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拟除虫菊酯类农药及其代谢物免疫检测技术研究进展 被引量：4
1
作者 许梓红 罗林 +4 位作者 陈子键 王炳志 严义勇 孙远明 徐振林 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期320-328,共9页
拟除虫菊酯类农药是一类在世界范围内被广泛用于防治害虫的神经毒剂。由于用量大且存在一定毒性,因此,研究适合现场快速检测的筛查方法对于保障消费者身心健康具有重要作用。基于抗体特异性识别的免疫分析法具有简便、灵敏、快速及低成... 拟除虫菊酯类农药是一类在世界范围内被广泛用于防治害虫的神经毒剂。由于用量大且存在一定毒性,因此,研究适合现场快速检测的筛查方法对于保障消费者身心健康具有重要作用。基于抗体特异性识别的免疫分析法具有简便、灵敏、快速及低成本等特点,是当前食品安全主流快速检测方法。该文重点介绍了拟除虫菊酯类农药及其代谢物半抗原设计策略、抗体制备和免疫检测新方法等方面研究进展,并对其应用现状、存在的问题及未来前景进行了评述。 展开更多
关键词 拟除虫菊酯类 免疫法检测 半抗原设计 抗体制备
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基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析 被引量：2
2
作者 张世伟 吴会玲 +6 位作者 周迎春 王炳志 杨星星 杜业刚 汤璐 冯荣虎 郭继平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期271-276,共6页
建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗... 建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。 展开更多
关键词 3-氨基-2-恶唑烷酮 夹心酶联免疫分析 表位间隔距离 辣根过氧化物酶标记亲和素
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克拉玛依地区某奶牛场犊牛肺炎病原检测、分离鉴定及药敏试验 被引量：1
3
作者 邹阿玲 包灵杰 +7 位作者 谢本华 王磊 杨宏军 张亮 赵奕朵 张景艳 张康 李建喜 《中国奶牛》 2024年第4期32-36,共5页
为确定新疆克拉玛依地区某奶牛场犊牛肺炎的发病病因并提供合适的治疗方案和防控措施,采集该牛场12头患肺炎犊牛的鼻腔黏液,进行了牛呼吸道疾病相关病原检测、分离培养、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因测序和药物敏感性试验。结果... 为确定新疆克拉玛依地区某奶牛场犊牛肺炎的发病病因并提供合适的治疗方案和防控措施,采集该牛场12头患肺炎犊牛的鼻腔黏液,进行了牛呼吸道疾病相关病原检测、分离培养、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因测序和药物敏感性试验。结果显示,犊牛肺炎主要是以牛支原体为主的混合感染发病,从病料中分离得到的菌落呈现典型的“煎蛋样”,经过生化鉴定和16S rRNA测序分析,分离得到1株牛支原体,将其命名M.bovis KLMY株。通过药敏试验从13种药物里选择出恩诺沙星对M.bovis KLMY株最为敏感。通过以上研究表明,造成此次犊牛肺炎的主要病原为牛支原体,且耐药现象严重,本试验结果为该牛场进一步治疗犊牛肺炎提供了合理有效的依据。 展开更多
关键词 犊牛肺炎 牛支原体 混合感染 药敏试验 16S rRNA
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净化柱结合超高效液相色谱—串联质谱检测动物源性食品中16种喹诺酮药物 被引量：4
4
作者 余婷婷 梁松 +2 位作者 黄文慧 何洁 严义勇 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第1期55-62,67,共9页
目的:加强动物源性食品安全检测市场监管。方法:动物源性食品样品使用80%乙腈(含0.2%甲酸)提取,净化柱(Speedy Prep-Quino 1)净化后,利用超高效液相色谱—串联质谱检测16种喹诺酮类药物残留。结果:16种喹诺酮类药物的线性范围为1.6~40.0... 目的:加强动物源性食品安全检测市场监管。方法:动物源性食品样品使用80%乙腈(含0.2%甲酸)提取,净化柱(Speedy Prep-Quino 1)净化后,利用超高效液相色谱—串联质谱检测16种喹诺酮类药物残留。结果:16种喹诺酮类药物的线性范围为1.6~40.0μg/kg,相关系数r≥0.9961,检出限为0.14~0.80μg/kg,定量限为0.47~2.68μg/kg。在净化柱前处理后7个基质加标回收率为62%~112%,相对标准偏差为0.9%~18.7%。结论:该方法具有检测速度快、灵敏度高的特点,适用于羊肉、鸭肉、牛肉、鱼肉、鸡蛋、猪腰、鸭皮等动物源性食品。 展开更多
关键词 动物源性食品 喹诺酮 净化柱前处理 超高效液相色谱—串联质谱
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高通量高效快速净化方法结合UPLC-MS/MS测定粮食中黄曲霉毒素
5
作者 何洁 余婷婷 +8 位作者 梁松 王冰 李鹏 殷果 王炳志 徐梅 马红圳 闫研 严义勇 《中国测试》 CAS 北大核心 2024年第5期62-70,共9页
建立粮食中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2快捷高效的确证检测方法。通过对色谱及质谱分析条件、震荡提取方式、稀释倍数分别优化确定满足黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2检测方法的最优条件,同时,开发一款自动过柱仪与快速净化柱配合使用对粮食中... 建立粮食中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2快捷高效的确证检测方法。通过对色谱及质谱分析条件、震荡提取方式、稀释倍数分别优化确定满足黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2检测方法的最优条件,同时,开发一款自动过柱仪与快速净化柱配合使用对粮食中杂质进行高通量的高效净化,并采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)进行检测分析。粮食样品经84%乙腈水溶液提取、Speedy Prep®-Myco1流穿式净化柱净化,使用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,质谱采用电喷雾正离子模式和多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM)采集信号,外标法定量。对于大米、小黄米、小麦、黄豆、面粉、大麦、黑米、花生、玉米基质,本方法黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检出限和定量限分别为0.06~0.12μg/kg和0.20~0.40μg/kg,在其线性范围内相关系数R≥0.9993,在0.2、0.4、1、10、20、40μg/kg添加回收率为72.37%~118.4%,相对标准偏差(RSD,n=6)为0.64%~14%,回收率和精密度良好。该方法前处理操作简单、稳定性好,适用于粮食中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 超高效液相色谱-串联质谱 粮食 高通量自动过柱仪 高效前处理
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胶体金免疫层析法快速检测水产品中河豚毒素的研究 被引量：9
6
作者 韩金治 李亚茹 +5 位作者 罗林 关甜 雷红涛 蔡伟谊 王炳志 徐振林 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1598-1606,共9页
该文将特异性识别河豚毒素的单克隆抗体加以胶体金标记用作示踪物,建立了豚毒素的胶体金免疫层析技术快速检测方法。优化了胶体金体系的pH值、抗原抗体浓度、离子浓度、表面活性剂种类以及样品前处理方法。结果显示:在最优条件下,建立... 该文将特异性识别河豚毒素的单克隆抗体加以胶体金标记用作示踪物,建立了豚毒素的胶体金免疫层析技术快速检测方法。优化了胶体金体系的pH值、抗原抗体浓度、离子浓度、表面活性剂种类以及样品前处理方法。结果显示:在最优条件下,建立的胶体金免疫层析法对河豚毒素的定量检出限为0.5 ng/mL,线性范围为0.8~10.6 ng/mL,定性检出限(裸眼判别)为12.0 ng/mL。河豚、织纹螺等样品的加标回收率为70.5%~110%,相对标准偏差为3.7%~7.1%,检测结果与LC-MS/MS法一致。所建立的胶体金免疫层析技术在现场快速检测方面具有良好的可行性和实用性,可用于大量样品的快速筛查和河豚毒素中毒后的快速诊断。 展开更多
关键词 河豚毒素 单克隆抗体 胶体金免疫层析 快速检测 水产品
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快速检测生鲜乳中玉米赤霉醇试纸条的研制及其应用 被引量：3
7
作者 吴昌林 刘彬 +3 位作者 谢本华 毕思远 朱海 李晓娜 《安徽农业科学》 CAS 2018年第15期151-154,共4页
[目的]采用免疫胶体金技术,建立了一种快速检测玉米赤霉醇的试纸条方法。[方法]利用有机合成方法,研制了一种玉米赤霉醇半抗原,将其载体蛋白偶联得到免疫抗原,并通过人工免疫的方法获得单克隆抗体。通过酶联免疫法对制备的单克隆抗体的... [目的]采用免疫胶体金技术,建立了一种快速检测玉米赤霉醇的试纸条方法。[方法]利用有机合成方法,研制了一种玉米赤霉醇半抗原,将其载体蛋白偶联得到免疫抗原,并通过人工免疫的方法获得单克隆抗体。通过酶联免疫法对制备的单克隆抗体的性能进行了验证。玉米赤霉醇层析试纸条是利用单克隆抗体标记胶体金,其原理是玉米赤霉醇抗原和羊抗鼠Ig G分别喷到自制的膜(硝酸纤维)上,然后将样品垫、吸水垫分别放置在PVC板上,再制成试纸条。[结果]试纸条检测限可达0.5~1.0μg/kg,具有速度快、简单等优点。此外,该试纸条与大部分的玉米赤霉醇没有明显的交叉反应。[结论]利用该试纸条可实现对生鲜乳中玉米赤霉醇添加试验的准确判定。该试纸条有望实现对生鲜乳中玉米赤霉醇残留的快速筛查。 展开更多
关键词 生鲜乳 玉米赤霉醇 试纸条 单克隆抗体 免疫层析 胶体金
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一种新型拟除虫菊酯类农药半抗原的设计合成及其效果评价 被引量：1
8
作者 杨星星 付辉 +4 位作者 王炳志 李细清 张鑫 严义勇 王幸幸 《安徽农业科学》 CAS 2023年第1期188-191,共4页
基于菊酯类农药特殊结构及现有合成菊酯半抗原的种种问题,设计一种新型合成拟除虫菊酯半抗原方法。该方法以菊酯类原药为原料,经臭氧氧化、卤代反应、维悌希反应、水解4步化学反应合成半抗原。采用该方法合成了氯氰菊酯、氯菊酯、氟氯... 基于菊酯类农药特殊结构及现有合成菊酯半抗原的种种问题,设计一种新型合成拟除虫菊酯半抗原方法。该方法以菊酯类原药为原料,经臭氧氧化、卤代反应、维悌希反应、水解4步化学反应合成半抗原。采用该方法合成了氯氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯半抗原,这些半抗原分别与牛血清蛋白和卵清蛋白偶联,获得免疫抗原和包被抗原。用这4种免疫抗原分别免疫BALB/C小鼠,制备多克隆抗血清。采用免疫分析方法对这4种多克隆抗血清的性能进行测试,该抗血清的效价都较高,达到15000倍以上;用1 mg/L拟除虫菊酯原药进行竞争试验,除溴氰菊酯外其余抑制率均可达到50%以上。说明设计的半抗原结构和合成方法可行,为后续进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 拟除虫菊酯类农药 半抗原 合成 免疫分析
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