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基因Ⅳ型戊型肝炎病毒 ORF3对 HEK293细胞 MAPKs磷酸化的影响
被引量：
2
1
作者
杜丽
成鹰
+9 位作者
史巧芸
焦寒伟
荣辉
张珈宁
贾晓晓
郭莳雨
朱华培
赵天靖
徐开莲
王凤阳
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2014年第4期46-48,共3页
为了分析戊型肝炎病毒ORF3蛋白对于靶细胞MAPK磷酸化的影响,应用人磷酸化MAPK抗体微阵列比较稳定表达EGFP-ORF3的HEK293细胞和稳定表达EGFP的HEK293细胞的磷酸化MAPK表达谱,筛选获得显著上调/下调的磷酸化MAPK。结果表明,在稳定表达EGFP...
为了分析戊型肝炎病毒ORF3蛋白对于靶细胞MAPK磷酸化的影响,应用人磷酸化MAPK抗体微阵列比较稳定表达EGFP-ORF3的HEK293细胞和稳定表达EGFP的HEK293细胞的磷酸化MAPK表达谱,筛选获得显著上调/下调的磷酸化MAPK。结果表明,在稳定表达EGFP-ORF3的HEK293细胞,p-Akt2、p-Aktpan、p-ERK1、p-ERF2、p-RSK1的表达水平升高,而p-P38б表达水平降低。结果表明,ORF3蛋白影响了HEK293细胞的p-Akt2、p-Aktpan、p-ERK1、p-ERF2、p-RSK1、p-P38б等MAPKs的磷酸化水平,为HEV ORF3对于靶细胞磷酸化MAPK表达影响的分子机制研究提供了重要依据。
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关键词
蛋白芯片
戊型肝炎病毒
靶细胞
MAPK磷酸化
表达
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职称材料
牛乳状瘤病毒13型pEGFP-E5-N1真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达
2
作者
庞峰
史巧芸
+7 位作者
朱华培
徐开莲
赵天靖
李亚颖
彭冬梅
李国华
周海龙
王凤阳
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第5期1088-1092,共5页
基于海口市动物基因工程重点实验室获得的牛乳状瘤病毒13型(BPV-13)基因组序列信息(GenBank登录号:KM258443.2),以基因组为模板,扩增E5基因片段,将其连入pEGFP-N1质粒,构建重组质粒pEGFP-E5-N1,测序正确后瞬时转染HEK293细胞,应用荧光...
基于海口市动物基因工程重点实验室获得的牛乳状瘤病毒13型(BPV-13)基因组序列信息(GenBank登录号:KM258443.2),以基因组为模板,扩增E5基因片段,将其连入pEGFP-N1质粒,构建重组质粒pEGFP-E5-N1,测序正确后瞬时转染HEK293细胞,应用荧光显微镜、流式细胞仪、Western blotting鉴定融合蛋白的表达。结果显示,E5片段大小为135bp;重组质粒pEGFP-E5-N1构建正确;荧光显微镜下观察转染重组质粒pEGFP-E5-N1的HEK293细胞,可见明亮的绿色荧光;流式细胞术分析结果显示,转染重组质粒pEGFP-E5-N1 48h后,约55.59%的细胞表达绿色荧光蛋白;Western blotting结果表明,表达的融合蛋白大小约为32ku。本试验结果为下一步研究E5基因的作用机理奠定了基础。
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关键词
牛乳状瘤病毒13型(BPV-13)
E5
EGFP
融合蛋白
真核表达
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职称材料
题名
基因Ⅳ型戊型肝炎病毒 ORF3对 HEK293细胞 MAPKs磷酸化的影响
被引量：
2
1
作者
杜丽
成鹰
史巧芸
焦寒伟
荣辉
张珈宁
贾晓晓
郭莳雨
朱华培
赵天靖
徐开莲
王凤阳
机构
海南大学农学院海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海口市动物基因工程重点实验室
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2014年第4期46-48,共3页
基金
国家自然科学基金项目(31360618)
海南省社发专项(2012SF016)
海口市重点科技项目(2010-048)
文摘
为了分析戊型肝炎病毒ORF3蛋白对于靶细胞MAPK磷酸化的影响,应用人磷酸化MAPK抗体微阵列比较稳定表达EGFP-ORF3的HEK293细胞和稳定表达EGFP的HEK293细胞的磷酸化MAPK表达谱,筛选获得显著上调/下调的磷酸化MAPK。结果表明,在稳定表达EGFP-ORF3的HEK293细胞,p-Akt2、p-Aktpan、p-ERK1、p-ERF2、p-RSK1的表达水平升高,而p-P38б表达水平降低。结果表明,ORF3蛋白影响了HEK293细胞的p-Akt2、p-Aktpan、p-ERK1、p-ERF2、p-RSK1、p-P38б等MAPKs的磷酸化水平,为HEV ORF3对于靶细胞磷酸化MAPK表达影响的分子机制研究提供了重要依据。
关键词
蛋白芯片
戊型肝炎病毒
靶细胞
MAPK磷酸化
表达
Keywords
protein array
Hepatitis E virus
target cell
phospho-MAPK
expression
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
牛乳状瘤病毒13型pEGFP-E5-N1真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达
2
作者
庞峰
史巧芸
朱华培
徐开莲
赵天靖
李亚颖
彭冬梅
李国华
周海龙
王凤阳
机构
海南大学农学院海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海口市动物基因工程重点实验室
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015年第5期1088-1092,共5页
基金
海南大学"中西部"重点学科项目(ZXBJH-XK002)
文摘
基于海口市动物基因工程重点实验室获得的牛乳状瘤病毒13型(BPV-13)基因组序列信息(GenBank登录号:KM258443.2),以基因组为模板,扩增E5基因片段,将其连入pEGFP-N1质粒,构建重组质粒pEGFP-E5-N1,测序正确后瞬时转染HEK293细胞,应用荧光显微镜、流式细胞仪、Western blotting鉴定融合蛋白的表达。结果显示,E5片段大小为135bp;重组质粒pEGFP-E5-N1构建正确;荧光显微镜下观察转染重组质粒pEGFP-E5-N1的HEK293细胞,可见明亮的绿色荧光;流式细胞术分析结果显示,转染重组质粒pEGFP-E5-N1 48h后,约55.59%的细胞表达绿色荧光蛋白;Western blotting结果表明,表达的融合蛋白大小约为32ku。本试验结果为下一步研究E5基因的作用机理奠定了基础。
关键词
牛乳状瘤病毒13型(BPV-13)
E5
EGFP
融合蛋白
真核表达
Keywords
bovine papillomavirus type 13 （BPV-13）
ES
EGFP
fusion protein
eukaryotic ex- pression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基因Ⅳ型戊型肝炎病毒 ORF3对 HEK293细胞 MAPKs磷酸化的影响
杜丽
成鹰
史巧芸
焦寒伟
荣辉
张珈宁
贾晓晓
郭莳雨
朱华培
赵天靖
徐开莲
王凤阳
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2014
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
牛乳状瘤病毒13型pEGFP-E5-N1真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达
庞峰
史巧芸
朱华培
徐开莲
赵天靖
李亚颖
彭冬梅
李国华
周海龙
王凤阳
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2015
0
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