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鳗弧菌及脂多糖刺激下大菱鲆肝脾凝集素和Toll样受体基因的时序表达分析
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作者 苟冬惠 孙志宾 +6 位作者 马爱军 田蜜 王新安 黄智慧 孙伟恒 朱春月 刘志峰 《海洋与湖沼》 北大核心 2025年第4期989-1001,共13页
凝集素和Toll样受体对激活先天免疫系统以应对入侵的病原体至关重要,为探究革兰氏阴性菌鳗弧菌、灭活鳗弧菌以及LPS刺激大菱鲆PAMP识别受体基因的免疫应答机制,以平均体质量为(19.37±4.31)g、平均体长为(10.71±0.69)cm的大菱... 凝集素和Toll样受体对激活先天免疫系统以应对入侵的病原体至关重要,为探究革兰氏阴性菌鳗弧菌、灭活鳗弧菌以及LPS刺激大菱鲆PAMP识别受体基因的免疫应答机制,以平均体质量为(19.37±4.31)g、平均体长为(10.71±0.69)cm的大菱鲆为实验对象,分别于免疫后0、12、24、48、72和96 h采集肝和脾组织,提取总RNA,采用qPCR检测肝脏和脾脏中LEC、SAP、TLR5M、TLR14基因的表达水平。结果显示:在肝脏中,活菌刺激下LEC、SAP、TLR5M和TLR14基因与对照组相比均呈上调表达,上调表达高峰均在0~24 h,基因表达量最高值是对照组的14~3857倍;灭活菌和LPS刺激下LEC、TLR5M和TLR14基因与对照组相比均呈上调表达,表达高峰分别在24~72 h和48~72 h,最高表达量分别是对照组的52~447倍和18~184倍。在脾脏中,活菌刺激下LEC和TLR14基因与对照组相比均呈上调表达,上调表达高峰均在0~24 h,基因表达量最高值是对照组的5~223倍;灭活菌和LPS刺激下LEC、SAP和TLR14基因与对照组相比均呈上调表达,LEC和SAP表达高峰在0~12 h,TLR14表达高峰在48~72 h,最高表达量分别是对照组的4~28倍和2~68倍,其他基因表现为显著下调或无明显变化。研究结果表明:不同免疫刺激能引起肝脏和脾脏PAMP识别受体基因的快速变化,并且这些基因的表达变化具有组织特异性。免疫后肝脏和脾脏在0~72 h中,可用更为简单的免疫增强剂LPS或灭活菌代替活菌注射,通过LEC、SAP、TLR5M和TLR14 PAMP识别受体基因表达作为评价指标。研究结果可为抗鳗弧菌新品种选育和海水鱼类免疫增强剂筛选提供理论依据。 展开更多
关键词 病原相关分子模式 模式识别受体 凝集素 Toll样受体 革兰氏阴性菌 鳗弧菌
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大菱鲆耐高温和生长性状的遗传参数评估
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作者 曹郡文 黄智慧 +7 位作者 马爱军 王新安 蒋宇航 刘志峰 赵海池 张皓 胡艳 徐荣静 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第5期34-42,共9页
近年夏季高温期长,使得培育耐高温良种成为大菱鲆(Scophthalmus maximus)养殖业的迫切需求。为评估大菱鲆耐高温性状遗传参数,本研究对来自30个家系的900尾大菱鲆进行高温胁迫实验,使用4种模型(LAM、CLAM、CTAMl和CTAMp)拟合了2种耐高... 近年夏季高温期长,使得培育耐高温良种成为大菱鲆(Scophthalmus maximus)养殖业的迫切需求。为评估大菱鲆耐高温性状遗传参数,本研究对来自30个家系的900尾大菱鲆进行高温胁迫实验,使用4种模型(LAM、CLAM、CTAMl和CTAMp)拟合了2种耐高温表型(耐热性上限性状UTT和二元存活性状BTS),并采用约束最大似然法(REML)估算方差组分。经分析,大菱鲆耐高温性状遗传力为0.110~0.208,属中低等遗传力性状。其中,利用线性模型(LAM和CLAM)估算的遗传力分别为0.110±0.074和0.155±0.082,利用阈值模型(CTAMl和CTAMp)估算的遗传力分别为0.214±0.072和0.208±0.074,表明可以通过遗传选育提高大菱鲆耐高温能力。2种耐高温表型性状与体重的遗传相关分别为–0.07±0.40和–0.13±0.33,表型相关分别为–0.04±0.05和–0.08±0.11,2种相关均为极低相关。对不同模型估算的育种值(EBVs)进行相关性分析的结果显示,不同模型拟合同种耐温表型时,EBVs之间的相关系数>0.97,属于高强度正相关,表明使用同种表型定义时,线性或阈值模型对EBVs排名影响较小。不同模型估算EBVs与不同表型进行相关性分析的结果显示,阈值模型(CTAMl和CTAMp)估算的EBV与表型BTS之间的相关系数高于线性模型(LAM和CLAM),说明表型BTS比表型UTT更适合作为耐温性状。此外,在线性模型中使用UTT和BTS估算的EBVs之间的相关系数<0.50,说明采用2种表型定义下估算的大菱鲆耐高温性状的EBVs排名不一致,表明大菱鲆耐高温性状使用表型BTS和截面阈值动物模型(CLAMl或CTAMp)估算大菱鲆耐高温遗传参数更有优势。本研究结果是对大菱鲆耐温性遗传参数研究的补充,为制订冷水鱼类耐高温性状育种规划提供了理论依据。 展开更多
关键词 大菱鲆 耐高温性状 遗传力 遗传相关
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大黄鱼(Larimichthys crocea)自噬相关基因ATG1的序列特征及低温胁迫下的组织表达差异
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作者 王琳 李伟业 +4 位作者 殷小龙 徐羡 王新安 马爱军 赵亭亭 《海洋与湖沼》 北大核心 2025年第4期976-988,共13页
为探究自噬相关基因(autophagy-related gene,ATG)ATG1在大黄鱼(Larimichthys crocea)低温胁迫下不同组织的响应特征,对获得的大黄鱼ATG1基因序列进行生物特征分析,并采用qRT-PCR方法测定大黄鱼[(55.97±11.86)g]在不同温度梯度变化... 为探究自噬相关基因(autophagy-related gene,ATG)ATG1在大黄鱼(Larimichthys crocea)低温胁迫下不同组织的响应特征,对获得的大黄鱼ATG1基因序列进行生物特征分析,并采用qRT-PCR方法测定大黄鱼[(55.97±11.86)g]在不同温度梯度变化(18、16、14、12、10、8℃)处理下的脑(B)、鳃(G)、头肾(HK)、肾脏(K)、心脏(H)、脾脏(SP)、肝脏(L)、肠(I)、肌肉(M)、皮肤(SK)10个组织的表达水平。结果显示:(1)大黄鱼ATG1基因的CDS序列全长2715 bp,编码904个氨基酸,该基因编码的蛋白相对分子量为99.43 kDa,预测等电点(pI)为8.47;大黄鱼ATG1蛋白亚细胞定位显示可能是细胞核蛋白;信号肽预测显示,无信号肽和跨膜结构;潜在互作蛋白有BECN1、ATG13、repto、mTOR、mlst18、ATG101、st18、ATG14、ATG2a、ATG2B 10种;蛋白序列同源性比对显示大黄鱼ATG1蛋白在进化中具有高度的保守性;系统进化树分析显示,大黄鱼ATG1与条纹狼鲈ATG1亲缘关系最近。(2)ATG1基因在大黄鱼遭受低温胁迫时组织响应呈现差异化,并且随着低温胁迫的增加组织响应呈现时序性。低温胁迫时,随着温度下降,机体代谢成本提高,大黄鱼通过启动自噬过程可能以肝脏-肌肉-肝脏-心脏的顺序调控能量代谢,为细胞提供燃料,维持能量稳态;以脾脏-头肾(肠)-头肾(脾脏)-皮肤的顺序调控免疫系统,降低氧化应激和提高免疫防御能力,这两条途径相互协作共同发挥作用抵抗低温损伤。研究将为探究自噬机制在大黄鱼逆境胁迫中的积极作用提供理论参考,并为大黄鱼耐低温优良性状选育提供基础数据。 展开更多
关键词 大黄鱼 低温胁迫 自噬相关基因ATG1 序列特征 组织表达
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低盐胁迫下LXRα激动剂添加和RNA干扰对大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼鱼脂质代谢的影响 被引量:1
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作者 刘志峰 徐菲 +6 位作者 赵海池 施越雷 杨明超 黄智慧 孙志宾 徐荣静 马爱军 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1324-1334,共11页
大菱鲆是我国重要的养殖经济鱼类,随着养殖水域逐渐向滩涂和内陆拓展,亟待研究其低盐适应性机制,进而为培育耐低盐良种提供参考。通过腹腔注射干扰剂dsRNA以及激动剂T091317,以进一步检测下游脂质代谢相关基因的表达以及血清脂代谢产物... 大菱鲆是我国重要的养殖经济鱼类,随着养殖水域逐渐向滩涂和内陆拓展,亟待研究其低盐适应性机制,进而为培育耐低盐良种提供参考。通过腹腔注射干扰剂dsRNA以及激动剂T091317,以进一步检测下游脂质代谢相关基因的表达以及血清脂代谢产物的变化。研究设置两个盐度梯度(5和30),每个盐度设置4个处理组(干扰组、激动组、生理盐水组和空白对照组),实验周期72 h。结果显示:在dsRNA注射后,肝脏中LXRα基因的相对表达量呈现出显著的抑制作用,尤其是在盐度30下;盐度5的肝脏组以及不同盐度的肠道组中,干扰效果不明显。激动剂注射后LXRα基因的相对表达量在不同盐度组中均呈现了激动效应,但维持时间较短。低盐可以抑制SREBP-1、CYP7A1和ApoA-IV基因的表达,当LXRα基因受到抑制或激动后,三者尽管表达趋势不同,但整体上均呈现出相应的干扰和激动效应。血清生化结果显示,低盐显著抑制了TG和HDL的含量,对T-CHO以及LDL的含量无显著影响。30盐度下,当LXRα基因受到抑制或激动后,TG的含量呈现出相应的干扰和激动效应。以上表明在腹腔注射干扰剂dsRNA以及激动剂后,都能够相应的导致LXRα基因表达量降低或者升高。LXRα基因受到抑制后,可以引起下游转录因子SREBP-1基因表达的降低,进而抑制了TG的合成,因此血清中甘油三酯的含量可以进一步作为大菱鲆耐低盐选育的表型。 展开更多
关键词 大菱鲆(Scophthalmus maximus) 脂代谢 LXRα基因 RNA干扰
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