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果蔬中天冬酰胺和谷氨酰胺含量检测方法及尿素循环障碍患者食用分析 被引量：1
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作者 叶新玉 李子樱 +8 位作者 唐淑军 孙丽萍 赵云霞 肖伟敏 顾亚萍 匡慧颖 陈欣 杨国武 黄雅丽 《食品科学》 EI CAS 北大核心 2025年第3期212-221,共10页
本研究基于酶解结合超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)技术,开发了一种测定蔬菜和水果中天冬酰胺和谷氨酰胺含量的方法。利用灰色链霉菌蛋白酶酶解样品,并... 本研究基于酶解结合超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)技术,开发了一种测定蔬菜和水果中天冬酰胺和谷氨酰胺含量的方法。利用灰色链霉菌蛋白酶酶解样品,并加入抗氧化剂丁基羟基苯甲醚,再取上清液进行UPLC-MS/MS分析;以甲醇-0.02%甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,经Phenomenex kinetex F5色谱柱分离,用电喷雾电离源正离子扫描和多反应检测模式进行检测,并通过内标法定量。天冬酰胺和谷氨酰胺在10~1 000 ng/mL范围内线性关系良好(R^(2)>0.999)。方法检出限为1.5 mg/100 g,定量限为5.0 mg/100 g,回收率在80.0%~112.8%,相对标准偏差为1.2%~9.1%。对市场常见的49种蔬菜和50种水果进行检测,结果表明在蔬菜中天冬酰胺、谷氨酰胺的总含量均值从高到低排序为豆类、薯芋类、葱蒜类、菌类、瓜类、茄果类、白菜类、绿叶菜类,其中豆类的天冬酰胺、谷氨酰胺总含量均极显著高于绿叶菜类(P<0.01);在水果中天冬酰胺、谷氨酰胺的总含量均值从高到低依次为核果类、西甜瓜类、聚复果类、浆果类、柑果类、香蕉类、壳果类,核果类的天冬酰胺、谷氨酰胺总含量均显著高于壳果类(P<0.05)。本研究结果提示尿素循环障碍患者在日常膳食中可以更多地摄入绿叶菜类、壳果类等天冬酰胺、谷氨酰胺含量少的果蔬,特别是支链氨基酸与(天冬酰胺+谷氨酰胺)含量比值较高的小白菜、木耳、大葱、椰汁、桂圆、柚子等果蔬。另外,应减少对土豆、南瓜、长豆角、香瓜、红李、黄桃等比值较低果蔬的摄入。 展开更多
关键词 天冬酰胺 谷氨酰胺 蔬菜 水果 尿素循环障碍 日常膳食
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液相色谱-串联质谱法测定特膳食品中天冬酰胺和谷氨酰胺
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作者 王奇 苏佳婷 +3 位作者 杨华瑞 赵云霞 肖伟敏 杨国武 《分析测试学报》 北大核心 2025年第5期884-891,共8页
建立了液相色谱-串联质谱测定特膳食品中天冬酰胺和谷氨酰胺的方法。样品经直接提取或酶解提取,加入内标后使用polar C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.6μm)分离,流动相为乙腈和0.02%甲酸溶液,梯度洗脱,在电喷雾正离子扫描模式下进... 建立了液相色谱-串联质谱测定特膳食品中天冬酰胺和谷氨酰胺的方法。样品经直接提取或酶解提取,加入内标后使用polar C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.6μm)分离,流动相为乙腈和0.02%甲酸溶液,梯度洗脱,在电喷雾正离子扫描模式下进行定性和定量检测。结果表明:天冬酰胺和谷氨酰胺的线性关系良好,相关系数均达0.999以上,线性范围为0~1000 ng/mL;液态和固态样本的检出限分别为0.8 mg/100g和4.0 mg/100g,定量下限分别为2.4 mg/100g和12 mg/100g;方法回收率为83.5%~104%,相对标准偏差为0.28%~4.2%(n=6)。该方法简便准确,实用性强,可实现特膳食品中天冬酰胺和谷氨酰胺的精准定量。 展开更多
关键词 液相色谱-串联质谱法 特膳食品 天冬酰胺 谷氨酰胺
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柱前衍生/高效液相色谱-串联质谱法测定氨基酸工业品中26种游离手性氨基酸含量 被引量：6
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作者 匡慧颖 李子樱 +6 位作者 朱波 张玉鑫 倪一平 肖伟敏 叶新玉 杨国武 杨燕 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期703-713,共11页
采用柱前衍生/高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定氨基酸工业品中26种游离手性氨基酸含量。样品经0.1 mol/L HCl溶液溶解提取后,在碱性条件下与Marfey试剂进行衍生化反应,使用Phe⁃nomenex Kinetex F5(250 mm×5 mm,4.6μm)色... 采用柱前衍生/高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定氨基酸工业品中26种游离手性氨基酸含量。样品经0.1 mol/L HCl溶液溶解提取后,在碱性条件下与Marfey试剂进行衍生化反应,使用Phe⁃nomenex Kinetex F5(250 mm×5 mm,4.6μm)色谱柱,以10 mmol/L乙酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,质谱分析采用电喷雾离子源负离子(ESI-)模式和多反应监测(MRM)模式。结果表明,各氨基酸衍生物之间的分离度良好,26种手性氨基酸的质量浓度在一定范围内与对应的峰面积呈线性关系,相关系数(r^(2))不小于0.9940,定量下限为0.5~12.5 ng/mL,加标回收率为80.3%~118%,相对标准偏差为0.47%~9.8%。应用该方法对180个工业样品进行检测,在L-型氨基酸纯品试剂、L-型稳定同位素标记氨基酸内标试剂、单品L-型氨基酸原料及复合氨基酸原料粉中均检出D-氨基酸。该研究首次评估了国内相关工业产品中手性氨基酸的质量状况,发现复合氨基酸原料需加强手性构型的监测管理,并深入分析了利用相关氨基酸纯品试剂作为标准物质或同位素内标时,对食品、环境、化工、医药等领域样品检测结果准确性可能造成的影响。该方法可为科研试剂、生物制药、化工食品和营养健康等领域提供质量管理和健康评测的有效技术手段。 展开更多
关键词 手性氨基酸 手性衍生化 高效液相色谱-串联质谱 工业品
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