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长链非编码RNA GAPLINC对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖表型的影响
被引量：
3
1
作者
莫碧瑶
肖璐
+3 位作者
詹宇威
杨洋
刘莉
林书典
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期792-800,共9页
【目的】探讨长链非编码RNA GAPLINC对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)增殖表型的影响。【方法】收集2022年1月至2022年12月于海南医学院附属海南医院行滑膜清理术或膝关节置换术的4例RA患者及3例创伤性关节炎废弃滑膜组织,分离...
【目的】探讨长链非编码RNA GAPLINC对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)增殖表型的影响。【方法】收集2022年1月至2022年12月于海南医学院附属海南医院行滑膜清理术或膝关节置换术的4例RA患者及3例创伤性关节炎废弃滑膜组织,分离培养并鉴定FLS细胞。通过qPCR法检测RA组和创伤组滑膜细胞内Ln⁃cRNA GAPLINC表达水平。利用siRNA干扰技术靶向敲低GAPLINC表达,通过EdU法检测各组细胞增殖水平、流式细胞术检测各组细胞的细胞周期分布情况。通过qPCR法与WB法检测细胞周期调控蛋白cyclin D1、PCNA及周期抑制蛋白P21的表达水平。【结果】本研究通过qRCR验证发现,RA组LncRNA GAPLINC表达水平明显高于创伤组(P<0.05);特异性siRNA对GAPLINC的干扰效率为(85.96±1.76)%(P<0.05)。敲低GAPLINC后,EdU细胞增殖实验显示,与空白对照组(6.02±0.48)%、溶剂对照组(6.32±1.48)%和阴性对照组(6.12±1.51)%相比,GAPLINC干扰组S期细胞占(2.89±1.53)%,较各对照组明显降低(P<0.05)。利用流式细胞术检测各组细胞周期分布,结果显示GAPLINC干扰组PI值,即S+G2/M期细胞所占的百分比为(14.92±5.34)%,明显低于空白对照组(29.68±8.48)%、溶剂对照组(28.97±6.82)%、阴性对照组(31.13±5.13)%(P<0.05)。敲低GAPLINC后,与增殖表型正相关的基因Cyclin D1和PCNA的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05),而与增殖表型负相关的基因p21表达上调(P<0.05)。【结论】Ln⁃cRNA GAPLINC在RA-FLS细胞中高表达,敲低GAPLINC表达后,能显著降低RA-FLS细胞增殖活性,抑制细胞周期转化,提示LncRNA GAPLINC可能影响RA-FLS细胞增殖表型,导致滑膜异常增生,参与RA疾病的进展。
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关键词
长链非编码RNA
类风湿关节炎
滑膜增生
成纤维样滑膜细胞
细胞增殖
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职称材料
题名
长链非编码RNA GAPLINC对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖表型的影响
被引量：
3
1
作者
莫碧瑶
肖璐
詹宇威
杨洋
刘莉
林书典
机构
海南医学院附属海南医院//海南省人民医院风湿免疫科
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期792-800,共9页
基金
海南省自然科学基金青年基金(820QN385),海南省省级临床医学中心建设项目(琼卫医函〔2021〕276号)。
文摘
【目的】探讨长链非编码RNA GAPLINC对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)增殖表型的影响。【方法】收集2022年1月至2022年12月于海南医学院附属海南医院行滑膜清理术或膝关节置换术的4例RA患者及3例创伤性关节炎废弃滑膜组织,分离培养并鉴定FLS细胞。通过qPCR法检测RA组和创伤组滑膜细胞内Ln⁃cRNA GAPLINC表达水平。利用siRNA干扰技术靶向敲低GAPLINC表达,通过EdU法检测各组细胞增殖水平、流式细胞术检测各组细胞的细胞周期分布情况。通过qPCR法与WB法检测细胞周期调控蛋白cyclin D1、PCNA及周期抑制蛋白P21的表达水平。【结果】本研究通过qRCR验证发现,RA组LncRNA GAPLINC表达水平明显高于创伤组(P<0.05);特异性siRNA对GAPLINC的干扰效率为(85.96±1.76)%(P<0.05)。敲低GAPLINC后,EdU细胞增殖实验显示,与空白对照组(6.02±0.48)%、溶剂对照组(6.32±1.48)%和阴性对照组(6.12±1.51)%相比,GAPLINC干扰组S期细胞占(2.89±1.53)%,较各对照组明显降低(P<0.05)。利用流式细胞术检测各组细胞周期分布,结果显示GAPLINC干扰组PI值,即S+G2/M期细胞所占的百分比为(14.92±5.34)%,明显低于空白对照组(29.68±8.48)%、溶剂对照组(28.97±6.82)%、阴性对照组(31.13±5.13)%(P<0.05)。敲低GAPLINC后,与增殖表型正相关的基因Cyclin D1和PCNA的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05),而与增殖表型负相关的基因p21表达上调(P<0.05)。【结论】Ln⁃cRNA GAPLINC在RA-FLS细胞中高表达,敲低GAPLINC表达后,能显著降低RA-FLS细胞增殖活性,抑制细胞周期转化,提示LncRNA GAPLINC可能影响RA-FLS细胞增殖表型,导致滑膜异常增生,参与RA疾病的进展。
关键词
长链非编码RNA
类风湿关节炎
滑膜增生
成纤维样滑膜细胞
细胞增殖
Keywords
long non-coding RNA
rheumatoid arthritis
synovial hyperplasia
fibroblast-like synoviocytes
cell proliferation
分类号
R593.22 [医药卫生—内科学]
R363 [医药卫生—病理学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
长链非编码RNA GAPLINC对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖表型的影响
莫碧瑶
肖璐
詹宇威
杨洋
刘莉
林书典
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
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