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禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒灵敏性试验被引量：5: 1; 作者秦智锋吕建强 +8 位作者肖性龙张东林李环玲陈书琨钟安清黄运生林庆燕林镜中刘胜利《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期336-340,共5页; 为了确定深圳出入境检验检疫局和深圳太太基因工程有限公司联合研制的禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒对H5和H9亚型禽流感的灵敏度,通过测定已知鸡胚半数致死量(ELD50)的标准毒株的进行了定量。利用9～11日龄SPF鸡胚... 展开更多; 关键词禽流感病毒鸡胚半数致死量多重实时荧光RT-PCR 灵敏性试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪伪狂犬病病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：11: 2; 作者刘园园吴晖 +3 位作者肖性龙贾赟吴斌余以刚《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第4期76-79,共4页; 本研究针对猪伪狂犬病病毒的gE基因序列进行分析比较,设计了一条TaqMan-MGB探针,建立了区别野毒株及基因缺失疫苗株的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法检测猪伪狂犬病病毒特异性强,能很好的区分猪伪狂犬病病毒与其它病毒。用该方法... 展开更多; 关键词猪伪狂犬病病毒 TaqMan-MGB荧光定量PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

含组氨酸纯化标签的假病毒表达载体的构建与应用被引量：7: 3; 作者肖性龙余以刚 +2 位作者翟建新李惠芳吴晖《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期687-692,共6页; 为了RNA类病毒进行核酸检测提供一种更稳定、更方便的全程监控技术,本文研究了含组氨酸纯化标签的假病毒监控内标和阳性对照的制备方法.通过基因工程手段将6个组氨酸插入MS2噬菌体包膜蛋白的β-发夹环结构中,成功构建带组氨酸纯化标签... 展开更多; 关键词假病毒组氨酸标签表达载体检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

多重荧光RT-PCR同时检测口蹄疫O A AsiaⅠ三种血清型被引量：5: 4; 作者邱杨肖性龙 +3 位作者赵丽刘建丽余以刚吴晖《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期9-11,共3页; 口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是一种动物烈性传染病,被OIE列为A类家畜传染病之首。根据O、AsiaⅠ、A三种血清型FMDV的保守基因序列,设计特异性引物和以不同荧光素标记的TaqMan探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒多重荧光PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫通用型实时荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 5; 作者邱杨肖性龙 +6 位作者刘建丽梅艳群岳学民李惠芳张经纬余以刚吴晖《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第8期20-22,共3页; 关键词 PCR检测方法口蹄疫病毒世界动物卫生组织通用型联合国粮农组织烈性传染病 RT 荧光; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒灵敏性试验被引量：5: 1; 作者秦智锋吕建强肖性龙张东林李环玲陈书琨钟安清黄运生林庆燕林镜中刘胜利; 机构深圳出入境检验检疫局深圳太太基因工程有限公司; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期336-340,共5页; 基金深圳出入境检验检疫局科学研究与技术开发重大项目; 文摘为了确定深圳出入境检验检疫局和深圳太太基因工程有限公司联合研制的禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒对H5和H9亚型禽流感的灵敏度,通过测定已知鸡胚半数致死量(ELD50)的标准毒株的进行了定量。利用9～11日龄SPF鸡胚,对深圳出入境检验检疫局保存的H5和H9亚型标准禽流感毒株进行了鸡胚半数致死量(ELD50)的测定,结果为H5亚型禽流感毒株的半数致死量为10-7.75/0.2mL,H9亚型禽流感毒株的半数致死量为10-8.5/0.2mL。用所研制的禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒对H5和H9亚型标准禽流感毒株原液进行10倍连续稀释,进行实时荧光RT-PCR灵敏度的测定,结果发现:试剂盒检测H5亚型标准禽流感毒株的灵敏度为标准毒株10-5倍稀释液,该稀释液含有281ELD50病毒量;检测H9亚型标准禽流感毒株的灵敏度为标准毒株10-8倍稀释液,该稀释液含有15.8ELD50病毒量。同时检测H5和H9时,试剂盒的灵敏度要比单独检测一个亚型时的灵敏度增加一个数量级。本灵敏度已经能够检测到感染鸡的喉拭子和(或)泄殖腔拭子所采集的病毒量,能够满足检验检疫的实际需要。; 关键词禽流感病毒鸡胚半数致死量多重实时荧光RT-PCR 灵敏性试验; Keywords avian influenza virus the embryo median lethal dose multiplex real-time RT-PCR; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪伪狂犬病病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：11: 2; 作者刘园园吴晖肖性龙贾赟吴斌余以刚; 机构华南理工大学轻工与食品学院深圳太太基因工程有限公司辽宁省检验检疫局技术中心; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第4期76-79,共4页; 文摘本研究针对猪伪狂犬病病毒的gE基因序列进行分析比较,设计了一条TaqMan-MGB探针,建立了区别野毒株及基因缺失疫苗株的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法检测猪伪狂犬病病毒特异性强,能很好的区分猪伪狂犬病病毒与其它病毒。用该方法对83份疑似样本进行检测,与常规PCR检测法符合率达到100%,表明该方法用于检测猪伪狂犬病病毒具有良好的实用性。; 关键词猪伪狂犬病病毒 TaqMan-MGB荧光定量PCR 检测; Keywords pseudorabies virus （PRV） fluorescence quantitative PCR（FQ-PCR）） detect; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名含组氨酸纯化标签的假病毒表达载体的构建与应用被引量：7: 3; 作者肖性龙余以刚翟建新李惠芳吴晖; 机构华南理工大学轻工与食品学院食品安全与检测研究中心深圳太太基因工程有限公司; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期687-692,共6页; 基金教育部新世纪优秀人才支持计划基金项目(No.NCET-06-0746) 2009年度广东省自然科学基金项目(No.9151064101000070)~~; 文摘为了RNA类病毒进行核酸检测提供一种更稳定、更方便的全程监控技术,本文研究了含组氨酸纯化标签的假病毒监控内标和阳性对照的制备方法.通过基因工程手段将6个组氨酸插入MS2噬菌体包膜蛋白的β-发夹环结构中,成功构建带组氨酸纯化标签假病毒的通用表达载体.外源基因序列插入载体后,经诱导表达与镍离子亲和层析纯化后,可获得高浓度、高纯度的假病毒,在4℃和-20℃条件下,可用SM缓冲液稳定保存1年以上.; 关键词假病毒组氨酸标签表达载体检测; Keywords armored virus his tag expressing vector detection; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名多重荧光RT-PCR同时检测口蹄疫O A AsiaⅠ三种血清型被引量：5: 4; 作者邱杨肖性龙赵丽刘建丽余以刚吴晖; 机构东莞出入境检验检疫局华南理工大学轻工与食品学院深圳太太基因工程有限公司; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第6期9-11,共3页; 基金广东出入境检验检疫局科技计划项目(2009GDK41); 文摘口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是一种动物烈性传染病,被OIE列为A类家畜传染病之首。根据O、AsiaⅠ、A三种血清型FMDV的保守基因序列,设计特异性引物和以不同荧光素标记的TaqMan探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了检测O、AsiaⅠ、A三种血清型FMDV的多重荧光RT-PCR检测方法。结果表明,该方法有效、特异、敏感,对于口蹄疫病毒的诊断和疫苗的使用具有重要意义。; 关键词口蹄疫病毒多重荧光PCR 检测; Keywords FMDV multiple real-time PCR detection; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫通用型实时荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 5; 作者邱杨肖性龙刘建丽梅艳群岳学民李惠芳张经纬余以刚吴晖; 机构东莞出入境检验检疫局华南理工大学轻工与食品学院深圳太太基因工程有限公司; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第8期20-22,共3页; 关键词 PCR检测方法口蹄疫病毒世界动物卫生组织通用型联合国粮农组织烈性传染病 RT 荧光; 分类号 S858.23 [农业科学—临床兽医学] S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	禽流感H5、H7、H9亚型多重实时荧光RT-PCR检测试剂盒灵敏性试验	秦智锋吕建强肖性龙张东林李环玲陈书琨钟安清黄运生林庆燕林镜中刘胜利	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪伪狂犬病病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用	刘园园吴晖肖性龙贾赟吴斌余以刚	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2009	11	在线阅读下载PDF 职称材料
3	含组氨酸纯化标签的假病毒表达载体的构建与应用	肖性龙余以刚翟建新李惠芳吴晖	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	7	在线阅读下载PDF 职称材料
4	多重荧光RT-PCR同时检测口蹄疫O A AsiaⅠ三种血清型	邱杨肖性龙赵丽刘建丽余以刚吴晖	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2010	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	口蹄疫通用型实时荧光RT-PCR检测方法的建立	邱杨肖性龙刘建丽梅艳群岳学民李惠芳张经纬余以刚吴晖	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料