERK2表达都高于正常组织,且两者表达有相关性,RHAMM可能通过Ras-ERK途径参与了结肠癌的发生、进展及转移,RHAMM和ERK2可作为患者诊断和预后的参考指标之一。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 RHAMM ERK2 realtime-PCR
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西罗莫司阻断mTOR通路对大鼠肾纤维化的保护作用及其机制研究 被引量:1
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作者 陈必成 赵李昊 +7 位作者 张岩 杨梅 张行 梁勇 丁赛丹 杨亦荣 郑少玲 蔡明 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期849-854,共6页
目的研究西罗莫司(Sir)阻断哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对大鼠急性完全性梗阻所致肾脏纤维化的保护作用及其机制。方法健康雄性Wistar大鼠42只,随机分为3组(n=14)。单侧输尿管结扎组(UUO组):采用单侧输尿管结扎法建立大鼠肾纤维... 目的研究西罗莫司(Sir)阻断哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对大鼠急性完全性梗阻所致肾脏纤维化的保护作用及其机制。方法健康雄性Wistar大鼠42只,随机分为3组(n=14)。单侧输尿管结扎组(UUO组):采用单侧输尿管结扎法建立大鼠肾纤维化模型;Sir组:从建模前1d开始每日给予Sir 2mg/kg灌胃直至实验结束;假手术组:除结扎输尿管外其他过程同UUO组。分别于实验第7天和第14天处死大鼠,取梗阻肾脏,通过病理学观察比较各组肾脏及肾小管扩张程度,并测定肾盂内梗阻性尿液的钠、钾、钙离子浓度,同时采用免疫组化法观察细胞增殖核抗原(PCNA)的表达,TUNEL法观察细胞凋亡情况,定量PCR测定纤维化相关的microRNA分子mir-155、mir-143、mir-29c的表达情况。结果第7和第14天时,与对照组比较,UUO组和Sir组患侧肾脏均明显扩大,肾小管明显扩张,但Sir组患侧肾脏扩大程度明显小于UUO组(P<0.01),肾小管扩张程度低于UUO组(P<0.01)。与UUO组比较,Sir组肾小管损伤程度、间质渗出、肾脏纤维化程度均明显减轻,肾盂内尿液的钠、钾、钙离子浓度明显下降(P<0.05),PCNA阳性和凋亡细胞比例明显降低(P<0.001)。3组间比较mir-155、mir-143表达无明显差异,UUO组mir-29c表达下降,明显低于Sir组和假手术组(P<0.01),而Sir组与假手术组比较无明显差异。结论 Sir抑制mTOR通路可以显著延缓急性完全性梗阻所致的大鼠肾脏纤维化的进展。 展开更多
关键词 西罗莫司 纤维化 肾疾病 细胞增殖 细胞凋亡 微RNAS
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一种新型的纽扣式空肠造瘘模型 被引量:1
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作者 张波 郭会芳 +3 位作者 夏建福 周锋 陈必成 余震 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第8期1353-1356,共4页
目的:建立一种更加优越的空肠造瘘模型,为进一步深入研究肠内营养提供一种更好的手段。方法:设计纽扣式空肠造瘘管图样,以聚四氟乙烯和聚甲酯材料加工成该造瘘管,并定制一外径略小于造瘘管内径的双腔导管;以8条健康成年毕格犬为实验对象... 目的:建立一种更加优越的空肠造瘘模型,为进一步深入研究肠内营养提供一种更好的手段。方法:设计纽扣式空肠造瘘管图样,以聚四氟乙烯和聚甲酯材料加工成该造瘘管,并定制一外径略小于造瘘管内径的双腔导管;以8条健康成年毕格犬为实验对象,行术中空肠内插管术;术后1周左右行空肠造影观察造瘘管情况。结果:术后1周左右行空肠造影证明双腔导管始终伸向空肠远端,未发现造影剂返流至十二指肠的现象,8条实验犬均未出现肠梗阻症状,且术后造瘘管体外部分均保存完好,至截稿为止,平均保存在4个月以上。结论:该模型的成功建立,旨在为将来进一步深入研究肠内营养提供一种更好的手段,可能使肠内营养的研究结果更加准确。 展开更多
关键词 纽扣式空肠造瘘管 模型 肠内营养 空肠造影
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