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益智仁抑制PFKFB3介导的糖酵解对糖尿病肾病上皮间充质转化的影响
1
作者 李小燕 袁勇 +5 位作者 王晶 马天鹏 李丽丹 颜子杰 肖曼 谢毅强 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第7期481-489,共9页
目的:利用体内和体外模型探究益智仁对糖尿病肾病上皮间充质转化的潜在治疗作用,并研究其作用机制。方法:体内实验:db/m小鼠作为空白组,将db/db小鼠分为模型组、阳性药物对照组(恩格列净组)、益智仁低、中、高剂量组。通过HE染色观察肾... 目的:利用体内和体外模型探究益智仁对糖尿病肾病上皮间充质转化的潜在治疗作用,并研究其作用机制。方法:体内实验:db/m小鼠作为空白组,将db/db小鼠分为模型组、阳性药物对照组(恩格列净组)、益智仁低、中、高剂量组。通过HE染色观察肾脏组织病理改变,采用RT-qPCR、Western blot检测肾脏组织中PFKFB3、E-cadherin、Col3α1和Vimentin的mRNA及蛋白表达水平。体外实验:将HK-2细胞分为空白组、模型组以及益智仁含药血清不同剂量组(低、中、高剂量组),同时设立恩格列净阳性对照组。经过24 h的药物干预后,首先通过划痕实验评估各组细胞的迁移能力,并据此确定最佳药物浓度。随后,采用RT-qPCR和Western blot技术,检测HK-2细胞中PFKFB3、E-cadherin、Col3α1和Vimentin的mRNA及蛋白表达水平;利用免疫荧光技术进一步验证EMT中关键蛋白Col3α1的表达情况。结果:体内实验:HE染色显示:与空白组相比,模型组肾小球体积增大、基底膜增厚,肾小管上皮细胞肿胀、管腔变窄,益智仁及恩格列净干预后各治疗组肾脏病理变化均有不同程度的减轻;在mRNA及蛋白表达水平中,与空白组相比,模型组E-cadherin表达水平显著下调(P<0.05),PFKFB3、Col3α1、Vimentin的表达水平则显著上调(P<0.05),与模型组比较,各给药组E-cadherin表达上调(P<0.05),PFKFB3、Col3α1、Vimentin的表达显著下调(P<0.05)。体外实验:与空白组相比,模型组细胞的迁移能力显著增强(P<0.05),与模型组比较,各含药血清组以及恩格列净组的HK-2细胞迁移能力均有所降低(P<0.05),其中以10%含药血清组降低最为明显;在mRNA及蛋白表达水平中,与空白组相比,模型组E-cadherin表达水平显著下调(P<0.05),PFKFB3、Col3α1、Vimentin的表达水平则显著上调(P<0.05),与模型组比较,各给药组E-cadherin的表达明显上调(P<0.05),PFKFB3、Col3α1、Vimentin的表达显著下调(P<0.05);与空白组比较,模型组Col3α1荧光表达水平升高,给予药物处理后Col3α1荧光表达水平下降。结论:益智仁通过抑制PFKFB3介导的异常糖酵解改善糖尿病肾病上皮间充质转化。 展开更多
关键词 益智仁 糖尿病肾病 糖酵解 上皮间充质转化
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阿霉素诱导MCF10A上皮细胞衰老模型的构建
2
作者 王增盛 牛祖彪 +7 位作者 张波 郝佳慧 朱一超 杨瑞刚 任禾 刘辰瑜 孙强 任立成 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第1期147-155,共9页
本研究旨在构建稳定的上皮细胞衰老模型,以期用于衰老细胞清除剂(senolytics)药物的筛选和评价研究。探究了阿霉素(doxorubicin)诱导人非转化乳腺上皮细胞系MCF 10A衰老的最佳条件,包括最佳诱导浓度、最佳干预时长和最佳衰老天数,并多... 本研究旨在构建稳定的上皮细胞衰老模型,以期用于衰老细胞清除剂(senolytics)药物的筛选和评价研究。探究了阿霉素(doxorubicin)诱导人非转化乳腺上皮细胞系MCF 10A衰老的最佳条件,包括最佳诱导浓度、最佳干预时长和最佳衰老天数,并多维度验证了MCF 10A作为细胞衰老模型的可行性。阿霉素诱导MCF 10A细胞衰老的最佳条件是:用0.6μmol/L的阿霉素处理16 h在第8 d MCF 10A细胞达到最佳衰老状态。在最佳诱导条件下,加药组的衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性率达到97%;同时,检测mRNA、蛋白质和免疫荧光(immunofluorescence,IF)的表达,结果显示:加药组细胞相对于正常细胞的衰老相关分泌表型(senescence-associated aecretory phenotype,SASP)、p16、p21和p53蛋白质的表达量均显著升高,核纤层蛋白B1(lamin B1)显著下降(P<0.001)。加药组细胞与衰老细胞特有特征一致。本研究用阿霉素成功构建了MCF 10A上皮细胞衰老模型,为基于衰老上皮细胞的衰老细胞清除剂的筛选奠定了研究基础。 展开更多
关键词 上皮细胞衰老模型 阿霉素 人非转化乳腺上皮细胞系MCF 10A 衰老相关-β-半乳糖苷酶 衰老相关分泌表型
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外泌体滴鼻对抑郁小鼠行为的影响及单胺类递质释放水平的改变观察
3
作者 田梦思 郑育杰 +2 位作者 沈雅婷 郭青云 易西南 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第15期1121-1129,共9页
目的:探讨脂肪间充质干细胞外泌体(ADMSCs-EXO)滴鼻对小鼠抑郁行为的影响及其基本作用机制。方法:采用慢性束缚应激法建立抑郁模型,分别施加EXO或PBS,每日1次持续8周,正常对照组小鼠不造模。采用悬尾、强迫游泳实验评估抑郁行为。免疫... 目的:探讨脂肪间充质干细胞外泌体(ADMSCs-EXO)滴鼻对小鼠抑郁行为的影响及其基本作用机制。方法:采用慢性束缚应激法建立抑郁模型,分别施加EXO或PBS,每日1次持续8周,正常对照组小鼠不造模。采用悬尾、强迫游泳实验评估抑郁行为。免疫荧光观测PKH26标记的EXO入脑路径。再次行为学测试后,ELISA实验检测海马单胺类递质变化。结果:EXO滴鼻后72 h内,EXO达海马等脑区。给药8周后,CMS+EXO组小鼠抑郁行为显著改善,具有统计学意义(P<0.05),且海马5-羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素含量显著增加,具有统计学意义(P<0.01)。结论:ADMSCs-EXO滴鼻可改善小鼠抑郁行为,提升单胺类递质含量。EXO滴鼻可能成为治疗抑郁症的新策略。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 外泌体 抑郁 行为 小鼠 单胺类神经递质
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糖毒诱饵在登革热媒介伊蚊防控中的应用与研究进展
4
作者 杨思琪 费小雯 +2 位作者 邓晓东 李俊材 薛春梅 《农业与技术》 2025年第19期83-88,共6页
糖毒诱饵在媒介蚊虫防控中的研究推进及实践应用已成为公共卫生领域近年来的热点话题。研究人员发现,向糖诱中加入特定毒剂制成糖毒诱饵能有效引诱并灭杀伊蚊、按蚊等媒介蚊虫,切断蚊媒传染病传播途径。同时糖毒诱饵的环境友好性与长期... 糖毒诱饵在媒介蚊虫防控中的研究推进及实践应用已成为公共卫生领域近年来的热点话题。研究人员发现,向糖诱中加入特定毒剂制成糖毒诱饵能有效引诱并灭杀伊蚊、按蚊等媒介蚊虫,切断蚊媒传染病传播途径。同时糖毒诱饵的环境友好性与长期适用性受到高度重视,相比传统化学杀虫药剂其对环境及非目标生物的危害较小。实际防控中糖毒诱饵已在登革热、疟疾等蚊媒传染病高发地区使用并收获明显防控成效。今后随着技术持续提升与研究逐步深化,糖毒诱饵在登革热媒介伊蚊防控中的应用潜力会更为可观。 展开更多
关键词 糖毒诱饵 伊蚊 登革热 杀虫剂 公共卫生
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益智仁提取物谷甾醇通过抑制铁死亡中的ETS-5基因表达延长秀丽隐杆线虫的寿命
5
作者 李军仪 陈思源 +10 位作者 谢力遥 王劲 程奥 张绍伟 林继瑜 方志涵 潘一锐 崔翀鹤 陈庚鑫 张超 李栎 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第8期1751-1757,共7页
目的阐明益智仁(AOF)提取物的抗衰老潜力,重点关注其对秀丽隐杆线虫(C.elegans)寿命的调控作用及ETS-5基因在铁死亡中的功能。方法用10μg/mL的谷甾醇(BS)处理秀丽隐杆线虫,记录线虫的生存时间并计算平均寿命,同时检测体长、运动能力和... 目的阐明益智仁(AOF)提取物的抗衰老潜力,重点关注其对秀丽隐杆线虫(C.elegans)寿命的调控作用及ETS-5基因在铁死亡中的功能。方法用10μg/mL的谷甾醇(BS)处理秀丽隐杆线虫,记录线虫的生存时间并计算平均寿命,同时检测体长、运动能力和生殖功能等生理指标。利用RNAi技术敲低ETS-5基因的表达,统计敲低后线虫的生存时间和平均寿命,并利用油红O染色、MDA水平和GSH/GSSG比值评估线虫体内的脂肪积累和脂质氧化还原稳态。通过qPCR检测铁死亡相关基因(FTN-1、GPX-1、AAT-9)的表达水平,通过酶活性分析检测谷甾醇处理和ETS-5 RNAi对AAT-9酶活性的影响,并在HUVEC细胞模型中验证BS对FEV核定位的影响。结果益智仁提取物BS延长线虫寿命(P<0.05)并促进脂质蓄积并降低脂质过氧化水平(P<0.05),对谷甾醇响应的关键基因ETS-5敲低也有相同的效果(P<0.05);ETS-5 RNAi导致铁死亡抑制因子GPX-1、AAT-9及FTN-1表达上调(P<0.05),GSH/GSSG上调表达(P<0.05)。结论BS通过影响ETS-5转录因子的表达进而影响铁死亡关键基因AAT-9酶的活性进而影响线虫的铁死亡,进而对线虫的衰老产生影响。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 衰老 铁死亡 ETS-5
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缩泉益肾方通过抗脂代谢紊乱和抗氧化应激延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用
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作者 李丽丹 王诗芸 +6 位作者 李小燕 王琦 陈彤 于欣 肖曼 马天鹏 谢毅强 《中成药》 北大核心 2025年第5期1642-1646,共5页
目的 探讨缩泉益肾方延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用。方法 评估缩泉益肾方水提取物的抑菌能力。将野生型秀丽隐杆线虫及daf-16(mu86)I、skn-1(mg70)Ⅳ和TJ356 (daf-16:GFP)突变株在含或不含缩泉益肾方的培养液中培养,评估其寿命、生殖力(... 目的 探讨缩泉益肾方延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用。方法 评估缩泉益肾方水提取物的抑菌能力。将野生型秀丽隐杆线虫及daf-16(mu86)I、skn-1(mg70)Ⅳ和TJ356 (daf-16:GFP)突变株在含或不含缩泉益肾方的培养液中培养,评估其寿命、生殖力(线虫产卵数)、运动能力(咽泵频率、头部运动、身体扭动)、抗应激能力、脂褐素沉积及TJ356(daf-16:GFP)突变株的核移位变化;油红O染色法检测线虫脂质积累变化,活性氧(ROS)试剂盒检测线虫ROS水平,RT-qPCR法检测daf-16、sod-3、gst-4、skn-1 mRNA表达。结果 与空白对照组比较,缩泉益肾方各剂量组抑菌能力无显著差异(P>0.05);缩泉益肾方中剂量组野生型线虫寿命增加,daf-16(mu86)I和skn-1(mg70)Ⅳ突变株寿命、线虫产卵数无显著差异(P>0.05);缩泉益肾方中剂量组野生型线虫运动能力升高(P<0.05,P<0.01),抗热应激和抗氧化应激能力升高,脂褐素沉积减少(P<0.01);TJ356(daf-16:GFP)突变株核移位升高;脂质堆积减少(P<0.01);抗氧化应激和衰老相关基因daf-16、sod-3、gst-4、skn-1 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论 缩泉益肾方可通过抗脂代谢紊乱和抗氧化延缓秀丽隐杆线虫的衰老。 展开更多
关键词 缩泉益肾方 秀丽隐杆线虫 衰老 脂代谢紊乱 抗氧化
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利用COⅠ基因鉴定海南省蚊种及白纹伊蚊种群的遗传多样性分析
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作者 邓晓东 李智杰 +4 位作者 何丽敏 薛春梅 伍丽娴 李俊才 费小雯 《热带生物学报(中英文)》 2025年第6期928-938,共11页
为获得海南最新蚊子种类信息,分析登革热传播媒介白纹伊蚊的种群遗传多样性及地理种群间分化和基因流状况,本研究从海南省4个地理区域收集蚊虫,PCR扩增COⅠ基因并测序,通过Blast比较鉴定蚊种。使用MEGA11对不同来源白纹伊蚊COⅠ基因序... 为获得海南最新蚊子种类信息,分析登革热传播媒介白纹伊蚊的种群遗传多样性及地理种群间分化和基因流状况,本研究从海南省4个地理区域收集蚊虫,PCR扩增COⅠ基因并测序,通过Blast比较鉴定蚊种。使用MEGA11对不同来源白纹伊蚊COⅠ基因序列进行比对,计算碱基的相对含量,计算碱基和密码子的使用频率。应用邻接算法来构建单倍型系统发育树。使用Dnasp6.0分析位点多态性、种群遗传距离、单倍型和多样性分析,以及错配分布分析。使用PopART 1.7软件构建单倍型网络图。使用Arlequin 3.1软件分析计算群体间遗传分化系数(Fst值)、基因流(Nm值)。使用分子变异分析(Analysis of molecular variance,AMOVA)法分析种群内和种群间的遗传变异。研究结果表明,共捕获8属43种吸血蚊种,它们分别属于按蚊属(Anopheles)、库蚊属(Culex)、伊蚊属(Aedes)、阿蚊属(Armigeres)、巨蚊属(Toxorhynchites)、曼蚊属(Mansonia)、小蚊属(Mimomyia)和煞蚊属(Sabethes)。共鉴定了19种按蚊、13种库蚊、6种伊蚊,以及少量的骚扰阿蚊(Armigeres subalbatus)、吕宋小蚊(Mimomyia luzonensis)、巨蚊(Toxorhynchites ambionensis)、常型曼蚊(Mansonia uniformis)和煞蚊(Sabethes glaucodaemo)。研究发现白纹伊蚊三亚种群和儋州种群之间为中度分化,其他种群两两之间处于轻度分化,基因交流频繁。白纹伊蚊种群中的中国海南种群与中国云南种群和老挝种群、越南种群、马来西亚种群之间遗传分化较低,存在明显的基因交流。这揭示海南岛外的病毒有传进岛内的安全隐患,本研究结果对海南岛公共卫生具有重要的意义。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ 种群遗传多样性
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