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海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证
被引量：
1
1
作者
黄超
张丽丽
+1 位作者
邓柳红
张春发
《热带生物学报》
2016年第1期82-88,共7页
提取春季海南五指山美洲商陆叶片总RNA,利用RT-PCR技术获得c DNA,再根据Genbank上公布的PAP-Ⅰ基因序列设计引物扩增PAP-Ⅰ基因,并连接到p^(ET)-30a载体上进行表达,表达的产物以不溶的包涵体形式存在,经过变性、镍柱亲和层析纯化,纯化...
提取春季海南五指山美洲商陆叶片总RNA,利用RT-PCR技术获得c DNA,再根据Genbank上公布的PAP-Ⅰ基因序列设计引物扩增PAP-Ⅰ基因,并连接到p^(ET)-30a载体上进行表达,表达的产物以不溶的包涵体形式存在,经过变性、镍柱亲和层析纯化,纯化后的重组蛋白经过Western Blot验证表明该基因得到了正确表达,利用柱上循环复性后的重组PAP-Ⅰ蛋白经麦胚提取物转录/翻译偶联系统验证具有抑制蛋白质合成的活性。
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关键词
美洲商陆
抗病毒蛋白
载体构建
原核表达
海南五指山
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职称材料
题名
海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证
被引量：
1
1
作者
黄超
张丽丽
邓柳红
张春发
机构
海南
大学农学院
中国热带农业
科学
院热带生物
技术
研究
所
海南省蛋白质工程药物重点实验室/海口市生命科学药物工程技术研究开发中心
出处
《热带生物学报》
2016年第1期82-88,共7页
基金
海南省重大科技项目(ZDZX2013008-04-03)
海口市重点科技计划项目(2012-060)
国家自然科学基金项目(31101200)
文摘
提取春季海南五指山美洲商陆叶片总RNA,利用RT-PCR技术获得c DNA,再根据Genbank上公布的PAP-Ⅰ基因序列设计引物扩增PAP-Ⅰ基因,并连接到p^(ET)-30a载体上进行表达,表达的产物以不溶的包涵体形式存在,经过变性、镍柱亲和层析纯化,纯化后的重组蛋白经过Western Blot验证表明该基因得到了正确表达,利用柱上循环复性后的重组PAP-Ⅰ蛋白经麦胚提取物转录/翻译偶联系统验证具有抑制蛋白质合成的活性。
关键词
美洲商陆
抗病毒蛋白
载体构建
原核表达
海南五指山
Keywords
pokeweed
antiviral protein
vector construction
prokaryotic expression
Wuzhi Mountain
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
海南五指山美洲商陆抗病毒蛋白PAP-Ⅰ基因的原核表达及活性验证
黄超
张丽丽
邓柳红
张春发
《热带生物学报》
2016
1
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