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家鸽mtDNA ATPase8和ATPase6基因的分子克隆及序列分析 被引量:3
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作者 张慧霞 吴建平 +1 位作者 张利平 宗卉 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第5期9-15,共7页
利用特异引物,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,从家鸽(Columbalivia)肝脏组织的总DNA中扩增到目的片段,并将扩增产物克隆到pMD18-T载体中,经菌落PCR与酶切鉴定、序列测定及序列分析.结果表明:克隆得到了家... 利用特异引物,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,从家鸽(Columbalivia)肝脏组织的总DNA中扩增到目的片段,并将扩增产物克隆到pMD18-T载体中,经菌落PCR与酶切鉴定、序列测定及序列分析.结果表明:克隆得到了家鸽ATPase8-ATPase6基因842 bp及COII的部分序列共861 bp.用DNA分析软件对家鸽ATPase8和ATPase6基因与Genbank中的5种鸟类的ATPase8和ATPase6基因序列进行比较分析,表明家鸽与其他5种鸟类的ATPase8和ATPase6基因具有较高的同源性(88.1%~75.0%),其中与山斑鸠(Streptopelia orientalis)的同源性最高,分别为88.1%和86.5%.家鸽ATPase8和ATPase6基因核苷酸序列的组成中,(A+T)含量分别为55.95%和54.68%,与其它5种鸟类的(A+T)含量(53.5%~60.12%)和(51.9%~54.24%)相近,说明鸟类ATPase8和ATPase6基因序列组成对A+T核苷酸的偏倚程度比较低;而且家鸽该片段的基因组织结构与其他鸟类的基本一致,显示鸟类线粒体基因排列的保守性.家鸽与其他5种鸟类的ATPase8和ATPase6基因序列同源性的分子进化树聚类结果表明家鸽与山斑鸠亲缘关系最近. 展开更多
关键词 家鸽 线粒体基因组 克隆 序列分析
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应用PCR技术检测鸽源性成分 被引量:2
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作者 张慧霞 张利平 +3 位作者 吴建平 宗卉 张怀山 阮周曦 《中兽医医药杂志》 2008年第2期16-18,共3页
根据鸽子线粒体DNAD-loop环基因中的保守序列,用Primer5.0设计针对鸽的特异性扩增引物。通过聚合酶链式反应从鸽样品中得到约150bp的特异条带。通过测序对扩增产物进行验证,鸽组织的PCR产物序列与基因库中检索到的相应序列相吻合。该实... 根据鸽子线粒体DNAD-loop环基因中的保守序列,用Primer5.0设计针对鸽的特异性扩增引物。通过聚合酶链式反应从鸽样品中得到约150bp的特异条带。通过测序对扩增产物进行验证,鸽组织的PCR产物序列与基因库中检索到的相应序列相吻合。该实验建立了检测鸽动物源性成分的PCR方法,其检测灵敏度为0.1%。 展开更多
关键词 线粒体DNA 动物源性成分 聚合酶链式反应
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饲料中马、驴源性成分的分子生物学检测技术 被引量:10
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作者 宗卉 曾少灵 +1 位作者 林庆燕 温燕辉 《中国草食动物》 2005年第5期3-6,共4页
根据马、驴线粒体DNA中的保守区段设计了一对引物,通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)可以专一地检测扩增出马、驴源性成分的DNA片段,再经限制性内切酶Sau3A和AluⅠ的酶切鉴定可以区分马源性成分和驴源性成分,PCR扩增产... 根据马、驴线粒体DNA中的保守区段设计了一对引物,通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)可以专一地检测扩增出马、驴源性成分的DNA片段,再经限制性内切酶Sau3A和AluⅠ的酶切鉴定可以区分马源性成分和驴源性成分,PCR扩增产物的测序结果验证了酶切鉴定结果的正确性。引物灵敏度测试结果表明该方法的检测低限均达0.3%,该对引物可以成为检测马、驴源性成分高效准确的检测工具。 展开更多
关键词 马、驴线粒体DNA 聚合醇链式反应 驴源性成分
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