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5-azaC处理对马铃薯块茎储存中龙葵素积累的影响
1
作者 尤倩 熊雨婕 +4 位作者 刘晓 刘梦梦 薛建平 张爱民 薛涛 《甘肃农业大学学报》 北大核心 2025年第3期126-134,共9页
【目的】探究5-Azacytidine(5-azaC)作为甲基化抑制剂在马铃薯块茎储存中,对龙葵素合成的调控作用。【方法】选取新鲜收获后的马铃薯块茎,研究5-azaC处理对光照和避光条件下马铃薯块茎储存中DNA甲基化和α-茄碱的积累情况。【结果】光... 【目的】探究5-Azacytidine(5-azaC)作为甲基化抑制剂在马铃薯块茎储存中,对龙葵素合成的调控作用。【方法】选取新鲜收获后的马铃薯块茎,研究5-azaC处理对光照和避光条件下马铃薯块茎储存中DNA甲基化和α-茄碱的积累情况。【结果】光照储存5、15和25 d时马铃薯块茎中α-茄碱含量分别为12.7、33和37.3 mg/100 g,对应储存时间点避光组中α-茄碱含量分别为光照组的14.2%、22.4%和25.9%;5-azaC处理可诱导马铃薯块茎中DNA去甲基化,且处理光照组在储存5、15和25 d时α-茄碱含量下降,分别为未处理组的51.8%、59.4%和74.8%。上述储存时间避光组中α-茄碱在5-azaC处理下分别降低了25.1%、70.5%和54.9%倍。【结论】α-茄碱含量受光照诱导,5-azaC可通过诱导马铃薯块茎基因组去甲基化,进而抑制α-茄碱的积累。 展开更多
关键词 马铃薯 龙葵素 甲基化抑制剂 DNA甲基化 甲基化敏感扩增多态性
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培养基类型和植物生长物质浓度对王枣子愈伤组织诱导和继代的影响 被引量：3
2
作者 张媛媛 朱智慧 +4 位作者 张苗苗 苏勇 方政宇 孙伟 薛建平 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第8期2851-2856,共6页
目的优化王枣子愈伤组织的诱导和探究疏松愈伤组织的继代条件,为王枣子悬浮细胞培养奠定初步基础。方法以王枣子无菌苗幼叶为外植体,采用单因素试验研究不同培养基类型对愈伤组织诱导的影响;采用L9(32)正交试验设计,研究2,4-D、KT不同... 目的优化王枣子愈伤组织的诱导和探究疏松愈伤组织的继代条件,为王枣子悬浮细胞培养奠定初步基础。方法以王枣子无菌苗幼叶为外植体,采用单因素试验研究不同培养基类型对愈伤组织诱导的影响;采用L9(32)正交试验设计,研究2,4-D、KT不同浓度配比对王枣子疏松愈伤组织的增殖培养的影响。结果愈伤组织的诱导率在MS、1/2MS和B5培养基上呈上升趋势。MS的出愈时间最晚,1/2MS的出愈时间次之;在B5培养基上出愈时间最早,且愈伤组织的质地和生长状态较好。正交试验的结果显示,愈伤组织的在B5培养基上添加2,4-D 2.5 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1增殖倍数最小为19.78倍,添加2,4-D 1.5 mg·L-1+KT 0.2 mg·L-1达到最大增殖倍数27.34倍;王枣子疏松愈伤组织增殖试验中2,4-D(P<0.01)的影响效应比KT(P=0.091)大。结论B5培养基是最佳的王枣子愈伤组织诱导培养基,B5培养基中添加2,4-D 1.5 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1为疏松愈伤组织增殖的最佳配比。 展开更多
关键词 王枣子 愈伤组织 诱导 继代 培养基类型 植物生长物质
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梨木虱化学感受蛋白CchiCSP8与梨树挥发物的结合特性分析 被引量：3
3
作者 姚玮宸 徐继伟 +2 位作者 徐鹿 朱秀云 张亚楠 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期818-830,共13页
【目的】梨木虱Cacopsylla chinensis是我国重要的梨树害虫。本研究通过分析梨木虱化学感受蛋白8(chemosensory protein 8,CchiCSP8)与梨树挥发物的结合特性,综合研究CchiCSP8的嗅觉功能,为今后阐释梨木虱定位梨树的嗅觉机理提供前期基... 【目的】梨木虱Cacopsylla chinensis是我国重要的梨树害虫。本研究通过分析梨木虱化学感受蛋白8(chemosensory protein 8,CchiCSP8)与梨树挥发物的结合特性,综合研究CchiCSP8的嗅觉功能,为今后阐释梨木虱定位梨树的嗅觉机理提供前期基础。【方法】采用PCR方法克隆CchiCSP8的全长开放阅读框序列,并对推导的氨基酸序列与其他半翅目昆虫CSPs进行同源比对和进化分析;构建pET30a(+)-CchiCSP8的原核表达载体,通过大肠杆菌Escherichia coli体外表达、组氨酸标签蛋白镍磁珠纯化技术和荧光竞争性结合实验,共测定了重组蛋白CchiCSP8与41种梨树挥发物的结合能力。随后对CchiCSP8进行同源建模和分子对接分析。【结果】克隆获得了CchiCSP8全长序列,开放阅读框全长426 bp,编码141个氨基酸,N端有一个包含21个氨基酸的信号肽。成熟的CchiCSP8蛋白的预测分子量和等电点分别为15.02 kD和9.77;与其他半翅目昆虫CSPs的序列比对发现,CchiCSP8具有4个保守的半胱氨酸位点,并与柑橘木虱Diaphorina citri化学感受蛋白DcitCSP11的进化关系最近;pET30a(+)-CchiCSP8在IPTG诱导下在大肠杆菌中成功表达,并通过镍磁珠纯化获得纯净的CchiCSP8蛋白;采用荧光竞争性结合实验分析重组蛋白CchiCSP8的结合特性,结果显示CchiCSP8对18种梨树植物挥发物具有不同程度的结合能力(Ki=14~30μmol/L),包括4种烯烃、6种醇类、4种醛类、1种酮、1种酯类和2种芳香类物质,CchiCSP8与配体的结合力表现出了随碳原子数不同而变化的特点;分子对接结果显示CchiCSP8和每个配体之间的结合能相差不大(-4.2~6.0 kJ/mol),这与上述荧光竞争结合实验的结果一致。在CchiCSP8与不同配体结合过程中,存在多个共有氨基酸残基,其中5个非极性残基(A38,A42,L93,L99和V100)以及2个极性残基(Q107和K46)的作用最为突出。【结论】CchiCSP8能够结合18种不同类型的梨树挥发物,推测其在梨木虱识别梨树挥发物的过程起到重要作用,本研究结果可为明晰梨木虱在定位梨树过程中的嗅觉机制提供理论基础,并为开发基于扰乱嗅觉行为的新型梨木虱行为调控技术提供新思路。 展开更多
关键词 梨木虱 梨树 化学感受蛋白 原核表达 植物挥发物 荧光竞争结合
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