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RNA干扰抑制Nogo-A基因表达及对PC12细胞凋亡的影响
被引量：
2
1
作者
蒲建章
熊南翔
+3 位作者
赵洪洋
苏群
姚东晓
冯军
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期164-168,共5页
为研究Nogo-A基因沉默对细胞凋亡的影响,本文构建了靶向Nogo-A的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体并经脂质体转染到培养的PC12细胞。分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染48h后Nogo-A mRNA及蛋白表...
为研究Nogo-A基因沉默对细胞凋亡的影响,本文构建了靶向Nogo-A的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体并经脂质体转染到培养的PC12细胞。分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染48h后Nogo-A mRNA及蛋白表达的变化。在转染后不同时间应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,用原位末端标记(TUNEL)法及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果显示:由shRNA产生的小干扰RNA(siRNA)可有效抑制PC12细胞Nogo-A基因的表达。Nogo-A siRNA处理组细胞的增殖活性增加、凋亡率明显下降。本结果提示,Nogo-A基因可能与细胞凋亡有关。
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关键词
NOGO-A
短发夹样RNA
凋亡
PC12细胞
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职称材料
Nogo-A短发夹样RNA真核表达载体的构建
被引量：
1
2
作者
蒲建章
熊南翔
+1 位作者
赵洪洋
苏群
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期1196-1199,共4页
目的:构建靶向Nogo-A基因的短发夹样RNA(shorthairpinRNA,shRNA)真核表达载体。方法:根据Genebank中提供的Nogo-A基因核苷酸序列,设计并化学合成2条shRNA,退火后克隆到pGenesil-1质粒的U6启动子下游从而构建重组载体,行限制性内切酶酶...
目的:构建靶向Nogo-A基因的短发夹样RNA(shorthairpinRNA,shRNA)真核表达载体。方法:根据Genebank中提供的Nogo-A基因核苷酸序列,设计并化学合成2条shRNA,退火后克隆到pGenesil-1质粒的U6启动子下游从而构建重组载体,行限制性内切酶酶切和基因测序进行鉴定。结果:序列分析结果表明,两个重组质粒的shRNA编码序列均成功插入到预定位置。结论:成功构建靶向Nogo-A的shRNA真核表达载体,为进一步研究Nogo-A蛋白的功能及轴突再生抑制的基因治疗提供了新的方法。
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关键词
NOGO-A
短发夹样RNA
表达载体
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职称材料
题名
RNA干扰抑制Nogo-A基因表达及对PC12细胞凋亡的影响
被引量：
2
1
作者
蒲建章
熊南翔
赵洪洋
苏群
姚东晓
冯军
机构
华中
科
技大学同济医学院附属协和
医院
神经外
科
淄博市淄川医院内分泌科
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期164-168,共5页
基金
国家自然科学基金(No.30471775)
湖北省科技攻关(No.2005AA301C15)资助项目
文摘
为研究Nogo-A基因沉默对细胞凋亡的影响,本文构建了靶向Nogo-A的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体并经脂质体转染到培养的PC12细胞。分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染48h后Nogo-A mRNA及蛋白表达的变化。在转染后不同时间应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,用原位末端标记(TUNEL)法及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果显示:由shRNA产生的小干扰RNA(siRNA)可有效抑制PC12细胞Nogo-A基因的表达。Nogo-A siRNA处理组细胞的增殖活性增加、凋亡率明显下降。本结果提示,Nogo-A基因可能与细胞凋亡有关。
关键词
NOGO-A
短发夹样RNA
凋亡
PC12细胞
Keywords
Nogo-A, shRNA, apoptosis, PC12 cell line
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
Nogo-A短发夹样RNA真核表达载体的构建
被引量：
1
2
作者
蒲建章
熊南翔
赵洪洋
苏群
机构
华中
科
技大学同济医学院附属协和
医院
神经外
科
山东
淄博市淄川医院内分泌科
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期1196-1199,共4页
基金
国家自然科学基金(30471775)
湖北省科技攻关项目(2005AA301C15)资助
文摘
目的:构建靶向Nogo-A基因的短发夹样RNA(shorthairpinRNA,shRNA)真核表达载体。方法:根据Genebank中提供的Nogo-A基因核苷酸序列,设计并化学合成2条shRNA,退火后克隆到pGenesil-1质粒的U6启动子下游从而构建重组载体,行限制性内切酶酶切和基因测序进行鉴定。结果:序列分析结果表明,两个重组质粒的shRNA编码序列均成功插入到预定位置。结论:成功构建靶向Nogo-A的shRNA真核表达载体,为进一步研究Nogo-A蛋白的功能及轴突再生抑制的基因治疗提供了新的方法。
关键词
NOGO-A
短发夹样RNA
表达载体
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RNA干扰抑制Nogo-A基因表达及对PC12细胞凋亡的影响
蒲建章
熊南翔
赵洪洋
苏群
姚东晓
冯军
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Nogo-A短发夹样RNA真核表达载体的构建
蒲建章
熊南翔
赵洪洋
苏群
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
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职称材料
已选择
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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