RXam1(Resistance to Xam 1,RXam1)是一种编码受体样激酶RLK的基因,其超表达可增强木薯对木薯细菌性枯萎病的抗性。为了解RXam1在木薯抗病中的调控网络,通过生物信息分析发现,MeRXam1是稳定的疏水性蛋白,含有2个跨膜结构域和1个信号肽,...RXam1(Resistance to Xam 1,RXam1)是一种编码受体样激酶RLK的基因,其超表达可增强木薯对木薯细菌性枯萎病的抗性。为了解RXam1在木薯抗病中的调控网络,通过生物信息分析发现,MeRXam1是稳定的疏水性蛋白,含有2个跨膜结构域和1个信号肽,磷酸化位点得分高于0.8的有24个。MeRXam1在木薯的叶、叶柄、茎、易碎胚性愈伤组织、根尖分生组织、须根、侧芽以及组织化胚性结构等8个组织中均有表达,进化树分析发现,MeRXam1与橡胶树的蛋白同源性最高。其次,将MeRXam1基因克隆至酵母相关表达载体中,并与木薯pGBKT7文库共转化酵母AH109细胞,通过酵母双杂交技术筛选MeRXam1的互作蛋白,共获得10个阳性克隆并送测序,进一步明确互作的蛋白。其中,互作蛋白MeCRF5编码一个AP2/ERF转录因子超家族中DREB亚家族的RAP2.4蛋白,并通过酵母双杂交技术、双分子荧光互补实验验证了MeRXam1与MeCRF5的相互作用。展开更多
文摘为了解析木薯(Manihot esculenta)中生长素响应因子(Auxin response factor,ARF)的功能和作用机理,本研究首先克隆了一个MeARF基因,然后通过生物信息学分析,构建了进化树明确了其亲缘关系。蛋白结构分析发现,该蛋白含有保守的B3结构域(B3 DNA binding domain,B3)和Phox and Bem1p(PB1)结构域。通过分析Me ARF在不同组织的表达量,发现MeARF在木薯的侧芽表达量较高。本研究还构建了pGADT7-MeARF的基因表达载体,然后通过酵母双杂交实验筛选木薯的cDNA文库,最终筛选到了与植物生长发育和免疫相关的候选蛋白。结果表明,MeARF可能参与了木薯的生长发育和免疫。
文摘RXam1(Resistance to Xam 1,RXam1)是一种编码受体样激酶RLK的基因,其超表达可增强木薯对木薯细菌性枯萎病的抗性。为了解RXam1在木薯抗病中的调控网络,通过生物信息分析发现,MeRXam1是稳定的疏水性蛋白,含有2个跨膜结构域和1个信号肽,磷酸化位点得分高于0.8的有24个。MeRXam1在木薯的叶、叶柄、茎、易碎胚性愈伤组织、根尖分生组织、须根、侧芽以及组织化胚性结构等8个组织中均有表达,进化树分析发现,MeRXam1与橡胶树的蛋白同源性最高。其次,将MeRXam1基因克隆至酵母相关表达载体中,并与木薯pGBKT7文库共转化酵母AH109细胞,通过酵母双杂交技术筛选MeRXam1的互作蛋白,共获得10个阳性克隆并送测序,进一步明确互作的蛋白。其中,互作蛋白MeCRF5编码一个AP2/ERF转录因子超家族中DREB亚家族的RAP2.4蛋白,并通过酵母双杂交技术、双分子荧光互补实验验证了MeRXam1与MeCRF5的相互作用。