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杧果炭疽病菌漆酶基因lac1的克隆与序列特征分析 被引量:8
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作者 韦运谢 刘晓妹 +6 位作者 张贺 张欣 漆艳香 谢艺贤 陆英 曹申文 蒲金基 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期202-206,共5页
【目的】为了探明胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)漆酶基因(lac1)的序列特征,进一步研究胶孢炭疽菌的分子致病机制,【方法】以杧果炭疽病菌为材料,采用同源克隆、SEFA-PCR和RT-PCR技术对lac1基因进行扩增、并对所获得的lac... 【目的】为了探明胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)漆酶基因(lac1)的序列特征,进一步研究胶孢炭疽菌的分子致病机制,【方法】以杧果炭疽病菌为材料,采用同源克隆、SEFA-PCR和RT-PCR技术对lac1基因进行扩增、并对所获得的lacl基因进行了序列特征和预测蛋白保守结构域的分析。【结果】结果表明,该基因DNA和cD-NA全长分别为2 996 bp、1 773 bp,编码区含3个内含子(大小分别为47 bp、50 bp和59 bp),推测编码590个氨基酸,其分子质量约为1174.50 kDa,等电点PI为5.36。系统进化树结果显示该基因编码的氨基酸序列与多种真菌的含铜氧化物酶聚为一类,其中与C.lagenarium laccase(BAB32575.1)的同源性最高,达73%。【结论】lac1基因具备真菌漆酶基因家族的序列特征,推测lac1基因可能参与调控C.gloeosporioides菌丝生长、色素生成和致病性等。 展开更多
关键词 杧果 胶孢炭疽菌 漆酶 克隆 序列分析
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杧果露水斑病病原菌生物学特性测定 被引量:9
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作者 杨永利 蒲金基 +3 位作者 张贺 韦运谢 李增平 刘晓妹 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期285-290,共6页
【目的】明确杧果新病害露水斑病病原菌(Cladosporium cladosporioides)的生物学特性,以便为该病害的发生规律研究提供理论依据。【方法】测定了不同条件对病原菌菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响。【结果】菌丝在杧果葡萄糖琼胶培养基... 【目的】明确杧果新病害露水斑病病原菌(Cladosporium cladosporioides)的生物学特性,以便为该病害的发生规律研究提供理论依据。【方法】测定了不同条件对病原菌菌丝生长、产孢量和孢子萌发的影响。【结果】菌丝在杧果葡萄糖琼胶培养基和PDA培养基上生长最佳,最适生长温度20℃,最适p H值7~8,光照对菌丝生长影响不明显,菌丝对有机碳源乳糖和有机氮源氨基乙酸利用最好,菌丝致死温度为50℃、10 min;产孢量以25℃、p H 6、光暗交替、麦芽糖为碳源、L-胱氨酸为氮源时最大;分生孢子萌发率以25℃、p H7、液态水、有机碳源阿拉伯糖、有机氮源L-天冬氨酸为最适条件,分生孢子致死温度50℃、10 min。【结论】杧果露水斑病菌喜好20~25℃、弱酸至弱碱、高湿、富含有机营养的环境。 展开更多
关键词 杧果 杧果露水斑病 枝状枝孢霉 生物学特性
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杧果查尔酮合成酶基因(CHS1)的克隆与表达分析 被引量:10
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作者 梅志栋 张贺 +2 位作者 刘晓妹 黄建峰 蒲金基 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1077-1084,I0003,共9页
【目的】克隆鉴定杧果CHS基因,分析其功能,明确杧果不同组织器官中CHS基因表达情况。【方法】以海南种植的6个杧果种的叶片总DNA和c DNA为模板,进行同源性PCR扩增,然后克隆到p MD18-T载体上,进行测序;通过生物学软件预测分析CHS基因编... 【目的】克隆鉴定杧果CHS基因,分析其功能,明确杧果不同组织器官中CHS基因表达情况。【方法】以海南种植的6个杧果种的叶片总DNA和c DNA为模板,进行同源性PCR扩增,然后克隆到p MD18-T载体上,进行测序;通过生物学软件预测分析CHS基因编码的蛋白质;运用半定量PCR分析CHS基因表达情况。【结果】测序得到6个杧果种CHS基因c DNA全长为1 173 bp,CHS基因含有2个外显子和1个内含子。基于c DNA序列的NJ系统发育树显示,其与普通杧果(Mangifera indica)CHS1基因同源性最高。CHS1基因半定量表达显示杧果不同器官均表达CHS1基因,但在叶片和花中的表达量较高。【结论】克隆了杧果查尔酮合成酶1(CHS1)基因,半定量分析了杧果不同器官中CHS1基因的表达差异,为下一步研究提高CHS1基因的表达量奠定了基础。 展开更多
关键词 杧果 查尔酮合成酶 NJ系统发育树 表达分析
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