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USP7抑制MDA5的K48位泛素化正向调控EV71感染炎症反应的机制研究
1
作者
潘倩瑜
林小嫚
+2 位作者
孙颖
杨洪
孟君
《中国免疫学杂志》
北大核心
2025年第10期2392-2396,共5页
目的:探讨USP7对EV71感染免疫和炎症反应的调控作用及机制。方法:以PMA诱导THP-1细胞分化为t-Mφ细胞,利用USP7抑制剂P22077处理细胞,分为DMSO对照组和P22077实验组,以EV71感染细胞,ELISA检测上清中IL-6、CCL3、TNF-α水平;RT-qPCR检测E...
目的:探讨USP7对EV71感染免疫和炎症反应的调控作用及机制。方法:以PMA诱导THP-1细胞分化为t-Mφ细胞,利用USP7抑制剂P22077处理细胞,分为DMSO对照组和P22077实验组,以EV71感染细胞,ELISA检测上清中IL-6、CCL3、TNF-α水平;RT-qPCR检测EV71-VP1 RNA表达,空斑试验检测细胞上清中病毒滴度变化;Western blot检测天然免疫信号通路相关分子的表达及磷酸化水平。构建Myc-USP7和Flag-MDA5的全长质粒并转染于HEK293T细胞中,分别用Myc抗体和Flag抗体进行蛋白质Co-IP,检测外源性USP7与MDA5的相互作用;以EV71感染t-Mφ细胞,分别用USP7抗体和MDA5抗体进行Co-IP,检测两者相互作用。以EV71感染DMSO对照组和P22077实验组t-Mφ细胞,CHX追逐实验检测MDA5和下游相关分子表达。共转染Flag-MDA5、Myc-USP7、HA-Ub或HA-K48质粒,采用Flag抗体进行Co-IP测定Myc-USP7调控Flag-MDA5泛素化及泛素化类型。采用MDA5抗体进行Co-IP测定t-Mφ细胞中USP7调控MDA5泛素化类型。结果:在EV71感染细胞中抑制USP7后,IL-6、CCL3、TNF-α蛋白表达降低(P<0.05);EV71复制增强(P<0.05)、滴度增加;MDA5表达降低、天然免疫信号通路中p-IKKα/β、p-IκBα和p-p65活化减弱。USP7可与MDA5相互作用,通过抑制MDA5的K48位泛素化抑制MDA5降解。结论:USP7通过抑制MDA5的K48位泛素化修饰稳定MDA5表达,从而正向调控EV71感染免疫和炎症反应。
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关键词
肠道病毒71型
泛素特异性蛋白酶7
黑色素瘤分化相关基因5
天然免疫
在线阅读
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职称材料
环指蛋白调控天然免疫反应的研究进展
被引量：
1
2
作者
林小嫚
潘倩瑜
孟君
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期844-848,共5页
环指蛋白是最大的E3泛素连接酶家族之一,可通过其E3泛素连接酶的特性调控蛋白的泛素化修饰。天然免疫是机体抵御病原体入侵的第一道防线。天然免疫反应中,多种关键蛋白均受泛素化修饰调控,在抑制和清除病原体的同时,维持适宜的炎症反应...
环指蛋白是最大的E3泛素连接酶家族之一,可通过其E3泛素连接酶的特性调控蛋白的泛素化修饰。天然免疫是机体抵御病原体入侵的第一道防线。天然免疫反应中,多种关键蛋白均受泛素化修饰调控,在抑制和清除病原体的同时,维持适宜的炎症反应。文章围绕环指蛋白在Toll样受体(TLR)信号通路、维甲酸诱导基因I样受体(RLR)信号通路和环鸟嘌呤-腺嘌呤合成酶-环腺嘌呤-干扰素基因刺激物(cGAS-cGAMP-STING)信号通路调控中的作用进行总结,以期为环指蛋白和抗感染天然免疫相关研究提供新思路。
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关键词
环指蛋白
天然免疫
信号通路
泛素化修饰
综述
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职称材料
题名
USP7抑制MDA5的K48位泛素化正向调控EV71感染炎症反应的机制研究
1
作者
潘倩瑜
林小嫚
孙颖
杨洪
孟君
机构
南方医科大学公共卫生学院
深圳市疾病预防控制中心病原微生物检测所
出处
《中国免疫学杂志》
北大核心
2025年第10期2392-2396,共5页
基金
深圳市科创委基础研究面上项目(JCYJ20230807151802006)
深圳市科技创新可持续发展专项(KCXFZ20201221173404012)。
文摘
目的:探讨USP7对EV71感染免疫和炎症反应的调控作用及机制。方法:以PMA诱导THP-1细胞分化为t-Mφ细胞,利用USP7抑制剂P22077处理细胞,分为DMSO对照组和P22077实验组,以EV71感染细胞,ELISA检测上清中IL-6、CCL3、TNF-α水平;RT-qPCR检测EV71-VP1 RNA表达,空斑试验检测细胞上清中病毒滴度变化;Western blot检测天然免疫信号通路相关分子的表达及磷酸化水平。构建Myc-USP7和Flag-MDA5的全长质粒并转染于HEK293T细胞中,分别用Myc抗体和Flag抗体进行蛋白质Co-IP,检测外源性USP7与MDA5的相互作用;以EV71感染t-Mφ细胞,分别用USP7抗体和MDA5抗体进行Co-IP,检测两者相互作用。以EV71感染DMSO对照组和P22077实验组t-Mφ细胞,CHX追逐实验检测MDA5和下游相关分子表达。共转染Flag-MDA5、Myc-USP7、HA-Ub或HA-K48质粒,采用Flag抗体进行Co-IP测定Myc-USP7调控Flag-MDA5泛素化及泛素化类型。采用MDA5抗体进行Co-IP测定t-Mφ细胞中USP7调控MDA5泛素化类型。结果:在EV71感染细胞中抑制USP7后,IL-6、CCL3、TNF-α蛋白表达降低(P<0.05);EV71复制增强(P<0.05)、滴度增加;MDA5表达降低、天然免疫信号通路中p-IKKα/β、p-IκBα和p-p65活化减弱。USP7可与MDA5相互作用,通过抑制MDA5的K48位泛素化抑制MDA5降解。结论:USP7通过抑制MDA5的K48位泛素化修饰稳定MDA5表达,从而正向调控EV71感染免疫和炎症反应。
关键词
肠道病毒71型
泛素特异性蛋白酶7
黑色素瘤分化相关基因5
天然免疫
Keywords
Enterovirus 71
Ubiquitin specific protease 7
Melanoma differentiation-associated gene 5
Innate immunity
分类号
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
环指蛋白调控天然免疫反应的研究进展
被引量：
1
2
作者
林小嫚
潘倩瑜
孟君
机构
南方医科大学公共卫生学院
深圳市疾病预防控制中心病原微生物检测所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期844-848,共5页
基金
深圳市科技创新可持续发展专项(KCXFZ20201221173404012)
广东省自然科学基金(2019A1515010394)
国家十三五科技重大专项(2018ZX10713-001-009)。
文摘
环指蛋白是最大的E3泛素连接酶家族之一,可通过其E3泛素连接酶的特性调控蛋白的泛素化修饰。天然免疫是机体抵御病原体入侵的第一道防线。天然免疫反应中,多种关键蛋白均受泛素化修饰调控,在抑制和清除病原体的同时,维持适宜的炎症反应。文章围绕环指蛋白在Toll样受体(TLR)信号通路、维甲酸诱导基因I样受体(RLR)信号通路和环鸟嘌呤-腺嘌呤合成酶-环腺嘌呤-干扰素基因刺激物(cGAS-cGAMP-STING)信号通路调控中的作用进行总结,以期为环指蛋白和抗感染天然免疫相关研究提供新思路。
关键词
环指蛋白
天然免疫
信号通路
泛素化修饰
综述
Keywords
RING finger protein
innate immunity
signaling pathway
ubiquitination modification
review
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
G353.11 [文化科学—情报学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
USP7抑制MDA5的K48位泛素化正向调控EV71感染炎症反应的机制研究
潘倩瑜
林小嫚
孙颖
杨洪
孟君
《中国免疫学杂志》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
环指蛋白调控天然免疫反应的研究进展
林小嫚
潘倩瑜
孟君
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
1
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职称材料
已选择
0
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