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多杀性巴氏杆菌OmpA基因的原核表达及生物信息学分析
被引量：
7
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作者
郑义盈
李宝宝
+10 位作者
黄海峰
张振兴
章泸尹
张萌萌
安琪
王成强
陈杰
李彬
陈珍
杜丽
王凤阳
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019年第7期1926-1934,共9页
本试验旨在探究羊源多杀性巴氏杆菌OmpA基因的原核表达及其生物信息学特征。以羊源多杀性巴氏杆菌HN-01株基因组为模板,设计特异性引物扩增OmpA基因;构建pET-28a(+)-OmpA重组质粒后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌...
本试验旨在探究羊源多杀性巴氏杆菌OmpA基因的原核表达及其生物信息学特征。以羊源多杀性巴氏杆菌HN-01株基因组为模板,设计特异性引物扩增OmpA基因;构建pET-28a(+)-OmpA重组质粒后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌经IPTG诱导表达;通过SDS-PAGE及Western blotting分析表达蛋白的特征,并运用生物信息学工具对OmpA基因序列进行分析。结果显示,羊源多杀性巴氏杆菌OmpA基因大小约为1044bp,该基因序列与HN-06株的同源性达89.72%。通过诱导后发现,pET-28a(+)-OmpA重组菌最佳诱导条件为1mmol/LIPTG37℃诱导6h,表达的重组蛋白大小约为40ku,以包涵体的形式存在。Western blotting结果显示,约40ku的重组蛋白携带His标签。经生物信息学分析,OmpA分子式为C1684H2619N457O505S3,属碱性疏水蛋白,其多肽链的1-21位氨基酸为信号肽区域,并具有多种结构。综上所述,OmpA可能具有特殊结构,与众多外膜蛋白结构特点相似。本研究构建了多杀性巴氏杆菌OmpA基因原核表达系统,优化诱导条件后能稳定获得OmpA重组蛋白,为进一步探究巴氏杆菌的致病机理提供理论依据。
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关键词
多杀性巴氏杆菌
OmpA基因
原核表达
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题名
多杀性巴氏杆菌OmpA基因的原核表达及生物信息学分析
被引量：
7
1
作者
郑义盈
李宝宝
黄海峰
张振兴
章泸尹
张萌萌
安琪
王成强
陈杰
李彬
陈珍
杜丽
王凤阳
机构
海南大学动物科技学院海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海口市动物基因工程重点实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019年第7期1926-1934,共9页
基金
海南省重大科技计划项目(ZDKJ2016017-01)
国家肉羊产业技术体系(CARS-38)
文摘
本试验旨在探究羊源多杀性巴氏杆菌OmpA基因的原核表达及其生物信息学特征。以羊源多杀性巴氏杆菌HN-01株基因组为模板,设计特异性引物扩增OmpA基因;构建pET-28a(+)-OmpA重组质粒后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌经IPTG诱导表达;通过SDS-PAGE及Western blotting分析表达蛋白的特征,并运用生物信息学工具对OmpA基因序列进行分析。结果显示,羊源多杀性巴氏杆菌OmpA基因大小约为1044bp,该基因序列与HN-06株的同源性达89.72%。通过诱导后发现,pET-28a(+)-OmpA重组菌最佳诱导条件为1mmol/LIPTG37℃诱导6h,表达的重组蛋白大小约为40ku,以包涵体的形式存在。Western blotting结果显示,约40ku的重组蛋白携带His标签。经生物信息学分析,OmpA分子式为C1684H2619N457O505S3,属碱性疏水蛋白,其多肽链的1-21位氨基酸为信号肽区域,并具有多种结构。综上所述,OmpA可能具有特殊结构,与众多外膜蛋白结构特点相似。本研究构建了多杀性巴氏杆菌OmpA基因原核表达系统,优化诱导条件后能稳定获得OmpA重组蛋白,为进一步探究巴氏杆菌的致病机理提供理论依据。
关键词
多杀性巴氏杆菌
OmpA基因
原核表达
Keywords
Pasteurella multocida
OmpA gene
prokaryotic expression
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
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被引量
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1
多杀性巴氏杆菌OmpA基因的原核表达及生物信息学分析
郑义盈
李宝宝
黄海峰
张振兴
章泸尹
张萌萌
安琪
王成强
陈杰
李彬
陈珍
杜丽
王凤阳
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019
7
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