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LncRNA HOTAIR通过调控miR-30d影响鼻咽癌细胞的侵袭和迁移 被引量:5
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作者 陈曦 朱悦莹 +3 位作者 施典羽 颜帅 汤国栋 邹宇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期314-318,共5页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOX转录本反义RNA(HOTAIR)通过调控靶向小分子RNA-30d(miR-30d)影响鼻咽癌细胞侵袭和迁移的机制。方法在鼻咽癌CNE-2细胞中转染HOTAIRsiRNA,使用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定转染效果,Transwell法... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOX转录本反义RNA(HOTAIR)通过调控靶向小分子RNA-30d(miR-30d)影响鼻咽癌细胞侵袭和迁移的机制。方法在鼻咽癌CNE-2细胞中转染HOTAIRsiRNA,使用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定转染效果,Transwell法测定肿瘤细胞侵袭及迁移能力,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达;生物信息学软件分析HOTAIR与miR-30d区域结合位点,利用双荧光素酶报告系统确定两者结合关系;用RT-qPCR方法检测下调HOTAIR后鼻咽癌细胞中miR-30d表达的变化。将HOTAIR siRNA和miR-30d inhibitor共转染至CNE-2细胞中,用上述方法分析细胞侵袭、迁移及E-cadherin、vimentin和GRP78蛋白表达的变化。结果敲减HOTAIR表达后,CNE-2细胞的侵袭和迁移能力下降,细胞中vimentin和GRP78蛋白水平降低,E-cadherin蛋白水平升高;HOTAIR靶向调控miR-30d的表达,敲减HOTAIR的表达可以提高CNE-2细胞中miR-30d的水平,miR-30d inhibitor可以明显逆转敲减HOTAIR对CNE-2细胞侵袭、迁移能力以及E-cadherin、vimentin和GRP78蛋白表达的影响。结论HOTAIR通过负调控miR-30d影响GRP78和上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达,有利于促进鼻咽癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 长链非编码RNA HOTAIR 小分子RNA-30d 鼻咽癌 细胞侵袭 细胞迁移
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