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温州海产贝类单核细胞增生李斯特菌的污染检查 被引量:4
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作者 诸葛青云 胡昕 +3 位作者 潘长旺 梁韶晖 黄慧聪 谭峰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期611-612,共2页
目的了解温州市海洋贝类单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)的污染状况。方法 2009年7月在温州沿海地区抽取贝类样品进行微生物检测。结果在100份样品中,Lm阳性3份,占总数的3.00%。结论温州市海洋贝类已受到Lm的污染,应... 目的了解温州市海洋贝类单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)的污染状况。方法 2009年7月在温州沿海地区抽取贝类样品进行微生物检测。结果在100份样品中,Lm阳性3份,占总数的3.00%。结论温州市海洋贝类已受到Lm的污染,应加强卫生监督。 展开更多
关键词 海洋污染 贝类 单核细胞增生李斯特菌
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温州水牛遗传多样性的ISSR-PCR分析
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作者 王金丹 管敏强 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期733-738,共6页
为研究浙江省温州水牛的遗传多样性,采用ISSR分子标记技术,分析了采自浙江平阳、瑞安、永嘉、乐清、温州等地温州水牛血液样本。从22条引物中筛选出9条多态性引物,9条ISSR引物共获得ISSR位点186个,其中多态性位点154个,多态位点百分率(P... 为研究浙江省温州水牛的遗传多样性,采用ISSR分子标记技术,分析了采自浙江平阳、瑞安、永嘉、乐清、温州等地温州水牛血液样本。从22条引物中筛选出9条多态性引物,9条ISSR引物共获得ISSR位点186个,其中多态性位点154个,多态位点百分率(PPL)为82.80%,等位基因数(Na)为1.8420,有效等位基因数(Ne)为1.5702,Nei's基因多样性(H)为0.3108,Shannon's指数(I)为0.4687,均高于个体水平;种群内和种群间Nei's基因多样性计算遗传分化水平(Gst)为0.1840,表明温州水牛种群间存在着较高的遗传多样性,遗传变异中有18.40%发生于群体间。UPGMA聚类分析结果同样也表明温州水牛种群间的遗传分化水平较低,遗传变异主要存在于种群的个体间。 展开更多
关键词 温州水牛 ISSR标记 遗传结构 遗传分化 遗传多样性
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温州地区2型糖尿病患者线粒体DNA3243、3316位点的突变筛查 被引量:8
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作者 赵晶 季敬璋 +3 位作者 汪大望 张洁 吴惠洁 吕建新 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1206-1212,共7页
为了解浙江省温州地区2型糖尿病病人中线粒体DNAtRNALeu(UUR)基因A3243G及NADH脱氢酶亚单位1(ND1)基因G3316A位点突变的发生频率,并探讨突变与2型糖尿病主要临床指标出现的相关性。对随机收集的无血缘关系的244例温州地区2型糖尿病患者... 为了解浙江省温州地区2型糖尿病病人中线粒体DNAtRNALeu(UUR)基因A3243G及NADH脱氢酶亚单位1(ND1)基因G3316A位点突变的发生频率,并探讨突变与2型糖尿病主要临床指标出现的相关性。对随机收集的无血缘关系的244例温州地区2型糖尿病患者进行研究,同时选择156例无DM家族史的糖耐量正常者作为对照组,用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性分析技术进行点突变筛选,筛选到的异质性突变样本经T-A克隆后再作测序和变性高效液相色谱(DHPLC)确证。结果在244例的2型糖尿病患者中检出A3243G突变1例(0.410%),156例对照者中未检出该突变,突变发生率在两组间差异无统计学意义(P>0.05);2型糖尿病患者中检出G3316A突变4例(1.639%),156例对照者中检出突变2例(1.282%),突变发生率在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明线粒体tRNALeu(UUR)基因A3243G突变在浙江温州2型糖尿病人群中发生频率低,不是温州人群中2型糖尿病的常见病因。线粒体ND1基因G3316A突变在糖尿病人群中的发生频率也较低,且在正常人群中也有出现,可能仅为人群中线粒体DNA的基因多态性。 展开更多
关键词 2型糖尿病 线粒体DNA 点突变 多态性
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论检验科的人性化管理 被引量:2
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作者 高国栋 龚俊 +1 位作者 高国金 王小宁 《中国医学伦理学》 2008年第3期157-159,共3页
检验科的主要任务决定了必须加强自身人性化管理,真正做到以人为本,发挥团队精神,使每个人都有增长才干的机会,给予每位职工进行科研的便利,切实为病人做好服务,在管理过程中注重伦理思想的贯彻,才能实现检验科的人性化管理。同时,搞好... 检验科的主要任务决定了必须加强自身人性化管理,真正做到以人为本,发挥团队精神,使每个人都有增长才干的机会,给予每位职工进行科研的便利,切实为病人做好服务,在管理过程中注重伦理思想的贯彻,才能实现检验科的人性化管理。同时,搞好检验科的人性化管理,也需要加强与其他医疗部门的合作,以形成良好的工作关系。 展开更多
关键词 检验科 人性化管理 作用
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蝉拟青霉对大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞的激活作用 被引量:37
5
作者 陈秀芳 金丽琴 +2 位作者 吕建新 李东 李安乐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期694-697,共4页
目的 :探讨蝉拟青霉菌丝体水提取物对大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞的激活作用。方法 :大鼠随机分为4组 :正常对照组 (Ⅰ )、环磷酰胺组 (Ⅱ )、蝉拟青霉组 (Ⅲ )、环磷酰胺加蝉拟青霉组 (Ⅳ ) ,各组大鼠在同等条件下饲养 ,连续皮下注射相应药... 目的 :探讨蝉拟青霉菌丝体水提取物对大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞的激活作用。方法 :大鼠随机分为4组 :正常对照组 (Ⅰ )、环磷酰胺组 (Ⅱ )、蝉拟青霉组 (Ⅲ )、环磷酰胺加蝉拟青霉组 (Ⅳ ) ,各组大鼠在同等条件下饲养 ,连续皮下注射相应药物 2 6d。用生理盐水灌洗大鼠的腹腔和肺泡 ,收集腹腔与肺泡巨噬细胞 (PMΦ、AMΦ) 37℃培养 2h ,用生化方法测定巨噬细胞内酸性磷酸酶 (ACP)和乳酸脱氢酶 (LDH)的活力 ,并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。结果 :蝉拟青霉菌丝体水提取物使正常大鼠PMΦ、AMΦ内ACP、LDH活力显著升高 ,并能拮抗由于使用环磷酰胺所致的降低作用 ;而且能显著增强大鼠PMΦ、AMΦ的吞噬能力。结论 :蝉拟青霉对腹腔。 展开更多
关键词 腹腔 肺泡 激活作用 蝉拟青霉 环磷酰胺 巨噬细胞 酸性磷酸酶 蝉花
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闽浙地区香鱼线粒体Cytb基因和D-loop区序列多态性分析 被引量:30
6
作者 李娜 陈少波 +2 位作者 谢起浪 吕建新 管敏鑫 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期919-925,共7页
对浙江瑞安、福建宁德、福建东张水库3个地理群体共31例香鱼(Plecoglossus altivelis)的线粒体细胞色素b(Cyt b)基因和线粒体D-loop区序列进行了PCR扩增、序列测定、核苷酸组成和多态性分析。Cytb基因中,A、T、C和G4种核苷酸的比例分别... 对浙江瑞安、福建宁德、福建东张水库3个地理群体共31例香鱼(Plecoglossus altivelis)的线粒体细胞色素b(Cyt b)基因和线粒体D-loop区序列进行了PCR扩增、序列测定、核苷酸组成和多态性分析。Cytb基因中,A、T、C和G4种核苷酸的比例分别为19.72%、29.71%、32.25%和18.32%,A+T含量为49.43%,G+C含量为50.57%。D-loop区序列中,A、T、C和G4种核苷酸的比例分别为29.99%、29.29%、23.80%和16.92%,A+T含量为59.28%,G+C含量为40.72%。在长度为1141bp的Cytb基因序列中,仅存在1个变异位点,核苷酸多样性指数(π值)为0.00028,31个样本中仅出现两种单倍型;857 bp 长的D-loop区序列中,仅存在5个变异位点,核苷酸多样性指数(π值)为0.00199,仅出现5种单倍型。这表明闽浙地区香鱼的遗传多样性水平很低,应当加大对香鱼的保护力度。 展开更多
关键词 香鱼 细胞色素B基因 D—loop区 多态性 单倍型
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细脚拟青霉对大鼠腹腔巨噬细胞的激活作用 被引量:25
7
作者 吕建新 金丽琴 +3 位作者 陈国荣 邵黎明 陈希贤 陆永绥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期139-141,共3页
用细脚拟青霉给正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠灌胃21d,灌洗并培养腹腔巨噬细胞,用生化方法测定巨噬细胞内乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和精氨酸酶的活性,并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。结果表明:细脚拟青霉可显著提高正常... 用细脚拟青霉给正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠灌胃21d,灌洗并培养腹腔巨噬细胞,用生化方法测定巨噬细胞内乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和精氨酸酶的活性,并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。结果表明:细脚拟青霉可显著提高正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠腹腔巨噬细胞内乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和精氨酸酶的活性,并增强巨噬细胞对中性红的摄取能力。提示:细脚拟青霉对腹腔巨噬细胞具有激活作用。 展开更多
关键词 细脚拟青霉 腹腔 巨噬细胞 激活作用
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银离子固相萃取-气相色谱法检测乳脂肪中的反式脂肪酸 被引量:15
8
作者 李蕊 徐小民 +3 位作者 李亚利 宋国良 韩见龙 任一平 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1168-1172,共5页
建立了分离反式油酸(C18∶1)、亚油酸(C18∶2)、亚麻酸(C18∶3)的银离子固相萃取-气相色谱(Ag+-SPE/GC)方法,并应用于乳脂肪中反式脂肪酸的检测。采用自制的银离子固相萃取柱对样品进行预分离,总脂肪酸甲酯化后上样,依次经9mL甲苯-正己... 建立了分离反式油酸(C18∶1)、亚油酸(C18∶2)、亚麻酸(C18∶3)的银离子固相萃取-气相色谱(Ag+-SPE/GC)方法,并应用于乳脂肪中反式脂肪酸的检测。采用自制的银离子固相萃取柱对样品进行预分离,总脂肪酸甲酯化后上样,依次经9mL甲苯-正己烷(体积比5∶95)、8mL甲苯-正己烷(体积比17∶83)、6mL甲苯-乙酸乙酯(体积比17∶83)、10mL甲苯-乙酸乙酯(体积比30∶70)洗脱并分别收集洗脱液,采用气相色谱分别进行检测。结果显示,除了反式亚麻酸的回收率为69.9%~101.0%、相对标准偏差(RSD)为11.0%~18.1%外,其余的反式脂肪酸的回收率均为88.4%~107.2%、RSD为1.2%~11.9%。该方法通过特异性固相萃取的方法对样品进行前处理,较好地避免了样品中顺式及饱和脂肪酸对反式脂肪酸检测的干扰。 展开更多
关键词 银离子固相萃取 气相色谱法 反式脂肪酸 乳脂肪
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川芎嗪对肠粘膜屏障功能的保护作用 被引量:19
9
作者 王万铁 徐正衸 +3 位作者 林丽娜 王卫 李东 王宗敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期882-885,共4页
目的 :探讨川芎嗪对失血性休克再灌注后肠粘膜屏障功能的保护作用。方法 :30只日本大耳白兔随机分为 3组 :假手术组 (A组 ) ,单纯休克组 (B组 ) ,川芎嗪治疗组 (C组 )。以硫代巴比妥酸比色法、放射免疫法及硝酸还原酶法测定末端回肠粘... 目的 :探讨川芎嗪对失血性休克再灌注后肠粘膜屏障功能的保护作用。方法 :30只日本大耳白兔随机分为 3组 :假手术组 (A组 ) ,单纯休克组 (B组 ) ,川芎嗪治疗组 (C组 )。以硫代巴比妥酸比色法、放射免疫法及硝酸还原酶法测定末端回肠粘膜丙二醛 (MDA)、肿瘤坏死因子 (TNFα)、白细胞介素 - 1β(IL - 1β)及一氧化氮代谢产物(NO-2 /NO-3 )含量 ,并取体循环血做细菌培养 ,取肠粘膜行光镜和电镜观察。结果 :B组肠粘膜MDA、TNFα、IL - 1β含量明显高于A组 ,NO-2 /NO-3 浓度显著低于A组 ,而C组变化无显著 ;B组细菌移位率明显高于A组 ,而C组与A组比较无显著差异 ;B组肠粘膜损伤明显重于A组 ,C组明显轻于B组 ,而C组与A组差异无显著。结论 :川芎嗪能保护失血性休克再灌注后肠粘膜屏障功能 ,这可能与其清除体内氧自由基。 展开更多
关键词 肠粘膜 中草药 川芎嗪 屏障功能 保护作用 失血性休克
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不同年龄段非综合征性耳聋常见基因检测及临床表型分析 被引量:17
10
作者 张初琴 陈波蓓 +8 位作者 陈迎迎 刘学军 郑静 高金建 黄赛瑜 南奔宇 章誉耀 余啸 管敏鑫 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期352-358,共7页
为了探讨非综合征性耳聋易感基因检出率与年龄因素的相关性及其发病特点,文章收集了2006年4月~2012年4月在温州医学院附属第二医院就诊的215名非综合征性耳聋患者,按就诊年龄和发病年龄分别分为成人组(〉18岁)及未成人组,后者又分为... 为了探讨非综合征性耳聋易感基因检出率与年龄因素的相关性及其发病特点,文章收集了2006年4月~2012年4月在温州医学院附属第二医院就诊的215名非综合征性耳聋患者,按就诊年龄和发病年龄分别分为成人组(〉18岁)及未成人组,后者又分为婴幼儿组(0~3岁)、学龄前组(3~6岁)、学龄组(6~18岁),提取基因组DNA,然后进行GJB2和线粒体DNA A1555G/C1494T基因检测,并对其阳性检出率及年龄构成比进行统计学分析。结果显示,GJB2基因突变的检出率为18.14%,线粒体DNAA1555G/C1494T基因突变为11.16%;就诊年龄为成人组的GJB2基因突变检出率低于未成人组(分别是5.26%,22.36%),线粒体DNA A1555G/C1494T基因突变则高于未成人组(分别是31.48%,4.97%),组间有统计学差异(χ2分别为7.108、20.852,P分别为0.008、0.000);发病年龄为成人组及未成人组GJB2基因突变的阳性检出率分别为0%和20.10%,组间有统计学差异(χ2=5.157,P=0.023),而线粒体DNA A1555G/C1494T突变的阳性检出率分别为14.29%和11.34%,组间无统计学差异(χ2=0.160,P=0.698);GJB2基因突变的患者发病年龄多集中在l岁以内(66.67%);线粒体DNA A1555G/C1494T突变在各个年龄段均可发病,l岁以内仅占28.00%,3岁以后占40.00%,两者在年龄构成比上有统计学差异(χ2=11.035,P=0.004);采用不同耳聋分级标准判断携带线粒体DNA A1555G/C1494T基因突变者的听力损失程度,结果有统计学差异。这表明GJB2基因突变主要表现为先天性耳聋;线粒体DNA A1555G/C1494T基因突变不仅可表现为先天性耳聋,也可表现为后天进行性耳聋,氨基糖苷类抗生素在其各个年龄段均可诱发或加重耳聋,对其进行听力检测要重视4~8 kHz频率段;新生儿听力筛查联合基因筛查对早期发现遗传性耳聋具有重要的意义。 展开更多
关键词 非综合征性耳聋 GJB2 线粒体DNA 突变 基因诊断
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鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦的体外药敏试验结果评价 被引量:15
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作者 卢雅敏 邹安庆 +3 位作者 侯佳惠 费静娴 郭美艳 曹建明 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期872-874,共3页
目的了解药敏试验方法检测鲍曼不动杆菌对不同配比头孢哌酮/舒巴坦制剂的体外敏感性差异。方法分别采用琼脂稀释法、E-test法、K-B纸片扩散法和仪器法检测2:1和1:1配比头孢哌酮/舒巴坦对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性。结果E-test、K-B纸... 目的了解药敏试验方法检测鲍曼不动杆菌对不同配比头孢哌酮/舒巴坦制剂的体外敏感性差异。方法分别采用琼脂稀释法、E-test法、K-B纸片扩散法和仪器法检测2:1和1:1配比头孢哌酮/舒巴坦对鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性。结果E-test、K-B纸片扩散法和仪器法的检测结果与琼脂稀释法均存在一定的差异,其中纸片扩散法的符合率最低;1:1配比头孢哌酮/舒巴坦制剂的体外抗菌活性高于2:1配比制剂。结论建议实验室报告头孢哌酮/舒巴坦药敏试验时,说明试验所用的两种药物比例和采用的检测方法,以便临床更好地利用体外药敏结果选择药物。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 头孢哌酮/舒巴坦 药敏试验
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牛膝多糖对老龄大鼠非特异性免疫功能的影响 被引量:14
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作者 金丽琴 许艳芳 +1 位作者 金晶 吕建新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1408-1411,共4页
目的:探讨牛膝多糖(ABPS)对老龄大鼠非特异性免疫功能的影响。方法:牛膝多糖(ABPS)在老龄大鼠背部皮下注射21d,镜检计外周血白细胞数(WBC),HiCN法测定血红蛋白(Hb)含量,用全自动生化分析仪测定主要生化指标,用含10%小牛血清的RPMI-1640... 目的:探讨牛膝多糖(ABPS)对老龄大鼠非特异性免疫功能的影响。方法:牛膝多糖(ABPS)在老龄大鼠背部皮下注射21d,镜检计外周血白细胞数(WBC),HiCN法测定血红蛋白(Hb)含量,用全自动生化分析仪测定主要生化指标,用含10%小牛血清的RPMI-1640细胞培养液贴壁培养肺泡巨噬细胞(AMΦ)和腹腔巨噬细胞(PMΦ)2h,并用全自动生化分析仪测定其乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性,摄取中性红试验检测巨噬细胞(MΦ)的吞噬功能,比色法检测脾脏、肝脏、大脑、肾脏和血清中的脂质过氧化物(LPO)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果:牛膝多糖(ABPS)试验组老龄大鼠AMΦ和PMΦ内ACP、LDH的活性均高于对照组(均P<0.01),AMΦ和PMΦ摄取中性红的能力也高于对照组(均P<0.01);且大脑、肝脏、脾脏中的LPO含量低于对照组(P<0.05,P<0.01),GSH含量高于对照组(P<0.05)。结论:牛膝多糖(ABPS)具有激活老龄大鼠AMΦ和PMΦ作用,能增强机体非特异性免疫功能。 展开更多
关键词 牛膝属 免疫力 巨噬细胞 肺泡 巨噬细胞 腹腔
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血脂异常遗传性疾病的研究现状 被引量:16
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作者 何轶群 许美芬 +5 位作者 于涵 耿军伟 施苏雪 薛凌 卢中秋 管敏鑫 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1237-1243,共7页
血脂异常(Dyslipidemia)是指血浆中胆固醇和(或)甘油三酯水平升高,可导致严重的心血管疾病,常以冠心病和脑中风为首发表现,该类疾病严重危害着人们的健康。一些血脂异常疾病具有遗传性,主要包括孟德尔遗传和多基因遗传。传统检测血脂异... 血脂异常(Dyslipidemia)是指血浆中胆固醇和(或)甘油三酯水平升高,可导致严重的心血管疾病,常以冠心病和脑中风为首发表现,该类疾病严重危害着人们的健康。一些血脂异常疾病具有遗传性,主要包括孟德尔遗传和多基因遗传。传统检测血脂异常相关基因的方法主要有DNA测序和连锁分析,适合于孟德尔遗传性血脂异常疾病。最近几年兴起的新一代测序技术(Next-generation sequencing)不仅适用于孟德尔遗传性血脂异常疾病的研究,同样适用于复杂性血脂异常疾病。2006年至今,运用全基因组关联分析(Genome wide association study,GWAS)筛出许多与血脂异常疾病相关的基因,这些基因和早期孟德尔遗传家系确定的基因多数相同。GWAS频谱分析发现,复杂性疾病相关的基因变异频率存在差异,并且几乎所有筛查出的与血脂异常疾病相关的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)变异均位于非编码区,使得人们逐渐对非编码区基因变异展开了研究。血脂异常致病基因的发现和基因变异致病机制的阐明,为血脂异常疾病提供新的治疗靶点,并为新一代药物筛选提供新思路。文章对血脂异常遗传性疾病的研究现状进行了综述。 展开更多
关键词 血脂异常 孟德尔遗传 多基因遗传 基因突变 致病基因
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蝉拟青霉总多糖对免疫抑制大鼠组织器官免疫功能调节的实验研究 被引量:12
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作者 金丽琴 吕建新 +2 位作者 杨介钻 李东 李安乐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期881-884,共4页
目的:观察蝉拟青霉总多糖对免疫抑制大鼠组织器官免疫功能调节和自由基代谢的影响,探讨其对免疫抑制大鼠组织器官的免疫调节和抗衰老作用。方法:以速率法在全自动生化分析仪上测定乳酸脱氢酶(LDH)活力;以鸟氨酸的生成判断精氨酸酶(argin... 目的:观察蝉拟青霉总多糖对免疫抑制大鼠组织器官免疫功能调节和自由基代谢的影响,探讨其对免疫抑制大鼠组织器官的免疫调节和抗衰老作用。方法:以速率法在全自动生化分析仪上测定乳酸脱氢酶(LDH)活力;以鸟氨酸的生成判断精氨酸酶(arginase)的活力;以硫代巴比妥酸-醋酸法测定脂质过氧化物(LPO)含量;以Ell-man试剂测定还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果:蝉拟青霉总多糖使环磷酰胺所致免疫抑制大鼠组织细胞内LDH(肾、胸腺)、arginase(肝、脾、胸腺)活力升高,具有显著差异(均P<0.01);使LPO(肾、脾、胸腺)的含量下降(P<0.05或P<0.01);使环磷酰胺所致的肝、脾内低下的还原型谷胱甘肽(GSH)升高(均P<0.01)。结论:蝉拟青霉总多糖能增强免疫抑制大鼠组织器官的免疫功能和加速自由基的代谢。 展开更多
关键词 拟青霉 多糖类 免疫抑制 过氧化脂质类 谷胱甘肽
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超高效液相色谱-质谱法测定细胞中嘌呤核苷酸的方法探究 被引量:7
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作者 姜丹丹 李伟 +4 位作者 周怀彬 张婷 许芳 武佳 吕建新 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1202-1206,共5页
建立了检测细胞中嘌呤核苷酸(ATP、ADP、AMP、NAD+和NADP+)的超高效液相色谱-质谱(UP-LC-MS)分析方法.采用KinetexTM HILIC柱(50 mm ×4.6 mm,2.1 μm)进行分离,对细胞样品的萃取方法、流动相组成及质谱参数进行优化.方法... 建立了检测细胞中嘌呤核苷酸(ATP、ADP、AMP、NAD+和NADP+)的超高效液相色谱-质谱(UP-LC-MS)分析方法.采用KinetexTM HILIC柱(50 mm ×4.6 mm,2.1 μm)进行分离,对细胞样品的萃取方法、流动相组成及质谱参数进行优化.方法学确证表明:各待测物在1.0 ~ 100 μmol/L范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99,平均回收率为95.7%~101.1%,相对标准偏差为1.2%~6.1%.本方法的灵敏度高、简便快速、重复性好,可用于细胞中能量代谢的研究. 展开更多
关键词 超高效液相色谱-质谱法 细胞 ATP ADP AMP NAD+ NADP+
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三七皂苷单体R1抑制低氧高二氧化碳诱导的肺动脉平滑肌细胞p38 MAPK信号通路的活化 被引量:12
16
作者 王淑君 刘立宾 +5 位作者 黎关龙 王园园 周俊辉 赵珊 刘亚坤 王万铁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期105-108,共4页
目的:探讨三七皂苷单体R1(R1)减轻低氧高二氧化碳(CO2)性肺动脉收缩的作用及其与p38MAPK信号通路的关系。方法:原代培养雄性SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),取第2至5代对数生长期细胞至低氧高CO2(1%O2,6%CO2)条件下继续培养,并分别用8... 目的:探讨三七皂苷单体R1(R1)减轻低氧高二氧化碳(CO2)性肺动脉收缩的作用及其与p38MAPK信号通路的关系。方法:原代培养雄性SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),取第2至5代对数生长期细胞至低氧高CO2(1%O2,6%CO2)条件下继续培养,并分别用8、40、100 mg/L R1孵育24 h后收集细胞,采用免疫印迹法测定p38 MAPK磷酸化蛋白表达,半定量RT-PCR检测p38 MAPK mRNA的表达。结果:Western blotting和RT-PCR结果显示,低氧高CO2组p-p38 MAPK蛋白和p38 MAPK mRNA表达明显高于对照组(N)组(P<0.01)。与低氧高CO2组相比,R1(8、40、100 mg/L)不同程度抑制了p-p38 MAPK蛋白和p38 MAPK mRNA的表达(P<0.01),并呈剂量依赖关系。结论:低氧高CO2诱导PASMCs p38 MAPK活化,三七皂苷单体R1可能通过抑制p38 MAPK通路减轻低氧高CO2性肺动脉收缩。 展开更多
关键词 低氧高二氧化碳 肺动脉高压 P38MAPK通路 三七皂苷单体R1
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细脚拟青霉多糖体外抗肿瘤作用及其机制的实验研究 被引量:13
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作者 左江成 吕建新 +3 位作者 金丽琴 邹立林 李东 明镇寰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期237-241,共5页
目的:通过观察细脚拟青霉多糖的体外抗肿瘤活性,初步探讨其作用机制。方法:采用水提,乙醇沉淀,DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析分离纯化多糖PTPS-I;以PTPS-I和经PTPS-I刺激培养的人外周血单个核细胞(MNC)的条件培养基(PTPS-I-MNC-CM... 目的:通过观察细脚拟青霉多糖的体外抗肿瘤活性,初步探讨其作用机制。方法:采用水提,乙醇沉淀,DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析分离纯化多糖PTPS-I;以PTPS-I和经PTPS-I刺激培养的人外周血单个核细胞(MNC)的条件培养基(PTPS-I-MNC-CM)作用于体外培养的红白血病细胞K562、喉癌细胞Hep2和肝癌细胞SMMC-7721,观察PTPS-I和PTPS-I-MNC-CM对其增殖活性的影响;用cell counting kit-8(CCK-8)检测MNC的增殖活性;以荧光定量PCR检测MNC中TNF-α和IL-6 mRNA的表达。结果:PTPS-I-MNC-CM能抑制K562,Hep2和SMMC-7721细胞的增殖(均为P<0.01);PTPS-I不能抑制肿瘤细胞的增殖(P>0.05),没有显现直接的细胞毒作用。PTPS-I能促进MNC的增殖(P<0.01)和增强TNF-α和IL-6 mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:PTPS-I具有免疫调节活性,通过免疫调节发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 拟青霉 多糖类 抗肿瘤活性 免疫力
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线粒体DNA G7444A突变可能影响A1555G突变的表型表达 被引量:12
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作者 杨爱芬 朱翌 +4 位作者 吕建新 杨丽 赵建越 孙冬梅 管敏鑫 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期728-734,共7页
线粒体12S rRNA和tRNASer(UCN)基因是导致非综合征型听力损失的两个突变热点区域。作者收集了1个母系遗传感音神经性聋家系,该家系同时携带线粒体DNA(mtDNA)A1555G和G7444A突变。临床资料分析表明,该家系包括药物致聋的耳聋外显率(所有... 线粒体12S rRNA和tRNASer(UCN)基因是导致非综合征型听力损失的两个突变热点区域。作者收集了1个母系遗传感音神经性聋家系,该家系同时携带线粒体DNA(mtDNA)A1555G和G7444A突变。临床资料分析表明,该家系包括药物致聋的耳聋外显率(所有耳聋患者/所有母系成员)为58%,而非药物致聋的耳聋外显率(非药物性聋患者/所有母系成员)为25%,明显高于其他携带A1555G突变的耳聋家系。先证者的线粒体全序列分析表明,该线粒体基因组共有28个多态位点,属于东亚人群B4c1单体型。在这些多态位点中,除A1555G和G7444A突变外,未发现其他有功能意义的突变。这表明mtDNA G7444A突变可能加重由A1555G突变造成的线粒体功能缺失,从而增加耳聋的外显率。 展开更多
关键词 氨基糖甙类抗生素 非综合征耳聋 线粒体DNA 基因突变
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线粒体tRNA^(Glu)A14693G可能是与Leber遗传性视神经病变相关的基因突变 被引量:16
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作者 张永梅 冀延春 +8 位作者 刘晓玲 周翔天 赵福新 孙艳红 韦企平 张娟娟 刘燕 瞿佳 管敏鑫 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期353-359,共7页
收集了3个具有典型临床特征的中国汉族Leber遗传性视神经病变(Leber′s hereditary optic neuropathy,LHON)家系。通过对先证者和家系其他成员进行眼科临床(如视力损害程度和发病年龄)检查,发现这些家系成员中视力损害的外显率很低,经mt... 收集了3个具有典型临床特征的中国汉族Leber遗传性视神经病变(Leber′s hereditary optic neuropathy,LHON)家系。通过对先证者和家系其他成员进行眼科临床(如视力损害程度和发病年龄)检查,发现这些家系成员中视力损害的外显率很低,经mtDNA测序分析,在tRNAGlu上发现了A14693G同质性突变位点,多态性位点分别属于东亚单体型Y1b、Y1和Y1,没有发现其他高度保守和有功能意义的突变位点。A14693G突变位于线粒体tRNAGlu高度保守区(通用位点为54位),可能导致tRNA空间结构和稳定性发生改变,继而影响tRNA的代谢,导致线粒体蛋白合成功能受损和ATP障碍,最终导致视力损害。所以,tRNAGluA14693G突变可能是与视神经病变相关的致病性线粒体突变位点。 展开更多
关键词 LEBER遗传性视神经病变 线粒体DNA 视力障碍 突变
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蝉拟青霉多糖免疫调节和抗肿瘤活性的实验研究 被引量:24
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作者 金丽琴 熊中奎 吕建新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期494-497,共4页
目的:研究蝉拟青霉总多糖(PcPSt)及其组分PcPSAc的免疫调节和抗肿瘤活性。方法:将实验动物分为5组:正常对照组、肿瘤对照组、PcPSt组、环磷酰胺(Cy)组和PcPSt+Cy组,除正常对照组外其余各组均复制荷瘤小鼠模型,每日分别向5组小鼠腹腔注... 目的:研究蝉拟青霉总多糖(PcPSt)及其组分PcPSAc的免疫调节和抗肿瘤活性。方法:将实验动物分为5组:正常对照组、肿瘤对照组、PcPSt组、环磷酰胺(Cy)组和PcPSt+Cy组,除正常对照组外其余各组均复制荷瘤小鼠模型,每日分别向5组小鼠腹腔注射生理盐水(NS)、NS、PcPSt、Cy和PcPSt+Cy,10 d后,观察各组白细胞、脾指数、瘤重和抑瘤率等指标的变化。以cell counting kit 8(CCK-8)为指标,以脂多糖(LPS)为阳性对照,观察PcPSAc对体外培养的小鼠脾细胞增殖活性影响。以LPS为阳性对照,观察不同浓度PcPSAc刺激体外培养小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)产生一氧化氮(NO)的作用。结果:PcPSt能增加荷瘤小鼠白细胞数量,缓解Cy所致荷瘤小鼠白细胞数的降低,提高荷瘤小鼠的脾指数,联用小剂量Cy时明显增强其抑制肿瘤作用。PcPSAc在600 mg/L和300 mg/L浓度时能提高体外培养小鼠脾细胞的增殖活性。PcPSAc在15-300 mg/L浓度范围内均能刺激体外培养小鼠PMΦ产生NO,其中以300 mg/LPcPSAc作用最强。结论:体内试验和体外试验表明蝉拟青霉多糖具有促进免疫功能和抗肿瘤的作用。 展开更多
关键词 拟青霉 多糖类 免疫力 抗肿瘤活性
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