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甲型副伤寒杆菌pagC基因分布及其重组表达产物免疫保护作用
被引量：
4
1
作者
张佳
范欣丽
+2 位作者
葛玉梅
严杰
孙爱华
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期171-176,231,共7页
目的:了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性,确定甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核重组表达产物rPagC免疫原性和保护作用。方法:采用PCR及其产物测序了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性。构建甲...
目的:了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性,确定甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核重组表达产物rPagC免疫原性和保护作用。方法:采用PCR及其产物测序了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性。构建甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提纯表达的rPagC。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测rPagC表达情况及其产量。采用免疫扩散法、ELISA和Western Blot鉴定其抗原性和免疫反应性。采用小鼠感染模型了解rPagC对甲型副伤寒杆菌感染的免疫保护效果,微量肥达试验检测rPagC免疫小鼠血清凝集伤寒和副伤寒沙门菌的效果。结果:所有被检测的甲型副伤寒沙门菌临床菌株均携带pagC基因,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达99.1%～100%和98.4%～100%。所构建的原核表达系统能高效表达rPagC。rPagC免疫家兔可产生高效价抗体并能与甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生阳性Western杂交信号。ELISA结果显示,97.1%(66/68)甲型副伤寒患者血清标本rPagC抗体阳性。100μg和200μg rPagC对感染小鼠的免疫保护率分别为73.3%(11/15)和86.7%(13/15)。rPagC免疫小鼠血清对甲型副伤寒沙门菌和伤寒沙门菌H抗原凝集效价高达1∶10～1∶40。结论:pagC基因在甲型副伤寒沙门菌株中分布广泛。rPagC有良好的免疫原性及较强的免疫保护作用,可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原。
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关键词
沙门菌
甲型副伤寒
免疫学
沙门菌
甲型副伤寒
遗传学
基因表达调控
细菌
重组
遗传
基因表达
pagC基因
重组表达
免疫原性
免疫保护性
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职称材料
肠道杆菌耐药性及其耐药相关Ⅰ类整合子可变区结构与进化
被引量：
2
2
作者
王欢
包其郁
+3 位作者
孙爱华
赵金方
葛玉梅
严杰
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期149-155,共7页
目的:了解大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌临床菌株耐药性,及其Ⅰ类整合子分布、可变区耐药基因盒与分子进化关系。方法:采用K-B法检测大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌对12种药物的敏感性。采用PCR及其产物测序检测上述菌...
目的:了解大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌临床菌株耐药性,及其Ⅰ类整合子分布、可变区耐药基因盒与分子进化关系。方法:采用K-B法检测大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌对12种药物的敏感性。采用PCR及其产物测序检测上述菌株中Ⅰ类整合子携带率及可变区耐药基因盒。采用Clustal X和MEGA软件分析Ⅰ类整合子基因盒中耐药基因分子进化关系。结果:鲍曼不动杆菌对临床常用青霉素类和头孢菌素类抗生素耐药率为54.2%～100%,大肠埃希菌和阴沟肠杆菌对菌素类抗生素耐药率也高达41.6%～62.5%。62.5%(15/24)大肠埃希菌、67.9%(19/28)阴沟肠杆菌、83.3%(20/24)鲍曼不动杆菌检出Ⅰ类整合子,81.5%(44/54)Ⅰ类整合子呈现为4种单条带谱型,其余为3种双条带谱型。Ⅰ类整合子可变区耐药基因盒中存在aac(6')、sad(3″)、aad(2″)、cat(4')和dfr(7、A13和15)耐药基因,可分别介导细菌对氨基糖苷类、氯霉素和磺胺类抗生素耐药。根据二氢叶酸还原酶基因序列差异,上述菌株携带的Ⅰ类整合子可分成4个分子进化组。结论:上述肠道杆菌耐药情况严重并携带高含多种耐药基因盒的Ⅰ类整合子,Ⅰ类整合子有4条不同的进化途径。
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关键词
肠杆菌属
药物作用
鲍氏不动杆菌
药物作用
埃希氏菌属
药物作用
抗药性
细菌
肠道杆菌
耐药
整合子
耐药基因盒
进化
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职称材料
发酵、梨支原体感染小鼠小肠黏膜和胰腺组织细胞电镜观察
被引量：
1
3
作者
管瑜
沈丹丹
周丽萍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期361-365,共5页
目的探讨发酵支原体(Mycoplasma fermentans,Mf)和梨支原体(Mycoplasma pirum,Mpi)感染致死小鼠小肠黏膜和胰腺组织细胞超微结构病理改变。方法 35只清洁级ICR小鼠,隔日腹腔注射环磷酰胺(50mg/kg.d)5次制成免疫抑制模型。分为Mf、Mpi感...
目的探讨发酵支原体(Mycoplasma fermentans,Mf)和梨支原体(Mycoplasma pirum,Mpi)感染致死小鼠小肠黏膜和胰腺组织细胞超微结构病理改变。方法 35只清洁级ICR小鼠,隔日腹腔注射环磷酰胺(50mg/kg.d)5次制成免疫抑制模型。分为Mf、Mpi感染组(n=12)和生理盐水(NS)对照组(n=11),分别腹腔注射0.3mL标准菌株Mf、Mpi(6×108-9/mL)和无菌生理盐水,计算各组死亡率,取小鼠血液进行支原体再培养以及感染12h、6d后取小肠黏膜和胰腺组织超微结构观察。结果免疫抑制小鼠Mf或Mpi感染6d后,全部死亡,支原体再培养阳性。电镜观察显示:Mf或Mpi感染12h后,小肠黏膜和胰腺组织细胞即表现超微结构病理改变,感染6d后,小肠黏膜组织细胞显著水肿,肿胀,线粒体空泡,胰腺细胞线粒体空泡,酶原颗粒变小,细胞变性、坏死,与NS组比较差异显著,且胰腺组织细胞病理改变比小肠黏膜明显。结论发酵支原体或梨支原体感染小鼠12h后,小肠黏膜和胰腺组织细胞即表现超微结构病理改变,6d后出现细胞水肿、变性及坏死。且胰腺组织细胞病理改变比小肠黏膜组织细胞更明显。
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关键词
发酵支原体
梨支原体
电镜
胰腺
小肠黏膜
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职称材料
题名
甲型副伤寒杆菌pagC基因分布及其重组表达产物免疫保护作用
被引量：
4
1
作者
张佳
范欣丽
葛玉梅
严杰
孙爱华
机构
温州医学院检验医学院和生命科学学院
浙江
医学
高等专
科学
校
浙江大学
医学院
病原生物学系
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期171-176,231,共7页
基金
浙江省卫生高层次创新人才培养工程资助项目(2012-241)
浙江省医药卫生科学研究基金资助项目(2011KYB006)
文摘
目的:了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性,确定甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核重组表达产物rPagC免疫原性和保护作用。方法:采用PCR及其产物测序了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性。构建甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提纯表达的rPagC。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测rPagC表达情况及其产量。采用免疫扩散法、ELISA和Western Blot鉴定其抗原性和免疫反应性。采用小鼠感染模型了解rPagC对甲型副伤寒杆菌感染的免疫保护效果,微量肥达试验检测rPagC免疫小鼠血清凝集伤寒和副伤寒沙门菌的效果。结果:所有被检测的甲型副伤寒沙门菌临床菌株均携带pagC基因,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达99.1%～100%和98.4%～100%。所构建的原核表达系统能高效表达rPagC。rPagC免疫家兔可产生高效价抗体并能与甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生阳性Western杂交信号。ELISA结果显示,97.1%(66/68)甲型副伤寒患者血清标本rPagC抗体阳性。100μg和200μg rPagC对感染小鼠的免疫保护率分别为73.3%(11/15)和86.7%(13/15)。rPagC免疫小鼠血清对甲型副伤寒沙门菌和伤寒沙门菌H抗原凝集效价高达1∶10～1∶40。结论:pagC基因在甲型副伤寒沙门菌株中分布广泛。rPagC有良好的免疫原性及较强的免疫保护作用,可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原。
关键词
沙门菌
甲型副伤寒
免疫学
沙门菌
甲型副伤寒
遗传学
基因表达调控
细菌
重组
遗传
基因表达
pagC基因
重组表达
免疫原性
免疫保护性
Keywords
Salmonella paratyphi A/immunology
Salmonella paratyphi A/genetics
Gene expression regulation, bacterial
Recombination, genetic
Gene expression
pagC gene
Recombinant expression
Immunogenicity
Immunoprotection
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
肠道杆菌耐药性及其耐药相关Ⅰ类整合子可变区结构与进化
被引量：
2
2
作者
王欢
包其郁
孙爱华
赵金方
葛玉梅
严杰
机构
浙江省人民医院
检验
科
温州医学院检验医学院和生命科学学院
浙江
医学
高等专
科学
校
浙江中医药大学附属第一医院
检验
科
浙江大学
医学院
病原生物学系
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期149-155,共7页
基金
浙江省自然科学基金资助项目(LY12H19002)
浙江省医药卫生科技计划资助项目(2011KYA005)
文摘
目的:了解大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌临床菌株耐药性,及其Ⅰ类整合子分布、可变区耐药基因盒与分子进化关系。方法:采用K-B法检测大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌对12种药物的敏感性。采用PCR及其产物测序检测上述菌株中Ⅰ类整合子携带率及可变区耐药基因盒。采用Clustal X和MEGA软件分析Ⅰ类整合子基因盒中耐药基因分子进化关系。结果:鲍曼不动杆菌对临床常用青霉素类和头孢菌素类抗生素耐药率为54.2%～100%,大肠埃希菌和阴沟肠杆菌对菌素类抗生素耐药率也高达41.6%～62.5%。62.5%(15/24)大肠埃希菌、67.9%(19/28)阴沟肠杆菌、83.3%(20/24)鲍曼不动杆菌检出Ⅰ类整合子,81.5%(44/54)Ⅰ类整合子呈现为4种单条带谱型,其余为3种双条带谱型。Ⅰ类整合子可变区耐药基因盒中存在aac(6')、sad(3″)、aad(2″)、cat(4')和dfr(7、A13和15)耐药基因,可分别介导细菌对氨基糖苷类、氯霉素和磺胺类抗生素耐药。根据二氢叶酸还原酶基因序列差异,上述菌株携带的Ⅰ类整合子可分成4个分子进化组。结论:上述肠道杆菌耐药情况严重并携带高含多种耐药基因盒的Ⅰ类整合子,Ⅰ类整合子有4条不同的进化途径。
关键词
肠杆菌属
药物作用
鲍氏不动杆菌
药物作用
埃希氏菌属
药物作用
抗药性
细菌
肠道杆菌
耐药
整合子
耐药基因盒
进化
Keywords
Enterobacter/drug effects
Acinetobacter baumannii/drug effects
Escherichia/drug effects
Drug resistance, bacterial
Enteric bacilli
Drug resistance
Integron
Drug resistance gene cassette
Evolution
分类号
R378.2 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
发酵、梨支原体感染小鼠小肠黏膜和胰腺组织细胞电镜观察
被引量：
1
3
作者
管瑜
沈丹丹
周丽萍
机构
温州医学院检验医学院和生命科学学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期361-365,共5页
基金
温州市科技计划项目(Y20110107)~~
文摘
目的探讨发酵支原体(Mycoplasma fermentans,Mf)和梨支原体(Mycoplasma pirum,Mpi)感染致死小鼠小肠黏膜和胰腺组织细胞超微结构病理改变。方法 35只清洁级ICR小鼠,隔日腹腔注射环磷酰胺(50mg/kg.d)5次制成免疫抑制模型。分为Mf、Mpi感染组(n=12)和生理盐水(NS)对照组(n=11),分别腹腔注射0.3mL标准菌株Mf、Mpi(6×108-9/mL)和无菌生理盐水,计算各组死亡率,取小鼠血液进行支原体再培养以及感染12h、6d后取小肠黏膜和胰腺组织超微结构观察。结果免疫抑制小鼠Mf或Mpi感染6d后,全部死亡,支原体再培养阳性。电镜观察显示:Mf或Mpi感染12h后,小肠黏膜和胰腺组织细胞即表现超微结构病理改变,感染6d后,小肠黏膜组织细胞显著水肿,肿胀,线粒体空泡,胰腺细胞线粒体空泡,酶原颗粒变小,细胞变性、坏死,与NS组比较差异显著,且胰腺组织细胞病理改变比小肠黏膜明显。结论发酵支原体或梨支原体感染小鼠12h后,小肠黏膜和胰腺组织细胞即表现超微结构病理改变,6d后出现细胞水肿、变性及坏死。且胰腺组织细胞病理改变比小肠黏膜组织细胞更明显。
关键词
发酵支原体
梨支原体
电镜
胰腺
小肠黏膜
Keywords
Mycoplasma fermentans
Mycoplasma pirum
electron microscope
pancreas
intestinal mucosa
分类号
R375 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甲型副伤寒杆菌pagC基因分布及其重组表达产物免疫保护作用
张佳
范欣丽
葛玉梅
严杰
孙爱华
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
4
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职称材料
2
肠道杆菌耐药性及其耐药相关Ⅰ类整合子可变区结构与进化
王欢
包其郁
孙爱华
赵金方
葛玉梅
严杰
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
3
发酵、梨支原体感染小鼠小肠黏膜和胰腺组织细胞电镜观察
管瑜
沈丹丹
周丽萍
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
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