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题名进口锦鲤暴发病病原的nested-PCR鉴定
被引量：61
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作者
刘荭
史秀杰
高隆英
江育林
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机构
深圳出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
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出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期414-418,共5页
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基金
中华人民共和国质量监督检验检疫总局资助项目 (批号 :K0 0 9-2 0 0 0 )
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文摘
为了查明锦鲤暴发性疾病的病因 ,将患病锦鲤的脑、肝、脾和肾等组织悬液接种到CO、CK和EPC等鱼类细胞系中培养 ,均未发现细胞病变 ;从病灶中取样进行病原菌的分离和培养 ,证明锦鲤有副溶血弧菌和嗜水气单胞菌的感染。制备锦鲤疱疹病毒 (KHV)的 2对引物KHV9/ 5F和KHV9/ 5R ,KHV1和KHV2 ,用嵌套式聚合酶链式反应 (nested -PCR)在脑和脾脏组织的抽提物中扩增出长度为 4 12bp的特异性的DNA片段。将该片段的nested -PCR扩增产物纯化后 ,克隆、测序。用NCBI -Blast软件将测序结果在Genebank中进行搜寻、比较 ,结果发现与注册号为AF4 1180 3的KHV基因序列的一部分片段有 99%的同源性。因此初步判断这次锦鲤暴发性疾病是由KHV引起的 。
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关键词
锦鲤
暴发病
病原
nested-PCR鉴定
嵌套式聚合酶链式反应
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Keywords
koi herpesvirus, koi, nested-polymerase chain reaction assay (nested-PCR)
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分类号
S943
[农业科学—水产养殖]
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