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抗癌胚抗原纳米抗体与人Fc融合蛋白在毕赤酵母和HEK293细胞中的表达、纯化和性质比较
被引量：
1
1
作者
郭万美
陈玉娟
+6 位作者
周宇杭
陈泉
李飞
咸漠
冯东晓
年锐
宋海鹏
《科学技术与工程》
北大核心
2018年第21期30-35,共6页
通过对不同系统表达的肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)纳米抗体与人Fc融合蛋白(11C12-Fc)的表达、纯化及抗体性质等的比较分析,比较不同表达系统的特点及其对融合抗体性质的影响;从而为CEA融合纳米抗体在体内检测方面的应用提供理论依据。构建...
通过对不同系统表达的肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)纳米抗体与人Fc融合蛋白(11C12-Fc)的表达、纯化及抗体性质等的比较分析,比较不同表达系统的特点及其对融合抗体性质的影响;从而为CEA融合纳米抗体在体内检测方面的应用提供理论依据。构建两种11C12-Fc表达系统(Pichia pastoris和HEK293)相应的表达载体和菌株,分别进行诱导表达、分离纯化;并对其纯化产物的生物学活性等进行初步研究。成功构建了毕赤酵母、HEK293细胞两种CEA纳米抗体融合蛋白(11C12-Fc)表达系统并实现11C12-Fc的胞外分泌表达;通过protein A柱及阴离子交换层析纯化,获得了较高纯度和浓度的11C12-Fc样品;通过突变糖基化位点的方式有效去除了毕赤酵母表达11C12的过度糖基化作用;并且其抗体亲和力较突变前未发生明显改变,与HEK293细胞表达的11C12-Fc都表现出较高的亲和力。毕赤酵母和HEK293系统均能够表达具有较高生物活性的11C12-Fc,后续的科研或生产可根据实际需要和条件来合理选择表达系统。为后续的纳米抗体融合蛋白规模化生产、体内诊断与靶向治疗的应用提供了理论和技术参考。
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关键词
癌胚抗原
纳米抗体
Fc片段
融合蛋白
毕赤酵母
HEK293
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职称材料
金针菇子实体多糖FVPB1对小鼠T细胞和巨噬细胞的免疫调节作用
被引量：
20
2
作者
刘肖肖
汪雯翰
+5 位作者
冯婷
张劲松
吴莹莹
杨焱
刘艳芳
贾薇
《食用菌学报》
CSCD
北大核心
2019年第4期123-130,共8页
研究了金针菇(Flammulina velutipes)子实体多糖FVPB1对小鼠T细胞和巨噬细胞的免疫调节作用。结果表明:FVPB1能激活小鼠T细胞,促使其分泌干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF);能促进巨噬细胞RAW264.7释放NO,增加小鼠骨髓源巨噬细胞白...
研究了金针菇(Flammulina velutipes)子实体多糖FVPB1对小鼠T细胞和巨噬细胞的免疫调节作用。结果表明:FVPB1能激活小鼠T细胞,促使其分泌干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF);能促进巨噬细胞RAW264.7释放NO,增加小鼠骨髓源巨噬细胞白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平。研究结果表明金针菇多糖FVPB1具有良好的免疫调节功能,可用于相关功能性食品、保健品和药品的研发。
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关键词
脾淋巴细胞
巨噬细胞
细胞因子
NO
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职称材料
题名
抗癌胚抗原纳米抗体与人Fc融合蛋白在毕赤酵母和HEK293细胞中的表达、纯化和性质比较
被引量：
1
1
作者
郭万美
陈玉娟
周宇杭
陈泉
李飞
咸漠
冯东晓
年锐
宋海鹏
机构
长春理工大学生命科学
技术
学院
深圳市国创纳米抗体技术有限公司
中国科学院青岛生物能源与过程研究所
滨州医学院
出处
《科学技术与工程》
北大核心
2018年第21期30-35,共6页
文摘
通过对不同系统表达的肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)纳米抗体与人Fc融合蛋白(11C12-Fc)的表达、纯化及抗体性质等的比较分析,比较不同表达系统的特点及其对融合抗体性质的影响;从而为CEA融合纳米抗体在体内检测方面的应用提供理论依据。构建两种11C12-Fc表达系统(Pichia pastoris和HEK293)相应的表达载体和菌株,分别进行诱导表达、分离纯化;并对其纯化产物的生物学活性等进行初步研究。成功构建了毕赤酵母、HEK293细胞两种CEA纳米抗体融合蛋白(11C12-Fc)表达系统并实现11C12-Fc的胞外分泌表达;通过protein A柱及阴离子交换层析纯化,获得了较高纯度和浓度的11C12-Fc样品;通过突变糖基化位点的方式有效去除了毕赤酵母表达11C12的过度糖基化作用;并且其抗体亲和力较突变前未发生明显改变,与HEK293细胞表达的11C12-Fc都表现出较高的亲和力。毕赤酵母和HEK293系统均能够表达具有较高生物活性的11C12-Fc,后续的科研或生产可根据实际需要和条件来合理选择表达系统。为后续的纳米抗体融合蛋白规模化生产、体内诊断与靶向治疗的应用提供了理论和技术参考。
关键词
癌胚抗原
纳米抗体
Fc片段
融合蛋白
毕赤酵母
HEK293
Keywords
CEA
nanobody
Fc fragment
fusion protein
Pichki pastorii
HEK 293
分类号
Q816 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
金针菇子实体多糖FVPB1对小鼠T细胞和巨噬细胞的免疫调节作用
被引量：
20
2
作者
刘肖肖
汪雯翰
冯婷
张劲松
吴莹莹
杨焱
刘艳芳
贾薇
机构
上海海洋大学食品学院
上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程
技术
研究中心国家食用菌加工
技术
研发分中心上海市农业遗传育种重点开放实验
深圳市国创纳米抗体技术有限公司
吉林农业大学中药材学院
出处
《食用菌学报》
CSCD
北大核心
2019年第4期123-130,共8页
基金
上海市农业科学院卓越团队[农科创2017(A-06)]
上海市现代农业产业体系[沪农科产字(2019)第9号]
文摘
研究了金针菇(Flammulina velutipes)子实体多糖FVPB1对小鼠T细胞和巨噬细胞的免疫调节作用。结果表明:FVPB1能激活小鼠T细胞,促使其分泌干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF);能促进巨噬细胞RAW264.7释放NO,增加小鼠骨髓源巨噬细胞白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平。研究结果表明金针菇多糖FVPB1具有良好的免疫调节功能,可用于相关功能性食品、保健品和药品的研发。
关键词
脾淋巴细胞
巨噬细胞
细胞因子
NO
Keywords
Spleen lymphocyte
macrophage
cytokine
NO
分类号
S64 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗癌胚抗原纳米抗体与人Fc融合蛋白在毕赤酵母和HEK293细胞中的表达、纯化和性质比较
郭万美
陈玉娟
周宇杭
陈泉
李飞
咸漠
冯东晓
年锐
宋海鹏
《科学技术与工程》
北大核心
2018
1
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职称材料
2
金针菇子实体多糖FVPB1对小鼠T细胞和巨噬细胞的免疫调节作用
刘肖肖
汪雯翰
冯婷
张劲松
吴莹莹
杨焱
刘艳芳
贾薇
《食用菌学报》
CSCD
北大核心
2019
20
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