PMA在RT-PCR检测药品细菌污染中的应用 被引量：5

1

作者 应国红 王晓冲 +2 位作者 李军 王晓炜 周继昌 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期91-95,共5页

建立有效区分死菌、活菌PCR检测方法,用于药品中细菌污染检测。选取金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌,用叠氮溴化丙锭(PMA)前处理,使PMA与死菌DNA分子共价交联,抑制该DNA分子PCR扩增。当PMA浓度大于5μg·mL-1、曝光时间大于5 min时,PMA... 建立有效区分死菌、活菌PCR检测方法,用于药品中细菌污染检测。选取金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌,用叠氮溴化丙锭(PMA)前处理,使PMA与死菌DNA分子共价交联,抑制该DNA分子PCR扩增。当PMA浓度大于5μg·mL-1、曝光时间大于5 min时,PMA可抑制细胞膜破裂革兰氏阴性、阳性菌死菌DNAPCR扩增;PMA浓度大于20μg·mL-1时对活菌DNAPCR扩增产生一定影响。经过PMA前处理,能有效抑制死菌DNA扩增,在药品细菌污染PCR检测中有很好应用前景。 展开更多

关键词 叠氮溴化丙锭(PMA) PCR扩增 共价交联

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基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究Pokemon诱导的胞内脂代谢变化 被引量：3

2

作者 金一宝 李上富 +5 位作者 王珏 高丹 刘红霞 蒋宇扬 殷果 王铁杰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期162-168,共7页

Pokemon是一种转录抑制因子,能够通过影响染色质的重组或直接与抑癌基因结合而抑制抑癌基因的转录,促使肿瘤形成。该文利用基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究了Pokemon在肝癌中调控细胞代谢的作用机制。通过脂质转染,获得了Poke... Pokemon是一种转录抑制因子,能够通过影响染色质的重组或直接与抑癌基因结合而抑制抑癌基因的转录,促使肿瘤形成。该文利用基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究了Pokemon在肝癌中调控细胞代谢的作用机制。通过脂质转染,获得了Pokemon高表达的HL7702细胞,分别收集转染后不同时间点的细胞。利用基于液相色谱-质谱联用技术的代谢组学方法,分析胞内代谢物的成分。根据多元统计分析的结果选出差异显著的候选代谢物,通过数据库(METLIN和HMDB)检索、二级图谱比对进行结构解析,确证了36种代谢物。通过KEGG数据库检索发现这些代谢物主要与脂质合成相关。进一步分析发现脂质合成途径中乙酰辅酶羧化酶和脂肪酸合成酶均被激活。结果显示,Pokemon可通过激活细胞中脂质合成通路而影响细胞的代谢。 展开更多

关键词 液相色谱-质谱联用 POKEMON 代谢组学 脂质合成

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《中国药典》中蕲蛇饮片分子鉴定方法的研究和探讨 被引量：7

3

作者 苏畅 宋茜 +4 位作者 邵鹏柱 黄家乐 鲁艺 王淑红 王铁杰 《世界科学技术-中医药现代化》 2016年第2期196-201,共6页

目的:运用多种分子鉴定方法,从技术要求和标准编写方面对蕲蛇饮片现行质量标准提出建议。方法:本研究选取蕲蛇所在蝰科Viperidae蝮亚科Crotalinae的7个近缘物种和9种常见的蕲蛇伪品物种作为研究对象,采用DNA条形码技术扩增16S rRNA序列... 目的:运用多种分子鉴定方法,从技术要求和标准编写方面对蕲蛇饮片现行质量标准提出建议。方法:本研究选取蕲蛇所在蝰科Viperidae蝮亚科Crotalinae的7个近缘物种和9种常见的蕲蛇伪品物种作为研究对象,采用DNA条形码技术扩增16S rRNA序列,运用电泳检视法,根据扩增条带的有无评价模板DNA的质量;16S rRNA序列扩增产物通过双向测序,运用BioEdit软件拼接,双端对齐后剪切比对,利用MEGA 5.1软件构建邻接(NJ)系统发育树;采用蕲蛇饮片现行标准方法进行同步鉴别。结果:16S rRNA序列的电泳检视结果可有效评价蕲蛇样品的模板DNA质量,避免由于模板DNA质量不佳导致的假阴性结果的可能性;基于16S rRNA条形码序列建立的NJ树可以鉴别蕲蛇饮片及其混淆品;蕲蛇饮片现行标准方法专属性良好。结论:DNA条形码方法、现行标准方法以及NJ树三者相互结合,从不同角度对蕲蛇饮片进行真伪鉴别,有效弥补蕲蛇饮片现行标准方法的不足,为其他中药品种的分子鉴定技术的质量标准制定提供了参考。 展开更多

关键词 分子鉴定技术 蕲蛇饮片 中国药典 质量标准 16S RRNA

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化妆品遗传毒性试验研究进展及思考 被引量：4

4

作者 秦美蓉 王晓炜 王平 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期595-600,604,共7页

介绍了遗传毒性试验方法的研究进展,对SCCS指南、ICH指导原则、ISO国际标准和《化妆品安全技术规范》(2015年版)遗传毒性试验的标准进行了分析和比较,对我国化妆品遗传毒性试验方法和试验组合提出建议,为化妆品原料和相关产品的遗传毒... 介绍了遗传毒性试验方法的研究进展,对SCCS指南、ICH指导原则、ISO国际标准和《化妆品安全技术规范》(2015年版)遗传毒性试验的标准进行了分析和比较,对我国化妆品遗传毒性试验方法和试验组合提出建议,为化妆品原料和相关产品的遗传毒性评价提供参考。 展开更多

关键词 化妆品 遗传毒性 SCCS指南 OECD指导原则 ICH指导原则

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自拟通络祛浊方对两种不同方法诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝模型的干预效果及机制研究 被引量：4

5

作者 金毅 吕爱贞 +6 位作者 黄宝明 邢伟 郑又铭 张金龙 杨雯 徐愉林 李静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期863-869,共7页

目的研究通络祛浊方对化学性肝损伤或高脂饲料诱导的大鼠非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)模型的干预效果,并探索作用机制。方法四氯化碳(tetrachloride,CCl4)造模实验设置溶媒组、CCl4模型组和通络祛浊方预防组(简称预防组);高脂饲料造模实... 目的研究通络祛浊方对化学性肝损伤或高脂饲料诱导的大鼠非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)模型的干预效果,并探索作用机制。方法四氯化碳(tetrachloride,CCl4)造模实验设置溶媒组、CCl4模型组和通络祛浊方预防组(简称预防组);高脂饲料造模实验设置空白对照组、高脂饲料模型组和预防组。测定血生化、肝脏脂质含量、细胞色素P450主要亚酶活性,进行组织病理学观察及代谢组学分析等。结果通络祛浊方明显降低两种不同方法诱导的大鼠NAFL模型的肝脏脂质含量,降低肝脏质量及肝脏系数,对血中的甘油三酯(triglyceride,TG)有双向调节作用。CYP酶活性在CCl4模型组有明显降低,并在预防组有明显恢复。通络去浊方干预CCl4诱导的模型主要通过磷脂类物质代谢通道,而高脂饲料模型引起变化的主要代谢物质为游离脂肪酸类。结论通络祛浊方对两种不同因素诱导的大鼠NAFL模型具有较明显的保肝降脂的干预效果,其在不同方法诱导的NAFL中发挥干预作用的主要代谢产物及代谢通路不同。 展开更多

关键词 非酒精性单纯性脂肪肝 四氯化碳 高脂饲料 通络祛浊方 甘油三酯 代谢组学

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不同方法诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝模型的CYP酶活性比较研究 被引量：6

6

作者 金毅 邢伟 +5 位作者 吕爱贞 张金龙 杨雯 徐愉林 王茜 李静 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第12期75-83,共9页

目的研究四氯化碳(CCl4)诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝(nonalcoholic simple fatty liver,NAFL)模型在不同时间段对主要细胞色素P450 (cytochrome P450 proteins,CYP)酶活性的影响,并与高脂饲料诱导大鼠NAFL模型相比较。方法将实验动物... 目的研究四氯化碳(CCl4)诱导大鼠非酒精性单纯性脂肪肝(nonalcoholic simple fatty liver,NAFL)模型在不同时间段对主要细胞色素P450 (cytochrome P450 proteins,CYP)酶活性的影响,并与高脂饲料诱导大鼠NAFL模型相比较。方法将实验动物分为模型组和溶媒/空白对照组,模型组采用每周2次皮下注射40%CCl4,连续9周(CCl4模型)或连续给予高脂饲料9周(高脂模型)。通过组织病理学观察,测定肝脏脂质含量及肝脏系数(肝脑比)等确认大鼠NAFL造模成功,并测定血生化谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),测定主要CYP酶活性变化。结果两种模型的组织病理学所见符合NAFL特点,肝内脂质含量及肝脑比均有显著性增加。在不同周龄,CCl4模型组的主要CYP酶活性(第4周CYP2B6除外)与溶媒组相比,有显著性下降(P <0. 001),且随时间延长有加重趋势;高脂模型的主要CYP酶活性与空白对照组比较无明显变化。ALT和AST在CCl4模型组显著升高,而在高脂模型组无明显变化。结论肝脏组织中主要CYP酶活性可用于鉴别两种不同途径(CCl4或高脂饲料)诱导的大鼠NAFL模型。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪肝 探针底物 肝S9 CYP酶

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碘标准滴定溶液浓度的测量不确定度评定 被引量：2

7

作者 张启航 刘凯双 +3 位作者 殷果 郑党儿 王铁杰 王冰 《医药导报》 CAS 北大核心 2021年第6期801-805,共5页

目的建立GB/T 601-2016《化学试剂标准滴定溶液的制备》碘标准滴定溶液[C(1/2I_(2))=0.1 mol·L^(-1)]浓度的测量不确定度评定方法。方法通过对不确定度来源分析,建立测量模型,对标定过程中各不确定度的分量进行分析评估,计算扩展... 目的建立GB/T 601-2016《化学试剂标准滴定溶液的制备》碘标准滴定溶液[C(1/2I_(2))=0.1 mol·L^(-1)]浓度的测量不确定度评定方法。方法通过对不确定度来源分析,建立测量模型,对标定过程中各不确定度的分量进行分析评估,计算扩展不确定度。结果通过计算各变量的不确定度分量,运用复合函数等方法计算,得到本次标定浓度的合成标准不确定度为1.7×10^(-4)mol·L^(-1),扩展不确定度U=0.000 4 mol·L^(-1),包含因子k=2。结论初次建立碘标准滴定溶液浓度的测量不确定度评定方法,通过评估分析各分量的不确定度的大小而明确影响测量不确定度的主要因素,优化实验条件使测定结果更加准确可靠。 展开更多

关键词 碘标准滴定溶液 测量不确定度

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Pig-a基因突变试验研究进展

8

作者 郑丹丹 秦美蓉 +1 位作者 王晓炜 王平 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第8期135-140,共6页

建立灵敏可靠的遗传毒性试验方法是全面充分评价化学物质致突变性的必要保障。近年来,一种基于Pig-a基因的新型基因突变试验成为研究热点,该方法具有灵敏度高,成本低,与其他遗传毒性试验整合潜力高,减少动物使用等优点,有望成为未来评... 建立灵敏可靠的遗传毒性试验方法是全面充分评价化学物质致突变性的必要保障。近年来,一种基于Pig-a基因的新型基因突变试验成为研究热点,该方法具有灵敏度高,成本低,与其他遗传毒性试验整合潜力高,减少动物使用等优点,有望成为未来评估体内基因突变的新方法。本文就Pig-a基因突变试验的研究与应用进展进行综述。 展开更多

关键词 Pig-a基因 Pig-a基因突变试验

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HPLC-DAD法同时检测镇静安神类中成药及保健食品中非法添加的药物 被引量：26

9

作者 韩东岐 鲁艺 +4 位作者 殷果 王珏 胡伟慧 梁莹莹 王铁杰 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2197-2202,共6页

目的建立HPLC-DAD法同时检测镇静安神类中成药及保健食品中非法添加的9种安眠药物。方法样品分析采用Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为含0.1%三乙胺的0.05 mol/L磷酸二氢铵-甲醇溶液,梯度洗脱;体积流量... 目的建立HPLC-DAD法同时检测镇静安神类中成药及保健食品中非法添加的9种安眠药物。方法样品分析采用Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为含0.1%三乙胺的0.05 mol/L磷酸二氢铵-甲醇溶液,梯度洗脱;体积流量为1.0 m L/min;柱温（35±5）℃;检测波长分别为210 nm（盐酸多塞平、苯妥英钠、司可巴比妥钠、盐酸羟嗪）、220 nm（阿普唑仑、艾司唑仑、劳拉西泮）、254 nm（氯氮卓、盐酸氯丙嗪）,DAD全波长扫描（190~400 nm）。结果在147批药物（镇静安神类中成药87批、保健食品60批）中,11批检出盐酸多塞平,3批检出艾司唑仑,各有1批检出劳拉西泮、阿普唑仑和氯氮卓。结论该方法简便、快速、准确、重复性好,适用于基层药检机构检测非法添加药物。 展开更多

关键词 镇静安神 中成药 保健食品 非法添加 安眠药物 HPLC-DAD

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HPLC法快速筛查抗风湿类中成药和保健食品中24种非法添加化学成分 被引量：23

10

作者 黎雪清 谭渺 +3 位作者 蒋创杰 韩东岐 殷果 陈晓辉 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1891-1894,共4页

目的建立一种快速筛查抗风湿类中成药和保健食品中24种非法添加化学成分的HPLC法。方法采用C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇-0.1%乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温35℃,二极管阵列检测器,检测波长为245... 目的建立一种快速筛查抗风湿类中成药和保健食品中24种非法添加化学成分的HPLC法。方法采用C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇-0.1%乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温35℃,二极管阵列检测器,检测波长为245 nm。结果建立了在45 min内快速检测到吗啡、甲氧苄啶、对乙酰氨基酚、龙胆苦苷、磺胺甲噁唑、安替比林、阿司匹林、非那西丁、泼尼松、异丙安替比林、氢化可的松、金诺芬、地塞米松、甲基泼尼松龙、酮洛芬、舒林酸、萘普生、地西泮、醋酸地塞米松、保泰松、奥沙普秦、双氯芬酸钠、吲哚美辛、丙酸倍氯米松,各色谱峰分离良好,其回收率在88.8%~101.7%内,检测限在0.1~24.6 ng内。结论所建立的方法可适用于不同中成药和保健食品的胶囊剂、片剂和丸剂的非法添加化学成分的快速筛查方法。 展开更多

关键词 HPLC 快速筛查 抗风湿类 中成药 保健食品 非法添加

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不同产地龙葵药材的高效液相色谱-蒸发光散射检测指纹图谱 被引量：9

11

作者 王珏 金一宝 +1 位作者 王铁杰 李晓帆 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期809-815,共7页

采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）来研究不同产地龙葵药材品质的差异,为龙葵药材质量标准的制定提供参考依据。使用Phenomenex C18色谱柱,流动相为乙腈-20%（v/v）甲醇水溶液（含0.03%（v/v）三乙胺）,梯度洗脱,蒸发管... 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）来研究不同产地龙葵药材品质的差异,为龙葵药材质量标准的制定提供参考依据。使用Phenomenex C18色谱柱,流动相为乙腈-20%（v/v）甲醇水溶液（含0.03%（v/v）三乙胺）,梯度洗脱,蒸发管温度为40℃。利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对所采集的色谱图进行相似度比对,选择相似度在0.9～1.0之间的色谱图归一化拟合成龙葵的标准指纹图谱,并利用对照品进行色谱峰指认。研究结果表明,不同产地来源的龙葵药材之间具有显著的差异,依据HPLC-ELSD采集到的非挥发类成分可对中药材进行区分。该方法为龙葵药材的真实性、优良性和稳定性评价提供了一种新的、具有广阔应用前景的技术手段。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 蒸发光散射检测 龙葵 指纹图谱

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对胃粘膜损伤有辅助保护功能的评价试验中的病理学方法的探讨与建议 被引量：5

12

作者 金毅 甘玉玺 +3 位作者 刘远平 陈润桦 谢天柱 黄泽愉 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期38-41,I0004,I0005,共6页

目的建立科学的大体病理学检查和组织病理学诊断的评分原则、更合理的评分标准以及合理的统计学方法,为保健食品对胃粘膜损伤有辅助保护作用提供更为科学、可行的评价方法。方法通过对大鼠胃黏膜急性损伤酒精模型的全面分析,针对现行方... 目的建立科学的大体病理学检查和组织病理学诊断的评分原则、更合理的评分标准以及合理的统计学方法,为保健食品对胃粘膜损伤有辅助保护作用提供更为科学、可行的评价方法。方法通过对大鼠胃黏膜急性损伤酒精模型的全面分析,针对现行方法中评价方法的缺点,根据病变特点及病理学检查的原则和半定量分析方法,以及相应的统计学方法等信息化处理,进行方法学探讨。结果大体病理学检查按照病变所占面积以及在整个胃粘膜所占的比例;组织病理学诊断根据病变累及粘膜层的深度作为判定粘膜受损严重程度的主要依据,其他各种病变作为参考因素。分别分为未见异常(0分)、轻度病变(1分)、中度病变(2分)和重度病变(3分)。统计学方法采用Ridit统计学方法分析病理学半定量的结果。结论从大体病理学、组织病理学的评价方法以及数据处理方法和结果判定等方面,提出了对胃粘膜损伤有辅助保护功能的动物实验相对更为科学、可行的评价方法的建议。 展开更多

关键词 病理学 评价方法 急性胃黏膜损伤酒精模型 信息化

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HPLC法测定青蒿素哌喹片中哌喹的含量及相关物质 被引量：2

13

作者 秦斌 殷果 +3 位作者 闫研 丁振浩 李媛 王铁杰 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第8期1747-1753,共7页

目的:建立青蒿素哌喹片中哌喹的含量测定及有关物质的检测方法,并建立哌喹有关物质限度。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为SHISEIDO CAPCELL PAK C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈∶0.1%三氯乙酸溶液∶三乙胺(18∶82∶0.2,磷酸调... 目的:建立青蒿素哌喹片中哌喹的含量测定及有关物质的检测方法,并建立哌喹有关物质限度。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为SHISEIDO CAPCELL PAK C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈∶0.1%三氯乙酸溶液∶三乙胺(18∶82∶0.2,磷酸调节pH至2.5)为流动相,柱温为30℃,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为216 nm(有关物质测定)和237 nm(含量测定)。结果:哌喹与各主要杂质及强制破坏产生的降解产物的杂质峰均分离良好,哌喹在0.01-0.2 mg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好,R2=0.999 9,回收率为98.14%(RSD=0.77%,n=9),最低检出限为0.06μg·mL-1,供试品溶液在12 h内稳定。结论:该方法专属性强,准确、灵敏,可用于青蒿素哌喹片中哌喹含量测定和有关物质检测。 展开更多

关键词 青蒿素哌喹片 含量测定 相关物质 高效液相色谱法

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青蒿素哌喹片红外光谱鉴别方法的探讨

14

作者 闫研 殷果 +3 位作者 丁振浩 谭渺 宋茜 王铁杰 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第4期921-925,共5页

目的:对青蒿素哌喹片进行鉴别。方法:采用不同溶剂提取青蒿素哌喹片中的青蒿素和哌喹,分别测定各自红外谱图。结果:除了青蒿素红外光谱图在1 574 cm-1处出现一组哌喹干扰峰外,青蒿素哌喹片经提取后的红外谱图均与《药品红外光谱集》中... 目的:对青蒿素哌喹片进行鉴别。方法:采用不同溶剂提取青蒿素哌喹片中的青蒿素和哌喹,分别测定各自红外谱图。结果:除了青蒿素红外光谱图在1 574 cm-1处出现一组哌喹干扰峰外,青蒿素哌喹片经提取后的红外谱图均与《药品红外光谱集》中青蒿素和哌喹标准谱图一致。结论:该方法稳定可靠、专属性强,可用于青蒿素哌喹片的鉴别。 展开更多

关键词 青蒿素哌喹片 红外光谱 鉴别

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气相色谱-质谱法测定人工晶状体中2-氯乙醇 被引量：6

15

作者 吴振兴 付步芳 +3 位作者 王书晗 王春仁 冯晓明 郑艳萍 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1644-1647,共4页

人工晶状体样品用丙酮超声提取使残留的2-氯乙醇(ECH)进入溶液中,所得提取液用气相色谱-质谱法(GC-MS)测定其中ECH的含量。GC分析条件:1采用ZB-624色谱柱,进样品温度180℃,分流比1比1;2载气为高纯氦气,流量为1.5mL·min^(-1);3升温... 人工晶状体样品用丙酮超声提取使残留的2-氯乙醇(ECH)进入溶液中,所得提取液用气相色谱-质谱法(GC-MS)测定其中ECH的含量。GC分析条件:1采用ZB-624色谱柱,进样品温度180℃,分流比1比1;2载气为高纯氦气,流量为1.5mL·min^(-1);3升温程序:初始温度50℃,保持1 min;以5℃·min^(-1)速率升至100℃,保持1 min。MS分析条件:离子源温度230℃,接口温度250℃,电子能量70eV。以保留时间和质谱全扫描方式进行定性分析,质量数范围m/z35~500。以选择离子监测模式定量,质量数m/z43的条件下用外标法定量。方法的理论塔板数在56 753以上。ECH的线性范围为1.44~22.96mg·L-1,检出限(3S/N)为0.41mg·L^(-1)。用标准加入法测得方法的回收率为99.1%,测定值的相对标准偏差(n=5)小于5%。 展开更多

关键词 气相色谱-质谱法 人工晶状体 2-氯乙醇 残留量

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免疫磁珠分离技术联合流式细胞术检测ENU致大鼠体内Pig-a基因突变

16

作者 秦美蓉 郑丹丹 +3 位作者 黄泽愉 王晓炜 李俊鹏 王平 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期211-216,共6页

目的结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血Pig-a基因突变试验方法。方法用20、40和80 mg/(kg·bw)剂量的N-乙基-N-亚硝基脲(Nethyl-N-nitrosourea,ENU)连续3 d给予SD大... 目的结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血Pig-a基因突变试验方法。方法用20、40和80 mg/(kg·bw)剂量的N-乙基-N-亚硝基脲(Nethyl-N-nitrosourea,ENU)连续3 d给予SD大鼠,在染毒前、染毒后第7、14和28天分别采集大鼠外周血,经免疫磁性分离柱富集RET^(CD59-)和RBC^(CD59-),用流式细胞术分别对免疫磁珠分离柱前和柱后的外周血红细胞进行计数。结果与对照组相比,ENU各剂量组的RET^(CD59-)和RBC^(CD59-)发生率均显著升高(P<0.05);采用免疫磁珠分离技术后,可以在3 min内完成一个样品的Pig-a基因突变检测,分析的RET^(CD59-)或RBC^(CD59-)细胞数量分别最高可达2×10~4个或9×10~4个。结论本研究联合运用免疫磁珠分离术和流式细胞术,建立并优化了大鼠体内Pig-a基因突变试验方法,实现了高通量检测,提高了试验的准确性和效率。 展开更多

关键词 Pig-a基因突变 免疫磁珠分离 流式细胞术 N-乙基-N-亚硝基脲 大鼠 外周血红细胞

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