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羊溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌双重PCR鉴别检测方法的建立与应用
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作者 张峰源 夏贵泉 +3 位作者 孟卫芹 邓凤林 王金良 刘建钗 《中国动物检疫》 CAS 2024年第10期102-106,共5页
溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)和多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是两种条件性致病菌,可导致多种临床症状,给羊产业造成一定经济损失。为临床上快速、准确地鉴别诊断这两种细菌所导致的疾病,根据Mh的Lkt基因和Pm... 溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)和多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是两种条件性致病菌,可导致多种临床症状,给羊产业造成一定经济损失。为临床上快速、准确地鉴别诊断这两种细菌所导致的疾病,根据Mh的Lkt基因和Pm的kmt基因分别设计引物,建立了在一个反应体系中同时鉴别检测这2种细菌的PCR方法。结果显示:建立的PCR鉴别检测方法对Mh、Pm基因组DNA的检测限分别为7.23×10^(-6)、6.99×10^(-5) ng/μL,对羊链球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、羊支原体核酸检测均为阴性,在多次重复试验中均可检测出阳性样品,其反应试剂均扩增出预期大小的片段。对95份羊源疑似临床样品进行检测,Mh检出率为38.95%(37/95),Pm检出率为53.68%(51/95),混合感染检出率为12.63%(12/95),鉴别检测结果与单重PCR检测结果基本一致。结果表明:该方法具有较好的特异性、敏感性、重复性及稳定性,可用于临床检测,为羊呼吸道疾病的鉴别诊断提供了一种方便、快捷和准确的检测手段,具有良好的临床应用前景。 展开更多
关键词 溶血性曼氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 PCR 羊
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