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激素诱导花鳗鲡精巢发育成熟期间性激素水平及相关细胞的超显微结构
被引量：
2
1
作者
齐鑫
黄海
+5 位作者
周雯伊
尹绍武
张勇
刘晓春
陈国华
林浩然
《热带海洋学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期130-136,共7页
通过注射人类绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导雄性花鳗鲡性腺发育成熟,每7d注射一次(剂量为500U.(体重)kg-1),共注射6次。检测此期间血清中促性腺激素(GtH)和性类固醇激素(T、11-KT、E2)的水平,以及相关细胞超显微结构的变化。结果表明,对照...
通过注射人类绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导雄性花鳗鲡性腺发育成熟,每7d注射一次(剂量为500U.(体重)kg-1),共注射6次。检测此期间血清中促性腺激素(GtH)和性类固醇激素(T、11-KT、E2)的水平,以及相关细胞超显微结构的变化。结果表明,对照组雄性花鳗鲡性腺发育处于Ⅰ―Ⅱ期,GS(IGonadosome Index)为0.17±0.06%,血清中GtH、T、11-KT水平较低,并且T浓度低于0.1ng(试剂盒测定范围为0.1―20ng.mL-1);注射第3次后,实验组鱼性腺发育处于Ⅲ期,GSI为7.0±0.03%,血清中GtH、T、11-KT的水平均明显上升;排精后的实验组鱼GSI为9.57±2.1%,GtH、T、11-KT的水平比注射第3次的实验组鱼有所下降,但仍然高于对照组;在整个催熟过程中,血清中E2水平持续降低,从对照组的2.36ng.mL-1下降到排精后的0.83ng.mL-1。超显微结构的观察证明,与对照组相比排精后的实验组鱼脑垂体中GtH细胞的小颗粒减少,内质网池扩大,出现分泌并释放促性腺激素后留下的空泡。对照组鱼肝细胞富含糖原,几乎没有脂肪泡的存在,细胞核位于细胞中间,排精后的实验组鱼肝细胞脂肪泡增多变大,脂肪泡的形成导致细胞核偏位。
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关键词
花鳗鲡Anguilla
marmorata
人工繁殖
性类固醇激素
促性腺激素
精子
GtH细胞
肝细胞
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职称材料
花鳗鲡重组促黄体生成素在毕赤酵母中的表达
被引量：
1
2
作者
毛黎敏
张勇
+5 位作者
李阳源
黄海
李波
李文笙
陈国华
林浩然
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期86-90,96,共6页
采用聚合酶链反应从花鳗鲡垂体cDNA中分别扩增出GTHα、LHβ基因,再利用搭桥技术,中间以lin-ker将两个基因连接成单个基因LHβα。然后利用双酶切、连接,将LHβα基因连接到载体pPICZαA中,构建出促黄体生成素的酵母共表达载体pPICZαA...
采用聚合酶链反应从花鳗鲡垂体cDNA中分别扩增出GTHα、LHβ基因,再利用搭桥技术,中间以lin-ker将两个基因连接成单个基因LHβα。然后利用双酶切、连接,将LHβα基因连接到载体pPICZαA中,构建出促黄体生成素的酵母共表达载体pPICZαA-LHβα。再利用电转化法将其转入到酵母野生型菌株X-33中,在含不同浓度的zeocinYPDS平板上筛选高拷贝转化子,阳性克隆经φ=0.7%甲醇诱导表达,表达产物采用SDS-PAGE和western blot进行分析,得到所表达的产物相对分子质量约为45 000。
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关键词
花鳗鲡
促黄体生成激素
LINKER
共表达载体pPICZαA-LHβα
毕赤酵母
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职称材料
题名
激素诱导花鳗鲡精巢发育成熟期间性激素水平及相关细胞的超显微结构
被引量：
2
1
作者
齐鑫
黄海
周雯伊
尹绍武
张勇
刘晓春
陈国华
林浩然
机构
海南大学海洋学院暨热带生物资源教育部重点实验室
中山
大学
水生经济动物研究所
暨
广东省水生经济动物良种繁育
重点
实验室
出处
《热带海洋学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期130-136,共7页
基金
国家自然基金面上项目(30770283)
"十一五"国家科技支撑计划重点项目(2007BAD29B03)
+1 种基金
海南省教育厅高等学校科学研究资助项目(Hjkj2008-22)
广东省科技兴海(渔)项目(B200701A06)
文摘
通过注射人类绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导雄性花鳗鲡性腺发育成熟,每7d注射一次(剂量为500U.(体重)kg-1),共注射6次。检测此期间血清中促性腺激素(GtH)和性类固醇激素(T、11-KT、E2)的水平,以及相关细胞超显微结构的变化。结果表明,对照组雄性花鳗鲡性腺发育处于Ⅰ―Ⅱ期,GS(IGonadosome Index)为0.17±0.06%,血清中GtH、T、11-KT水平较低,并且T浓度低于0.1ng(试剂盒测定范围为0.1―20ng.mL-1);注射第3次后,实验组鱼性腺发育处于Ⅲ期,GSI为7.0±0.03%,血清中GtH、T、11-KT的水平均明显上升;排精后的实验组鱼GSI为9.57±2.1%,GtH、T、11-KT的水平比注射第3次的实验组鱼有所下降,但仍然高于对照组;在整个催熟过程中,血清中E2水平持续降低,从对照组的2.36ng.mL-1下降到排精后的0.83ng.mL-1。超显微结构的观察证明,与对照组相比排精后的实验组鱼脑垂体中GtH细胞的小颗粒减少,内质网池扩大,出现分泌并释放促性腺激素后留下的空泡。对照组鱼肝细胞富含糖原,几乎没有脂肪泡的存在,细胞核位于细胞中间,排精后的实验组鱼肝细胞脂肪泡增多变大,脂肪泡的形成导致细胞核偏位。
关键词
花鳗鲡Anguilla
marmorata
人工繁殖
性类固醇激素
促性腺激素
精子
GtH细胞
肝细胞
Keywords
Anguilla marmorata
artifical reproduction
sex steroid hormone
gonadotropin
sperm
GtH cell
hepatic cells
分类号
Q492.4 [生物学—生理学]
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职称材料
题名
花鳗鲡重组促黄体生成素在毕赤酵母中的表达
被引量：
1
2
作者
毛黎敏
张勇
李阳源
黄海
李波
李文笙
陈国华
林浩然
机构
海南大学海洋学院暨热带生物资源教育部重点实验室
中山
大学
有害
生物
控制与
资源
利用国家
重点
实验室
//中山
大学
水生经济动物研究所
暨
广东省水生经济动物良种繁育
重点
实验室
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期86-90,96,共6页
基金
国家自然基金面上资助项目(30770283)
广东省教育部产学研结合资助项目(2010B090400551)
+1 种基金
江苏省科技成果转化专项资金资助项目(BA2009083)
海南省教育厅高等学校科学研究资助项目(Hjkj20082 22)
文摘
采用聚合酶链反应从花鳗鲡垂体cDNA中分别扩增出GTHα、LHβ基因,再利用搭桥技术,中间以lin-ker将两个基因连接成单个基因LHβα。然后利用双酶切、连接,将LHβα基因连接到载体pPICZαA中,构建出促黄体生成素的酵母共表达载体pPICZαA-LHβα。再利用电转化法将其转入到酵母野生型菌株X-33中,在含不同浓度的zeocinYPDS平板上筛选高拷贝转化子,阳性克隆经φ=0.7%甲醇诱导表达,表达产物采用SDS-PAGE和western blot进行分析,得到所表达的产物相对分子质量约为45 000。
关键词
花鳗鲡
促黄体生成激素
LINKER
共表达载体pPICZαA-LHβα
毕赤酵母
Keywords
Anguilla marmorata
luteinizing hormone
linker
co-expression plasmid pPICZaA-LHβa
Pichia pastoris
分类号
Q575.12 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
激素诱导花鳗鲡精巢发育成熟期间性激素水平及相关细胞的超显微结构
齐鑫
黄海
周雯伊
尹绍武
张勇
刘晓春
陈国华
林浩然
《热带海洋学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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职称材料
2
花鳗鲡重组促黄体生成素在毕赤酵母中的表达
毛黎敏
张勇
李阳源
黄海
李波
李文笙
陈国华
林浩然
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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