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题名水产品中苯甲酸快速检测试纸条的制备
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作者
刘丽环
陈纯
黄藤波
曹涛
李广鹏
李森
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机构
深圳市亿腾检测科技有限公司
广东省检迅检测科技有限公司
深圳市深业航天食品与环境检测科技有限公司
深圳市汇知科技有限公司
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出处
《江西水产科技》
2022年第5期6-13,共8页
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文摘
选择柠檬酸三钠还原制备胶体金,制备的胶体金粒径为20~40 nm;利用胶体金来标记苯甲酸单克隆抗体,再将BA人工合成抗原(BA-BSA)和羊抗鼠二抗(IgG)分别包被在硝酸纤维素膜的T线和C线处,组装成胶体金免疫层析试纸条,快速检测水产品中苯甲酸。结果表明,单抗的最佳标记量为5.0μg/mL,最佳pH为9.0,复溶液为0.5%的Tween 20、pH为9.0的0.5 mol/L Tris;抗原的最佳包被量为7.0μL,二抗的最佳包被量为9.0μL,胶体金标记抗体量为5.0μL,胶体金免疫层析试纸条的目测检测限为1.0 mg/L。试验对苯甲酸试纸条的重复性、稳定性、假阳性及假阴性率的测试验证,结果良好。该试纸条对甲苯、苯乙酸、苯磺酸、苯丙氨酸等均不发生交叉反应性。将试纸条方法和高效液相色谱法做比较,结果显示试纸条和高效液相色谱法结果一致。制作的试纸条在检测水产品中苯甲酸的测试中是可靠的,检测准确且高效。
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关键词
水产品
苯甲酸
快速检测
试纸条
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分类号
O657
[理学—分析化学]
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题名水产品中苯甲酸快速检测单克隆抗体的制备
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作者
陈纯
黄藤波
林燕翠
曹涛
李广鹏
甘慧
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机构
深圳市亿腾检测科技有限公司
广东省检迅检测科技有限公司
深圳市深业航天食品与环境检测科技有限公司
深圳市汇知科技有限公司
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出处
《江西水产科技》
2022年第4期11-16,共6页
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文摘
【目的】构建水产品中苯甲酸快速检测单克隆抗体。【方法】采用1,4-丁二醇二缩甘醚把半抗原和载体蛋白进行了偶联制备了免疫原;用戊二醛法制备了包被原,紫外光谱法对改造的抗原进行了初步鉴定,以BA-OVA为包被原,筛选出4株分泌抗BA抗体的杂交瘤细胞并通过动物免疫试验进一步验证;采用体内诱生法制备单抗腹水,并用辛酸-硫酸铵法和DEAE纤维素柱进行纯化;对获得的单克隆抗体进行亚型鉴定。【结果】建立间接ELISA和间接竞争ELISA法对血清多克隆抗体的效价和特异性进行了测定。经测定,单克隆抗体腹水效价为l∶5~20×l0^(4),其中1株抗体(J5F4)对苯甲酸的IC_(50)为225.3 ng/mL;同苯酚、苯甲醇的交叉反应率分别为9.57%和6.30%,得到的抗体特异性较好,可以应用于免疫学检测中。【结论】制作的改造抗原偶联是成功的,并且利用小鼠免疫方案具有很好的可行性,为下一步试纸条的生产打下了坚实的基础。
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关键词
水产品
苯甲酸
快速检测
单克隆抗体
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分类号
X592
[环境科学与工程—环境工程]
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