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USP10对KLF4蛋白的调控及对肝细胞癌侵袭的影响
被引量：
1
1
作者
陆路
黎东明
+4 位作者
王学国
冉博
王太成
赵红岩
李鹏
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第7期1181-1187,共7页
目的探究泛素特异蛋白酶10(USP10)对肝细胞癌(HCC)中Krüppe样因子4(KLF4)蛋白的调控及对HCC细胞增殖与侵袭的影响。方法采用Western blot实验检测USP10和KLF4在人正常肝细胞系L02和HCC细胞系HepG2、HUH7、HCCLM3等中的表达差异。选...
目的探究泛素特异蛋白酶10(USP10)对肝细胞癌(HCC)中Krüppe样因子4(KLF4)蛋白的调控及对HCC细胞增殖与侵袭的影响。方法采用Western blot实验检测USP10和KLF4在人正常肝细胞系L02和HCC细胞系HepG2、HUH7、HCCLM3等中的表达差异。选取HCCLM3和HUH7细胞,将过表达或沉默USP10的慢病毒颗粒(oe-USP10或sh-USP10)转染入细胞中,并将其记为oe-USP10组和oe-NC组。免疫共沉淀(Co-IP)实验检测HCCLM3或HUH7细胞中USP10是否可与KLF4直接结合。加入蛋白酶体抑制剂MG132,再次使用Co-IP检测转染oe-USP10或sh-USP10的HCCLM3和HUH7细胞中KLF4蛋白的泛素化水平。将过表达KLF4的pcDNA3.1载体质粒及其阴性对照质粒(pc-KLF4或pc-NC)共转染入HCCLM3和HUH7的sh-USP10组或sh-NC组细胞中,并将细胞记为sh-NC+pc-NC组、sh-USP10+pc-NC组、sh-NC+pc-KLF4组和sh-USP10+pc-KLF4组,采用CCK-8法检测HCCLM3和HUH7中各组细胞的增殖活力,Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果与L02细胞比较,USP10和KLF4在HepG2、HUH7、HCCLM3等细胞中蛋白表达均降低(P<0.05)。在HCCLM3和HUH7细胞中,USP10蛋白可直接与KLF4相互结合。同时,MG132处理后,HCCLM3和HUH7细胞中KLF4蛋白表达量呈时间依赖性增加。沉默USP10可增加HCCLM3与HUH7细胞中KLF4的泛素化,过表达USP10可降低上述细胞中KLF4的泛素化水平。与sh-NC+pc-NC组比较,sh-USP10+pc-NC组中HCCLM3和HUH7的增殖和侵袭能力均升高(P<0.01),而sh-NC+pc-KLF4组和sh-USP10+pc-KLF4组的HCCLM3或HUH7细胞增殖和侵袭能力均降低(P<0.05);与sh-USP10+pc-NC组比较,sh-USP10+pc-KLF4组细胞的增殖和侵袭能力均降低(P<0.05)。结论在HCC细胞中USP10通过去泛素化促进KLF4蛋白稳定性,进而抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭。
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关键词
肝细胞癌
泛素特异蛋白酶10
去泛素化
Krüppe样因子4
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职称材料
编码IL-7的溶瘤疱疹病毒通过激活CD8^(+)T细胞增强对肝癌的杀伤活性
2
作者
黎东明
李鹏
+3 位作者
陆路
王学国
王太成
赵红岩
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期122-126,共5页
目的:探究分泌IL-7的溶瘤疱疹病毒(HSV)是否可以通过激活CD8^(+)T细胞抑制肝癌生长。方法:Western blot检测IL-7表达情况;结晶紫染色法检测溶瘤病毒HSV以及HSV-IL-7对肿瘤细胞的体外裂解情况;皮下移植瘤模型检测HSV以及HSV-IL-7对肿瘤...
目的:探究分泌IL-7的溶瘤疱疹病毒(HSV)是否可以通过激活CD8^(+)T细胞抑制肝癌生长。方法:Western blot检测IL-7表达情况;结晶紫染色法检测溶瘤病毒HSV以及HSV-IL-7对肿瘤细胞的体外裂解情况;皮下移植瘤模型检测HSV以及HSV-IL-7对肿瘤的抑制能力;ELISA法检测血清以及肿瘤组织中IL-7、IFN-γ、TNF-α含量;免疫组化法检测肿瘤组织中CD8^(+)T细胞的浸润情况;流式细胞术检测肿瘤浸润CD8^(+)T细胞Granzyme B的分泌水平。结果:HSV-IL-7感染的肿瘤细胞均高表达IL-7;HSV以及HSV-IL-7在体外均可以有效裂解B16-F10、CT-26以及H22肿瘤细胞系,且具有剂量依赖性;HSV-IL-7可以显著抑制H22肝癌细胞的体内生长(P<0.01),延长荷瘤小鼠的生存期(P<0.001);HSV-IL-7可以显著提高肿瘤部位IL-7的含量(P<0.0001),同时有效增加肿瘤浸润CD8^(+)T细胞的数目(P<0.001);HSV-IL-7可以显著增强肿瘤浸润CD8^(+)T细胞分泌Gran-zyme B的能力以及增加肿瘤组织中IFN-γ和TNF-α含量(P<0.0001)。结论:HSV-IL-7在体内外均具有良好的肿瘤抑制活性,同时其可以通过分泌IL-7,激活体内CD8^(+)T细胞的抗肿瘤性,从而进一步抑制肿瘤生长并延长荷瘤小鼠的生存期。
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关键词
肝癌
溶瘤病毒
单纯疱疹病毒
IL-7
T细胞
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职称材料
题名
USP10对KLF4蛋白的调控及对肝细胞癌侵袭的影响
被引量：
1
1
作者
陆路
黎东明
王学国
冉博
王太成
赵红岩
李鹏
机构
海南医学院第二附属医院肝胆胰腺外科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第7期1181-1187,共7页
基金
海南省基础与应用基础研究计划项目(编号:821MS0833)。
文摘
目的探究泛素特异蛋白酶10(USP10)对肝细胞癌(HCC)中Krüppe样因子4(KLF4)蛋白的调控及对HCC细胞增殖与侵袭的影响。方法采用Western blot实验检测USP10和KLF4在人正常肝细胞系L02和HCC细胞系HepG2、HUH7、HCCLM3等中的表达差异。选取HCCLM3和HUH7细胞,将过表达或沉默USP10的慢病毒颗粒(oe-USP10或sh-USP10)转染入细胞中,并将其记为oe-USP10组和oe-NC组。免疫共沉淀(Co-IP)实验检测HCCLM3或HUH7细胞中USP10是否可与KLF4直接结合。加入蛋白酶体抑制剂MG132,再次使用Co-IP检测转染oe-USP10或sh-USP10的HCCLM3和HUH7细胞中KLF4蛋白的泛素化水平。将过表达KLF4的pcDNA3.1载体质粒及其阴性对照质粒(pc-KLF4或pc-NC)共转染入HCCLM3和HUH7的sh-USP10组或sh-NC组细胞中,并将细胞记为sh-NC+pc-NC组、sh-USP10+pc-NC组、sh-NC+pc-KLF4组和sh-USP10+pc-KLF4组,采用CCK-8法检测HCCLM3和HUH7中各组细胞的增殖活力,Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果与L02细胞比较,USP10和KLF4在HepG2、HUH7、HCCLM3等细胞中蛋白表达均降低(P<0.05)。在HCCLM3和HUH7细胞中,USP10蛋白可直接与KLF4相互结合。同时,MG132处理后,HCCLM3和HUH7细胞中KLF4蛋白表达量呈时间依赖性增加。沉默USP10可增加HCCLM3与HUH7细胞中KLF4的泛素化,过表达USP10可降低上述细胞中KLF4的泛素化水平。与sh-NC+pc-NC组比较,sh-USP10+pc-NC组中HCCLM3和HUH7的增殖和侵袭能力均升高(P<0.01),而sh-NC+pc-KLF4组和sh-USP10+pc-KLF4组的HCCLM3或HUH7细胞增殖和侵袭能力均降低(P<0.05);与sh-USP10+pc-NC组比较,sh-USP10+pc-KLF4组细胞的增殖和侵袭能力均降低(P<0.05)。结论在HCC细胞中USP10通过去泛素化促进KLF4蛋白稳定性,进而抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭。
关键词
肝细胞癌
泛素特异蛋白酶10
去泛素化
Krüppe样因子4
Keywords
hepatocellular carcinoma
ubiquitin-specific protease 10
deubiquitination
Krüppel-like factor 4
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
编码IL-7的溶瘤疱疹病毒通过激活CD8^(+)T细胞增强对肝癌的杀伤活性
2
作者
黎东明
李鹏
陆路
王学国
王太成
赵红岩
机构
海南医学院第二附属医院肝胆胰腺外科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期122-126,共5页
基金
海南省卫生健康行业科研项目(20A200101)。
文摘
目的:探究分泌IL-7的溶瘤疱疹病毒(HSV)是否可以通过激活CD8^(+)T细胞抑制肝癌生长。方法:Western blot检测IL-7表达情况;结晶紫染色法检测溶瘤病毒HSV以及HSV-IL-7对肿瘤细胞的体外裂解情况;皮下移植瘤模型检测HSV以及HSV-IL-7对肿瘤的抑制能力;ELISA法检测血清以及肿瘤组织中IL-7、IFN-γ、TNF-α含量;免疫组化法检测肿瘤组织中CD8^(+)T细胞的浸润情况;流式细胞术检测肿瘤浸润CD8^(+)T细胞Granzyme B的分泌水平。结果:HSV-IL-7感染的肿瘤细胞均高表达IL-7;HSV以及HSV-IL-7在体外均可以有效裂解B16-F10、CT-26以及H22肿瘤细胞系,且具有剂量依赖性;HSV-IL-7可以显著抑制H22肝癌细胞的体内生长(P<0.01),延长荷瘤小鼠的生存期(P<0.001);HSV-IL-7可以显著提高肿瘤部位IL-7的含量(P<0.0001),同时有效增加肿瘤浸润CD8^(+)T细胞的数目(P<0.001);HSV-IL-7可以显著增强肿瘤浸润CD8^(+)T细胞分泌Gran-zyme B的能力以及增加肿瘤组织中IFN-γ和TNF-α含量(P<0.0001)。结论:HSV-IL-7在体内外均具有良好的肿瘤抑制活性,同时其可以通过分泌IL-7,激活体内CD8^(+)T细胞的抗肿瘤性,从而进一步抑制肿瘤生长并延长荷瘤小鼠的生存期。
关键词
肝癌
溶瘤病毒
单纯疱疹病毒
IL-7
T细胞
Keywords
Liver cancer
Oncolytic virus
Herpes simplex virus
IL-7
T cells
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
USP10对KLF4蛋白的调控及对肝细胞癌侵袭的影响
陆路
黎东明
王学国
冉博
王太成
赵红岩
李鹏
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024
1
在线阅读
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职称材料
2
编码IL-7的溶瘤疱疹病毒通过激活CD8^(+)T细胞增强对肝癌的杀伤活性
黎东明
李鹏
陆路
王学国
王太成
赵红岩
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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