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胃癌组织中高表达的miR-504通过TP53INP1调控胃癌细胞BGC-823的生物学行为
被引量:
4
1
作者
刘真义
翁国武
+3 位作者
关李稳
周真真
王力雅
冯红军
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期824-832,共9页
目的:探究微小RNA-504(miRNA-504)在胃癌(GC)组织中的表达水平及其对GC细胞生物学行为的调控机制。方法:收集2020年6月至2020年12月期间三亚中心医院外科收治的48例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织标本,qPCR检测组织中miR-504、肿瘤蛋白5...
目的:探究微小RNA-504(miRNA-504)在胃癌(GC)组织中的表达水平及其对GC细胞生物学行为的调控机制。方法:收集2020年6月至2020年12月期间三亚中心医院外科收治的48例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织标本,qPCR检测组织中miR-504、肿瘤蛋白53诱导型核蛋白1(tumor protein 53-induced nuclear protein 1,TP53INP1)mRNA的水平,WB法检测TP53INP1水平。体外培养人胃癌细胞BGC-823,分为对照组(正常培养的BGC-823细胞)、miR-504 mimic组、mimic-NC组、miR-504 inhibitor组、inhibitor-NC组、miR-504 inhibitor+si-NC组、miR-504 inhibitor+si-TP53INP1组,qPCR检测细胞中miR-504和TP53INP1 mRNA的表达,MTT法、流式细胞术、划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力,WB法检测各组细胞中增殖、迁移和侵袭相关蛋白(Cyclin D1、E-cadherin、MMP-2、MMP-9)以及TP53INP1的表达。双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-504与TP53INP1 mRNA的靶向关系。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-504的表达显著升高(P<0.05),而TP53INP1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),miR-504和TP53INP mRNA两者的表达呈负相关(P<0.01)。与对照组相比,miR-504 mimic组BGC-823细胞中miR-504的表达显著升高(P<0.05)、TP53INP1 mRNA和蛋白的表达显著降低(均P<0.05),且细胞增殖率、划痕愈合率、侵袭入Transwell小室下层的细胞数量,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达均显著增加,细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。转染miR-504 inhibitor能显著下调BGC-823中miR-504的表达、上调TP53INP1 mRNA和蛋白的表达,抑制细胞的增殖、迁移与侵袭能力而促进细胞凋亡(均P<0.05);而下调TP53INP1的表达可明显减弱miR-504下调对BGC-823细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用(P<0.01)。miR-504高表达能明显抑制野生型TP53INP1质粒的荧光素酶活性(P<0.05)。结论:miR-504在胃癌组织中呈高表达,下调miR-504可抑制胃癌BGC-823细胞的恶性生物学行为而促进其凋亡,其作用机制可能与靶向调控TP53INP1的表达有关。
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关键词
胃癌
BGC-823细胞
miRNA-504
增殖
凋亡
迁移
侵袭
肿瘤蛋白53诱导型核蛋白1
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职称材料
题名
胃癌组织中高表达的miR-504通过TP53INP1调控胃癌细胞BGC-823的生物学行为
被引量:
4
1
作者
刘真义
翁国武
关李稳
周真真
王力雅
冯红军
机构
海南省第三人民医院暨三亚中心医院消化内科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第8期824-832,共9页
基金
海南省卫生计生行业科研项目资助(No.16A200142)
三亚市医疗卫生科技创新项目资助(No.2017YW08)。
文摘
目的:探究微小RNA-504(miRNA-504)在胃癌(GC)组织中的表达水平及其对GC细胞生物学行为的调控机制。方法:收集2020年6月至2020年12月期间三亚中心医院外科收治的48例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织标本,qPCR检测组织中miR-504、肿瘤蛋白53诱导型核蛋白1(tumor protein 53-induced nuclear protein 1,TP53INP1)mRNA的水平,WB法检测TP53INP1水平。体外培养人胃癌细胞BGC-823,分为对照组(正常培养的BGC-823细胞)、miR-504 mimic组、mimic-NC组、miR-504 inhibitor组、inhibitor-NC组、miR-504 inhibitor+si-NC组、miR-504 inhibitor+si-TP53INP1组,qPCR检测细胞中miR-504和TP53INP1 mRNA的表达,MTT法、流式细胞术、划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力,WB法检测各组细胞中增殖、迁移和侵袭相关蛋白(Cyclin D1、E-cadherin、MMP-2、MMP-9)以及TP53INP1的表达。双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-504与TP53INP1 mRNA的靶向关系。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-504的表达显著升高(P<0.05),而TP53INP1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),miR-504和TP53INP mRNA两者的表达呈负相关(P<0.01)。与对照组相比,miR-504 mimic组BGC-823细胞中miR-504的表达显著升高(P<0.05)、TP53INP1 mRNA和蛋白的表达显著降低(均P<0.05),且细胞增殖率、划痕愈合率、侵袭入Transwell小室下层的细胞数量,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达均显著增加,细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。转染miR-504 inhibitor能显著下调BGC-823中miR-504的表达、上调TP53INP1 mRNA和蛋白的表达,抑制细胞的增殖、迁移与侵袭能力而促进细胞凋亡(均P<0.05);而下调TP53INP1的表达可明显减弱miR-504下调对BGC-823细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用(P<0.01)。miR-504高表达能明显抑制野生型TP53INP1质粒的荧光素酶活性(P<0.05)。结论:miR-504在胃癌组织中呈高表达,下调miR-504可抑制胃癌BGC-823细胞的恶性生物学行为而促进其凋亡,其作用机制可能与靶向调控TP53INP1的表达有关。
关键词
胃癌
BGC-823细胞
miRNA-504
增殖
凋亡
迁移
侵袭
肿瘤蛋白53诱导型核蛋白1
Keywords
gastric cancer(GC)
BGC-823 cell
microRNA-504
proliferation
apoptosis
migration
invasion
tumor protein 53-induced nuclear protein 1(TP53INP1)
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
R730.2 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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被引量
操作
1
胃癌组织中高表达的miR-504通过TP53INP1调控胃癌细胞BGC-823的生物学行为
刘真义
翁国武
关李稳
周真真
王力雅
冯红军
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
4
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