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根据线粒体基因的特异性鉴别检测饲料中的动物源性成分被引量：23: 1; 作者杨宝华宗卉《饲料研究》 CAS 2002年第5期1-3,共3页; 为了防止海绵状脑病疫区和痒病疫区的反刍动物源性饲料进入动物食物链，继而进入人类消费的食物链，因而，非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定检测。我们运用聚合酶链反应技术（Polymerase Chain Reaction，PCR），以检... 展开更多; 关键词线粒体基因特异性饲料动物源性成分饲料检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

桔小实蝇线粒体基因组全序列及其分析被引量：17: 2; 作者徐浪余道坚 +4 位作者张润杰李建光康林陈志粦焦懿《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期755-761,共7页; 桔小实蝇Bactrocera dorsalis线粒体基因组全序列对研究实蝇分子系统进化具有重要意义。本研究通过DNA测序和克隆技术,对桔小实蝇mtDNA全序列进行了测定和分析。结果表明:桔小实蝇线粒体基因组全长15915bp(GenBank序列号:DQ845759)。基... 展开更多; 关键词双翅目实蝇科桔小实蝇线粒体基因组; 在线阅读下载PDF 职称材料

华南地区三株新城疫地方强毒株的序列测定及其系统发育分析被引量：8: 3; 作者秦智锋贺东生 +3 位作者吴红专娄华杨德威刘福安《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期67-71,共5页; 用设计的特异性引物,通过一步法RT-PCR扩增出5个毒株的897bp片段,对其中的3株病毒cDNA分析表明:各毒株的半胱胺酸位点和个数及糖基化位点基本没有改变。各毒株在抗原决定簇氨基酸位点HN基因346～353处的碱基突变甚多,且氨基酸也出现了... 展开更多; 关键词华南地区新城疫地方强毒株新城疫病毒 HN基因 RT-PCR 系统发育测序; 在线阅读下载PDF 职称材料

美洲型猪蓝耳病病毒高致病性变异株RT-LAMP检测方法的建立被引量：12: 4; 作者曾少灵孙洁 +9 位作者秦智锋阮周曦林庆燕花群义曹琛福杨俊兴吕建强张彩虹陈兵陈书琨《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第12期22-27,共6页; 设计两套反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,建立了检测美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株的RT-LAMP方法。采用RT-LAMP方法与实时荧光RT-PCR方法检测58份病料,结果一致,但RT-LAMP方法的灵敏度大约高出10倍。RT-LAMP方法特异性良好... 展开更多; 关键词 RT-LAMP 猪蓝耳病猪蓝耳病病毒高致病性变异株; 在线阅读下载PDF 职称材料

鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达被引量：13: 5; 作者付峰刘荭 +2 位作者范万红江育林黄倢《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2007年第4期72-76,共5页; 根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物,在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT-PCR方法扩增该段糖蛋白基因,将所得的基因片段(517和521)克隆至穿梭载体pGAPZαA/B之GAP启动子下游位点,构建含α信号肽的重组表达载体。... 展开更多; 关键词鲤春病毒血症病毒糖蛋白克隆毕赤酵母分泌表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸭病毒性肝炎实验室诊断方法的研究被引量：10: 6; 作者秦智锋李环玲 +1 位作者贺东生刘福安《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期310-313,共4页; 将鸭病毒性肝炎病毒 (duckhepatitisvirusDHV) (ATCC株 )用鸡胚传一代后 ,测出此病毒的鸡胚半数致死量 (ELD50 )为10 -5.5。通过多次重复试验 ,建立了利用鸡胚中和试验和雏鸭中和试验检测鸭病毒性肝炎 (DVH)的诊断方法。 7株DHV毒株在... 展开更多; 关键词鸭病毒性肝炎鸡胚中和试验雏鸭中和试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

PRRSV云南A06株ORF5和ORF7基因的克隆与序列分析被引量：2: 7; 作者曾少灵林庆燕 +8 位作者花群义张彩虹阮周曦杨俊兴孙洁秦智锋曹琛福陈兵吕建强《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第3期12-17,共6页; 设计2对引物分别扩增PRRSV的ORF5和ORF7基因,对从云南某猪场分离到的毒株A06进行RT-PCR检测,得到2条特异性扩增带,克隆至pMD18-T载体并测序。将A06株的ORF5和ORF7基因及其推断氨基酸序列分别与PRRSV欧洲型代表株LV、美洲型代表株VR2332... 展开更多; 关键词 PRRSV ORF5基因 ORF7基因亲缘关系图谱; 在线阅读下载PDF 职称材料

鹅源性成分PCR检测方法的建立被引量：4: 8; 作者汪燕玲宗卉 +1 位作者阮周曦张利平《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第24期11432-11434,共3页; [目的]建立一种检测鹅源性成分的PCR方法。[方法]以15种动物的DNA为模板,利用鹅的特异性引物进行PCR反应,PCR产物用1.4%的琼脂糖凝胶电泳检测并测序,检测引物的特异性和敏感性。[结果]通过PCR反应从鹅样品中扩增到了304 bp的目的片段,... 展开更多; 关键词鹅线粒体DNA 动物源性成分聚合酶链式反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名根据线粒体基因的特异性鉴别检测饲料中的动物源性成分被引量：23: 1; 作者杨宝华宗卉; 机构深圳出入境检验检疫局动植食中心; 出处《饲料研究》 CAS 2002年第5期1-3,共3页; 文摘为了防止海绵状脑病疫区和痒病疫区的反刍动物源性饲料进入动物食物链，继而进入人类消费的食物链，因而，非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定检测。我们运用聚合酶链反应技术（Polymerase Chain Reaction，PCR），以检测不同种动物特异性线粒体基因片段为目标，分别建立了从动物源性饲料中鉴别检测猪、鸡、马成分的方法。该方法具有灵敏度高、快速和特异性强的优点，可作为动物源性饲料中猪、鸡、马源性成份鉴别检测的常规方法之一。; 关键词线粒体基因特异性饲料动物源性成分饲料检测; 分类号 S816.2 [农业科学—饲料科学] S816.17 [农业科学—饲料科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名桔小实蝇线粒体基因组全序列及其分析被引量：17: 2; 作者徐浪余道坚张润杰李建光康林陈志粦焦懿; 机构深圳出入境检验检疫局动植中心中山大学昆虫学研究所北京出入境检验检疫局; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期755-761,共7页; 基金国家奥运科技项目(2004BA904B06) 国家"973"项目(2002CB111405) 国家自然科学基金项目(30471162); 文摘桔小实蝇Bactrocera dorsalis线粒体基因组全序列对研究实蝇分子系统进化具有重要意义。本研究通过DNA测序和克隆技术,对桔小实蝇mtDNA全序列进行了测定和分析。结果表明:桔小实蝇线粒体基因组全长15915bp(GenBank序列号:DQ845759)。基因组碱基组成为39.3%A,16.2%C,10.2%G,34.3%T,由13个蛋白编码基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因以及一个非编码的控制区域(A+T-rich区)组成。7个蛋白编码基因和13个tRNA基因从J链编码,其余6个蛋白编码基因和9个tRNA基因从N链编码。位于J链上的蛋白编码基因具有近似的A、T含量,而位于N链上的蛋白编码基因的A的含量明显高于T的含量。以mtDNACOⅠ基因为例,比较了桔小实蝇与其他14种实蝇的亲缘关系,结果显示其与同亚属(果实蝇亚属Bactrocera)内的其他近缘种相互间的同源性很高。; 关键词双翅目实蝇科桔小实蝇线粒体基因组; Keywords Diptera Tephritidae Bactrocera dorsalis mitochondrial genome; 分类号 Q966 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名华南地区三株新城疫地方强毒株的序列测定及其系统发育分析被引量：8: 3; 作者秦智锋贺东生吴红专娄华杨德威刘福安; 机构深圳出入境检验检疫局动植食中心动检室华南农业大学动物医学系农业部养禽与禽病重点开放实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期67-71,共5页; 基金广东省自然科学基金资助(980160); 文摘用设计的特异性引物,通过一步法RT-PCR扩增出5个毒株的897bp片段,对其中的3株病毒cDNA分析表明:各毒株的半胱胺酸位点和个数及糖基化位点基本没有改变。各毒株在抗原决定簇氨基酸位点HN基因346～353处的碱基突变甚多,且氨基酸也出现了部分的突变。针对HN基因897bp片段构建了相应的系统发育树,系统发育分析表明:中国(华南)地区NDV各毒株与欧美国家的Ⅱ至Ⅴ基因群明显分离,遗传规律较远;NDV WS1和NDV HY与台湾省NDV各毒株归属为一组,与中国毒株的遗传距离较近,均属新近出现的基因型Ⅶ型,NDⅦ型在远东和西欧(Ⅶb)和及中东和南非(Ⅶa)广泛存在,可能形成了ND的第4次大流行。这些一方面说明NDV的变异可能已突破种源屏障,在鸡与鹅之间进行相互传播;另一方面说明中国古老的NDV毒株仍然持续存在,并逐渐向强毒株突变,与其他新出现的基因型毒株"共循环"。; 关键词华南地区新城疫地方强毒株新城疫病毒 HN基因 RT-PCR 系统发育测序; Keywords NDV HN gene RT-PCR Phylogenic analysis; 分类号 S852.659.5 [农业科学—基础兽医学] S858.315.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名美洲型猪蓝耳病病毒高致病性变异株RT-LAMP检测方法的建立被引量：12: 4; 作者曾少灵孙洁秦智锋阮周曦林庆燕花群义曹琛福杨俊兴吕建强张彩虹陈兵陈书琨; 机构深圳出入境检验检疫局动植中心深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第12期22-27,共6页; 文摘设计两套反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,建立了检测美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株的RT-LAMP方法。采用RT-LAMP方法与实时荧光RT-PCR方法检测58份病料,结果一致,但RT-LAMP方法的灵敏度大约高出10倍。RT-LAMP方法特异性良好,检测猪瘟、伪狂犬病和细小病毒等均未出现交叉反应。结果表明,建立的美洲型猪蓝耳病病毒及其高致病性变异株RT-LAMP检测方法具有特异、灵敏、高效和简便的特点,在我国猪蓝耳病快速检测领域将有广阔的应用前景。; 关键词 RT-LAMP 猪蓝耳病猪蓝耳病病毒高致病性变异株; Keywords RT-LAMP PRRS highly pathogenic American PRRSV mutation strain; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达被引量：13: 5; 作者付峰刘荭范万红江育林黄倢; 机构农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所深圳出入境检验检疫局动植食中心水生动物病重点实验室; 出处《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2007年第4期72-76,共5页; 基金国家质检总局科研项目(2002IK063) 黄海水产研究所海水养殖生物疾病控制与分子病理学实验室开放课题共同资助; 文摘根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物,在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT-PCR方法扩增该段糖蛋白基因,将所得的基因片段(517和521)克隆至穿梭载体pGAPZαA/B之GAP启动子下游位点,构建含α信号肽的重组表达载体。获得的重组质粒pGAPZαA-517和pGAPZαB-521经线性化后,电击法转化毕赤酵母SMD1168菌株,构建分泌型表达SVCV糖蛋白的重组酵母菌株。酵母菌落PCR法检测表明,已成功构建分泌表达SVCV糖蛋白的酵母基因工程菌株,斑点印迹法进一步分析表明有目的蛋白的成功表达。; 关键词鲤春病毒血症病毒糖蛋白克隆毕赤酵母分泌表达; Keywords Spring viremia of carp virus Glycoprotein Clone Pichia pastoris Expression; 分类号 S94 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸭病毒性肝炎实验室诊断方法的研究被引量：10: 6; 作者秦智锋李环玲贺东生刘福安; 机构深圳出入境检验检疫局动植食中心动检室香港英特威有限公司广州办事处华南农业大学动物医学系; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期310-313,共4页; 文摘将鸭病毒性肝炎病毒 (duckhepatitisvirusDHV) (ATCC株 )用鸡胚传一代后 ,测出此病毒的鸡胚半数致死量 (ELD50 )为10 -5.5。通过多次重复试验 ,建立了利用鸡胚中和试验和雏鸭中和试验检测鸭病毒性肝炎 (DVH)的诊断方法。 7株DHV毒株在鸡胚中和试验中的结果是 :胚传一代尿囊液死亡率为 2 / 8～ 5 / 8,1∶10血清中和保护率为 8/ 8,1∶10 0 0肝病料死亡率为 3/ 8～8/ 8,1∶10血清中和保护率为 8/ 8,正常对照全部存活。雏鸭中和试验的结果是 :2 4小时内 1∶10肝病料死亡率为 3/ 8～ 8/ 8,1∶5血清中和保护率为 8/ 8。; 关键词鸭病毒性肝炎鸡胚中和试验雏鸭中和试验; Keywords DHV Chicken embryo neutralization test Duckling neutralization test; 分类号 S852.53 [农业科学—基础兽医学] S858.32 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PRRSV云南A06株ORF5和ORF7基因的克隆与序列分析被引量：2: 7; 作者曾少灵林庆燕花群义张彩虹阮周曦杨俊兴孙洁秦智锋曹琛福陈兵吕建强; 机构深圳出入境检验检疫局动植中心; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第3期12-17,共6页; 基金国家质检总局科技项目(2008IK262-2) 深圳出入境检验检疫局科技项目(SZ2007038); 文摘设计2对引物分别扩增PRRSV的ORF5和ORF7基因,对从云南某猪场分离到的毒株A06进行RT-PCR检测,得到2条特异性扩增带,克隆至pMD18-T载体并测序。将A06株的ORF5和ORF7基因及其推断氨基酸序列分别与PRRSV欧洲型代表株LV、美洲型代表株VR2332和7株中国分离的美洲型毒株相应基因进行核苷酸和氨基酸序列比对分析。结果显示,A06株属于美洲型,其ORF5和ORF7基因及推断氨基酸与我国2006年分离的4株HP-PRRSV代表株的相似性高达98%～99%,与欧洲型代表株LV的相似性只有56%～64%。分别构建了以上毒株ORF5和ORF7基因的亲缘关系图谱,反映了A06株ORF5和ORF7基因的进化位置,完成2个基因的遗传变异分析。; 关键词 PRRSV ORF5基因 ORF7基因亲缘关系图谱; Keywords PRRSV ORF5 gene ORF7 gene phylogenetic tree; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学] Q788 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鹅源性成分PCR检测方法的建立被引量：4: 8; 作者汪燕玲宗卉阮周曦张利平; 机构甘肃农业大学动物科学技术学院深圳出入境检验检疫局动植中心; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第24期11432-11434,共3页; 基金深圳出入境检验检疫局资助项目; 文摘 [目的]建立一种检测鹅源性成分的PCR方法。[方法]以15种动物的DNA为模板,利用鹅的特异性引物进行PCR反应,PCR产物用1.4%的琼脂糖凝胶电泳检测并测序,检测引物的特异性和敏感性。[结果]通过PCR反应从鹅样品中扩增到了304 bp的目的片段,其他物种火鸡、鸭、鹌鹑、鸵鸟、鸽子、鸡、马、牛、羊、猪、狗、驴、猫、鱼和空白对照则无目的片段,表明该引物的特异性良好。鹅组织PCR产物的核苷酸序列与GenBank中检索到的相应序列基本符合,相似性为98%;PCR检测方法的检测灵敏度为0.01%。[结论]该PCR检测方法特异性强、准确性好、灵敏度高、可重复性好,为明确食品与饲料的成分和来源,预防禽流感的传播提供了有效的分子生物学检测方法。; 关键词鹅线粒体DNA 动物源性成分聚合酶链式反应; Keywords Coose Mitochondrial DNA Animal-derived ingredients Polymerase chain reaction; 分类号 S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	根据线粒体基因的特异性鉴别检测饲料中的动物源性成分	杨宝华宗卉	《饲料研究》 CAS	2002	23	在线阅读下载PDF 职称材料
2	桔小实蝇线粒体基因组全序列及其分析	徐浪余道坚张润杰李建光康林陈志粦焦懿	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	17	在线阅读下载PDF 职称材料
3	华南地区三株新城疫地方强毒株的序列测定及其系统发育分析	秦智锋贺东生吴红专娄华杨德威刘福安	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	8	在线阅读下载PDF 职称材料
4	美洲型猪蓝耳病病毒高致病性变异株RT-LAMP检测方法的建立	曾少灵孙洁秦智锋阮周曦林庆燕花群义曹琛福杨俊兴吕建强张彩虹陈兵陈书琨	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2010	12	在线阅读下载PDF 职称材料
5	鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达	付峰刘荭范万红江育林黄倢	《海洋水产研究》 CSCD 北大核心	2007	13	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鸭病毒性肝炎实验室诊断方法的研究	秦智锋李环玲贺东生刘福安	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	10	在线阅读下载PDF 职称材料
7	PRRSV云南A06株ORF5和ORF7基因的克隆与序列分析	曾少灵林庆燕花群义张彩虹阮周曦杨俊兴孙洁秦智锋曹琛福陈兵吕建强	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	鹅源性成分PCR检测方法的建立	汪燕玲宗卉阮周曦张利平	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料