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SARS冠状病毒核衣壳蛋白在酿酒酵母中的表达和纯化 被引量:1
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作者 杨雷 张洪勤 吴淑珍 《实用医学杂志》 CAS 2006年第23期2708-2710,共3页
目的:构建重组表达质粒pYES6-N,诱导SARS冠状病毒核衣壳蛋白(nucleocapsidprotein)在酿酒酵母中的表达和纯化。方法:逆转录获得SARS冠状病毒DNA片段,PCR获得核衣壳蛋白基因互相重叠的两部分片段,酶切连接成全长,在E.coliJM109中构建重... 目的:构建重组表达质粒pYES6-N,诱导SARS冠状病毒核衣壳蛋白(nucleocapsidprotein)在酿酒酵母中的表达和纯化。方法:逆转录获得SARS冠状病毒DNA片段,PCR获得核衣壳蛋白基因互相重叠的两部分片段,酶切连接成全长,在E.coliJM109中构建重组表达克隆pYES6-N,在酿酒酵母中诱导表达并纯化。结果:重组克隆pyes6-N经酶切、测序鉴定确定,插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致,获得一个完整的核衣壳蛋白基因,表达产物纯化后,电泳鉴定,相对分子质量近45000。结论:成功克隆SARS冠状病毒核衣壳蛋白基因全长,并在酿酒酵母中诱导表达成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 SARS病毒 核衣壳蛋白 RT—PCR 克隆 基因表达
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