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牛布鲁氏菌A19号疫苗免疫血清几种检测方法的比较
被引量:
9
1
作者
吴小梅
李建玲
+8 位作者
王涛
蔡扩军
朱冠林
杨镇
马小娟
高敏
陈利苹
钟旗
李爱巧
《中国动物检疫》
CAS
2022年第5期110-115,共6页
为选择科学适用的牛布鲁氏菌病净化检测方法,对1721份免疫布鲁氏菌A19号疫苗18个月后的牛血清,分别用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)和荧光偏振试验(FPA)5种...
为选择科学适用的牛布鲁氏菌病净化检测方法,对1721份免疫布鲁氏菌A19号疫苗18个月后的牛血清,分别用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)和荧光偏振试验(FPA)5种血清学检测方法,以及环介导等温扩增技术(LAMP)和荧光定量PCR病原学检测方法进行检测,分析比对不同检测方法的特异性、敏感性、误诊率、漏诊率、符合率、Kappa值等。结果显示:与SAT相比,其他4种血清学检测方法的敏感性、特异性和符合率从高到低依次为iELISA、FPA、cELISA、RBT,其中敏感性均在85.00%以上,特异性均在97.60%以上,符合率均在97.50%以上,Kappa值均≥1.00;与PCR相比,LAMP方法敏感性低(9.09%),但特异性强(99.65%),与PCR符合率高(98.49%)。结果表明:血清学检测方法较为敏感特异,符合率和一致性均较高,而分子生物学检测方法特异性强,不易误诊和漏诊。因此,对于牛群的布鲁氏菌病净化,要结合牛群污染和免疫情况以及净化的不同阶段选择适用的检测方法,仅用一种方法可能会存在偏差。建议先用iELISA或FPA或RBT进行初筛,再用c ELISA或SAT进行确诊,进而对确诊为阳性牛的阴道拭子或奶样进行分子生物学检测,以确定是否存在布鲁氏菌感染。本研究为免疫牛群的布鲁氏菌病净化检测方法选择提供了参考。
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关键词
布鲁氏菌病
牛
血清学检测方法
比较
评价
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职称材料
非洲猪瘟病毒多基因家族MGF360-13L基因功能的初步研究
被引量:
3
2
作者
陈达年
马旭升
+13 位作者
代军飞
汪洋
李茜
白衡
毛甜甜
刘永生
丁龙
陈昊翰
陈思言
饶宇飞
贾宁
张杰
郑海学
刘湘涛
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期4419-4428,共10页
旨在初步探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)多基因家族MGF360-13L基因的功能。使用生物信息学软件对MGF360-13L基因进行分析;构建真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L并转染至293T细胞进行表达;利用同源重组方法构建基因缺失...
旨在初步探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)多基因家族MGF360-13L基因的功能。使用生物信息学软件对MGF360-13L基因进行分析;构建真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L并转染至293T细胞进行表达;利用同源重组方法构建基因缺失毒株ASFV-ΔMGF360-13L,以相同的感染复数(MOI=0.01)在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中感染基因缺失毒株和亲本毒株(ASFV CN/GS/2018)后,利用红细胞吸附试验(HAD)计算病毒滴度并绘制体外生长曲线;以MOI=1将ASFV-ΔMGF360-13L和ASFV CN/GS/2018分别感染猪骨髓巨噬细胞(BMDM),利用qPCR和ELISA测定细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果表明,MGF360-13L基因在ASFV基因Ⅱ型中相对保守,编码蛋白属于非分泌型、无跨膜区、亲水性好;构建的真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L被293T细胞表达;成功获得MGF360-13L单基因缺失毒株ASFV-ΔMGF360-13L,与ASFV CN/GS/2018相比,其体外复制没有显著性差异;在ASFV-ΔMGF360-13L感染BMDM后,IL-1β、IL-6和TNF-α炎性细胞因子在转录和分泌水平都显著高于ASFV CN/GS/2018。本研究成功制备了ASFV的MGF360-13L基因缺失毒株,并证实了MGF360-13L基因作为ASFV复制非必需基因具有抑制炎性因子表达的功能,这为进一步注释ASFV MGF360-13L基因功能提供了线索。
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关键词
ASFV
MGF360-13L
炎性因子
生长曲线测定
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职称材料
题名
牛布鲁氏菌A19号疫苗免疫血清几种检测方法的比较
被引量:
9
1
作者
吴小梅
李建玲
王涛
蔡扩军
朱冠林
杨镇
马小娟
高敏
陈利苹
钟旗
李爱巧
机构
新疆农业大学动物医学学院
乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心
新疆农业大学科学技术学院
深圳真瑞生物科技有限公司
新疆畜牧科学院兽医研究所
出处
《中国动物检疫》
CAS
2022年第5期110-115,共6页
基金
乌鲁木齐市科技局计划项目(P161210004)。
文摘
为选择科学适用的牛布鲁氏菌病净化检测方法,对1721份免疫布鲁氏菌A19号疫苗18个月后的牛血清,分别用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)和荧光偏振试验(FPA)5种血清学检测方法,以及环介导等温扩增技术(LAMP)和荧光定量PCR病原学检测方法进行检测,分析比对不同检测方法的特异性、敏感性、误诊率、漏诊率、符合率、Kappa值等。结果显示:与SAT相比,其他4种血清学检测方法的敏感性、特异性和符合率从高到低依次为iELISA、FPA、cELISA、RBT,其中敏感性均在85.00%以上,特异性均在97.60%以上,符合率均在97.50%以上,Kappa值均≥1.00;与PCR相比,LAMP方法敏感性低(9.09%),但特异性强(99.65%),与PCR符合率高(98.49%)。结果表明:血清学检测方法较为敏感特异,符合率和一致性均较高,而分子生物学检测方法特异性强,不易误诊和漏诊。因此,对于牛群的布鲁氏菌病净化,要结合牛群污染和免疫情况以及净化的不同阶段选择适用的检测方法,仅用一种方法可能会存在偏差。建议先用iELISA或FPA或RBT进行初筛,再用c ELISA或SAT进行确诊,进而对确诊为阳性牛的阴道拭子或奶样进行分子生物学检测,以确定是否存在布鲁氏菌感染。本研究为免疫牛群的布鲁氏菌病净化检测方法选择提供了参考。
关键词
布鲁氏菌病
牛
血清学检测方法
比较
评价
Keywords
brucellosis
cattle
serological detection method
comparison
evaluation
分类号
S851.34 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
非洲猪瘟病毒多基因家族MGF360-13L基因功能的初步研究
被引量:
3
2
作者
陈达年
马旭升
代军飞
汪洋
李茜
白衡
毛甜甜
刘永生
丁龙
陈昊翰
陈思言
饶宇飞
贾宁
张杰
郑海学
刘湘涛
机构
甘肃农业大学动物医学院
中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与
生物
安全学院家畜疫病病原
生物
学国家重点实验室
河北
科技
师范学院动物
科技
学院河北省预防兽医学重点实验室
深圳真瑞生物科技有限公司
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期4419-4428,共10页
基金
国家自然科学基金(31941002)
甘肃省科技重大专项(20ZD7NA006-1)
中国农业科学院基本科研业务费(Y2021YJ10)。
文摘
旨在初步探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)多基因家族MGF360-13L基因的功能。使用生物信息学软件对MGF360-13L基因进行分析;构建真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L并转染至293T细胞进行表达;利用同源重组方法构建基因缺失毒株ASFV-ΔMGF360-13L,以相同的感染复数(MOI=0.01)在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中感染基因缺失毒株和亲本毒株(ASFV CN/GS/2018)后,利用红细胞吸附试验(HAD)计算病毒滴度并绘制体外生长曲线;以MOI=1将ASFV-ΔMGF360-13L和ASFV CN/GS/2018分别感染猪骨髓巨噬细胞(BMDM),利用qPCR和ELISA测定细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果表明,MGF360-13L基因在ASFV基因Ⅱ型中相对保守,编码蛋白属于非分泌型、无跨膜区、亲水性好;构建的真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L被293T细胞表达;成功获得MGF360-13L单基因缺失毒株ASFV-ΔMGF360-13L,与ASFV CN/GS/2018相比,其体外复制没有显著性差异;在ASFV-ΔMGF360-13L感染BMDM后,IL-1β、IL-6和TNF-α炎性细胞因子在转录和分泌水平都显著高于ASFV CN/GS/2018。本研究成功制备了ASFV的MGF360-13L基因缺失毒株,并证实了MGF360-13L基因作为ASFV复制非必需基因具有抑制炎性因子表达的功能,这为进一步注释ASFV MGF360-13L基因功能提供了线索。
关键词
ASFV
MGF360-13L
炎性因子
生长曲线测定
Keywords
ASFV
MGF360-13L
inflammatory cytokines
growth curve measurement
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛布鲁氏菌A19号疫苗免疫血清几种检测方法的比较
吴小梅
李建玲
王涛
蔡扩军
朱冠林
杨镇
马小娟
高敏
陈利苹
钟旗
李爱巧
《中国动物检疫》
CAS
2022
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
非洲猪瘟病毒多基因家族MGF360-13L基因功能的初步研究
陈达年
马旭升
代军飞
汪洋
李茜
白衡
毛甜甜
刘永生
丁龙
陈昊翰
陈思言
饶宇飞
贾宁
张杰
郑海学
刘湘涛
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
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