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鉴定调控橡胶树胶乳特异表达HbCPT7的MYB和MYC转录因子
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作者 周苗苗 罗小梅 +5 位作者 杨仪清 刘开业 张盛敏 戚继艳 唐朝荣 曹杰 《热带作物学报》 北大核心 2025年第6期1288-1296,共9页
天然橡胶是重要的工业原料,广泛应用于生产生活中。在橡胶树(Hevea brasiliensis)的产胶细胞乳管中,顺式异戊烯基转移酶(cis-prenyltransferase,CPT)是催化天然橡胶合成的关键组分。已报道的HbCPT7和HbCPT8在胶乳中特异表达,并且在酵母... 天然橡胶是重要的工业原料,广泛应用于生产生活中。在橡胶树(Hevea brasiliensis)的产胶细胞乳管中,顺式异戊烯基转移酶(cis-prenyltransferase,CPT)是催化天然橡胶合成的关键组分。已报道的HbCPT7和HbCPT8在胶乳中特异表达,并且在酵母和烟草中的HblMYB19和HblMYB44能够显著促进HbCPT8的表达。然而,调控HbCPT7胶乳特异表达的转录因子尚不清楚。本研究发现HbCPT7的启动子区具有多个MYB和MYC转录因子结合的顺式作用元件,通过生物信息学分析,在橡胶树全基因组水平上鉴定到226个HbMYBs和19个HbMYCs转录因子,其中HbMYB1、HbMYB2、HbMYC1、HbMYC2、HbMYC3、HbMYC4和HbMYC5在胶乳中高表达。本研究成功克隆了HbMYB1、HbMYB2、HbMYC1、HbMYC4和HbMYC5,并通过酵母单杂交实验证实HbMYC5能够结合HbCPT7起始密码子上游1~1000bp和1501~1971 bp的启动子区域。本研究为解析HbCPT7调控天然橡胶合成的分子机制提供新的线索。 展开更多
关键词 橡胶树 HbCPT7 HbMYC HbMYB
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橡胶草TkGASA1基因克隆、表达及亚细胞定位分析
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作者 李菱 赵慧敏 +2 位作者 叶德 唐朝荣 刘慧 《江西农业大学学报》 北大核心 2025年第4期890-899,共10页
【目的】橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin)是最有发展潜能的产胶替代植物,但还需要了解其生长和生殖发育调控机制以进行遗传改良。富含半胱氨酸的小肽基因Gibberellic Acid-stimulated arabidopsis(GASA)广泛参与调控植物多种生长和... 【目的】橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin)是最有发展潜能的产胶替代植物,但还需要了解其生长和生殖发育调控机制以进行遗传改良。富含半胱氨酸的小肽基因Gibberellic Acid-stimulated arabidopsis(GASA)广泛参与调控植物多种生长和生殖发育过程,克隆橡胶草GASA基因并分析其表达模式和亚细胞定位可为进一步解析GASA基因在橡胶草生长与生殖发育中的功能提供理论参考。【方法】以橡胶草种质资源系TK20为研究材料,利用转录组数据筛选到1个花中高表达的GASA基因,命名为TkGASA1。克隆得到TkGASA1并对其进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测TkGASA1在不同组织及不同花器官中的表达模式,再利用烟草瞬时转染检测TkGASA1的亚细胞定位。【结果】成功克隆出TkGASA1基因的编码序列(coding sequence,CDS),其全长为309 bp,编码的TkGASA1蛋白N端有1个信号肽,中间为高度可变的亲水区,C端是富含12个半胱氨酸残基的GASA结构域。TkGASA1为亲水性蛋白,二级结构由无规则卷曲(Random coil,c)和α-螺旋(Alpha helix,h)组成,而三级结构与青蒿(Artemisia annua)中的AaGAST1蛋白相似度较高。TkGASA1在花中检测到高表达,花梗和叶片中检测到低表达,根和胶乳中几乎检测不到表达,在不同花器官中,TkGASA1在花柱、柱头、冠毛和喙中均检测到较高的表达。蛋白亚细胞定位结果显示TkGASA1-GFP融合蛋白绿色荧光信号位于细胞质和细胞核中。【结论】橡胶草TkGASA1基因编码1个含有102个氨基酸的蛋白,该蛋白具有典型的GASA结构特征,定位在细胞质和细胞核中,TkGASA1主要在橡胶草花中高表达,且在花柱、柱头、冠毛和喙中也有较高的表达,本研究可为进一步分析TkGASA1基因功能提供理论依据。 展开更多
关键词 橡胶草 TkGASA1 生物信息学 表达分析 亚细胞定位
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